关于体外诊断试剂质量研究工作的一些共性要求

1、.：.；关于体外诊断试剂质量研讨任务的一些共性要求 【临床药学讨论版】审评五部 生物制品室 张丽体外诊断试剂质量研讨任务是产品研发的重要内容之一，也是技术审评中的重点内容。质量研讨的结果是制定产品的规范的重要根据。同时，其中的部分内容也将收录入运用阐明书中，用以协助 检验师和临床医师正确运用以及准确判别检验结果。 诊断试剂产品所涉及到的学科跨度较大、技术开展快、种类繁杂，不同类型产品的质量研讨任务既有一样的共性要求，也需求根据产品的特点在某些方面有所偏重 .摘自： 医 学教 育网med66 。本文主要针对该项研讨任务中的一些共性问题谈一些意见，以期与研发者共同交流。 一、质量研讨任务需求思索到

2、的几个问题 1.不同产品如定性测定、定量测定、血型定型产品等质量研讨的内容不完全一样，研发者应详细问题详细分析。质量研讨的内容应尽能够的全面，即要包括通用性工程，又要包括针对性工程。同时必需采用多批产品进展质量研讨，以提高产质量量研讨结果的可靠性。 2.尽能够采用于患者的样品或样品池进展质量研讨。添加样品或质控品或规范品可作为质量研讨的补充，但不建议运用这些样品作为质量研讨的独一基质，由于这些样品能够无法对产品的性能目的进展全面的评价。 3.尽能够采用产品运用阐明书中向用户引荐的实验方法，包括样本处置如细胞裂解、提取和离心等、质量控制及校准程序等进展质量研讨，以便能反映产品预期的性能。 4.建

3、议详细阐明质量研讨的方法，以便能正确的了解质量研讨结果。如参照 NCCLS有关文献时, 建议阐明援用的文献，阐明进展了那些方面的修正。 5.如在质量研讨中运用了添加样品，建议提供有关添加物的详细信息如纯度、浓度等。 6.如采用不同类型的样本作为被测物如血清、全血等，必需证明不同类型样品的测定结果间有很高的相关性。 二、质量研讨任务中的方法学验证及调查 方法学验证和调查是一切体外诊断试剂质量研讨所必需开展的任务。方法学验证及调查任务普通包括：精细度、测定范围、灵敏度、特异性、准确度以及与同类产品或其他方法的对比、样品保管和处置条件等。 1.精细度 1.1 建议最少运用三个浓度的样品进展精细度的研

4、讨。宜选择医学上具有决议意义的样本浓度。 1.2 为了评价全部实验步骤的精细度，应对样本预处置方法(如核酸提取等)的影响进展评价，既应对每一反复实验分别进展样本的预处置。 1.3 建议学习NCCLS EP05-A文件 Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline，该文件对实验设计、样本选择、统计方法等进展了详细的阐明。 2、范围 2.1 建议至少采用在测定范围内的5个浓度样品进展测定范围的研讨，该样品浓度应平均分布于试剂盒的整个测定范围。建议对每一个期望浓度样本分别进展

5、预处置，以评价预处置对测定范围的影响。 2.2 某些免疫学试剂存在“HOOK效应，建议将用于测定范围研讨的浓度范围扩展，直到临床上出现的最高浓度，以评价能否存在HOOK效应。 2.3 如建议对超出测定范围的样品进展稀释，应对稀释方法进展研讨和评价。 2.4 建议学习NCCLS EP06-A 文件 Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods; Approved Guideline。该文件对样本制备的方案、样本的分配、实验方法、统计方法及评价方法进展了详细的阐明。 3.灵敏度 3.1 灵敏度是指该方法对被测物所能测出

6、的最小量，而临床灵敏度是指该方法对疾病人群正确检测的比例。质量研讨中需求进展分析灵敏度的研讨。 3.2 建议对每一被测样本分别进展样本预处置，既模拟患者样品的实践实验方法，以评价样本预处置对检测灵敏度的影响。 3.3 应在检测灵敏度程度处评价测定偏向及精细度，以阐明检测灵敏度所可以满足的精细度要求。 3.4 对于定性测定产品而言，可以将高浓度样本进展稀释，以最高稀释倍数作为检测灵敏度。 3.5 建议学习NCCLS EP17-P文件 Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Pro

7、posed Guideline。 4.特异性 4.1 分析特异性是指该方法仅仅测定某种被测物的才干，临床特异性是指该方法对无疾病人群正确检测的比例。质量研讨中需求进展分析特异性的研讨。 4.2 在分析特异研讨中，建议在以下方面思索影响要素： 1样本中含有能够影响检测特异性的内源化合物：如血样本中胆红素、血酯、血红蛋白等。尿样本中的尿糖、尿蛋白等。 2与被测物构造相近化合物：如甲基安非他明检测试剂盒，构造类似物包括麻黄碱、安非他命、MDEA、MDMA、雷尼替丁、普鲁卡因、盐酸去甲肾上腺素、可待因、芬太尼酒精、吗啡等。如HCG测定试剂盒，构造类似物包括FSH、 LH和TSH等。 3分类位置相近或临

8、床感染部位相近的微生物，如丙型肝炎病毒中心抗原测定试剂盒，分类位置相近或临床感染部位相近的病毒包括CMV、EBV、HIV、HSV、HTLV、HAV、HBV等。 4与样品接触的抗凝剂和防腐剂：如EDTA等。 4.3 建议学习NCCLS Document EP07-A Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline。 5.准确度对于定量测定产品而言，可以采用对国际或国家规范品的测定、参与回收实验等方法，评价该产品的测定准确度。 6.与同类产品或其他方法的对比实验 6.1 在质量研讨阶段进展的对比实验，是研发者在研发单位内

9、部进展的小样本量临床研讨，其结果是该产品能否可以进展真正的大样本量临床研讨的重要根据。所以对比实验方法的科学性、规范性是实验结果科学、可靠的根底和保证，更是该产品临床研讨胜利与否的重要根底。 6.2 在质量研讨阶段进展的对比实验更注重实验的方案性：强调对拟采用的对比试剂对比方法及被测样本的充分了解。强调样本分配的合理性，由于对不同组样本的对比实验结果能够得到不同的实验结论。以定量测定产品为例，应该了解对比试剂的方法学，临床运用目的和范围，主要质量目的，如检测灵敏度、定量测定范围、测定精细度、规范品校准品的溯源情况、引荐的参考值参考范围等。而对于被测样本，应尽能够包括在常规任务中能够遇到的各种样

10、本如疾病、相关疾病、溶血、脂血、黄疸等样本，且被测物浓度均匀分布于测定范围内。应充分了解被测样本患者的详细临床资料，以便对实验结果进展综合的分析。 6.3 对于定量测定产品，建议学习NCCLS Document EP09-A2Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline。对于定性测定产品，在实验设计、样本选择原那么等方面亦可参考上述文献。 7、样品保管和处置条件 建议对阐明书建议的样品保管时间、条件等，包括温度和冷冻/解冻允许的循环数等进展研讨，以建立样品保管和处置条件下可接受的规

11、范。 本文仅针对质量研讨的一些共性问题进展了讨论，不同类型产品还需研讨者根据其特点开展有针对性的研讨。建议研发者加强对NCCLS系列指点性文件的学习。目前一些申办者已采用NCCLS文件中所引荐的方法开展质量研讨，并将其研讨结果纳入运用阐明书。审评五部 生物制品室 张丽 体外诊断试剂质量研讨任务是产品研发的重要内容之一，也是技术审评中的重点内容。质量研讨的结果是制定产品的规范的重要根据。同时，其中的部分内容也将收录入运用阐明书中，用以协助 检验师和临床医师正确运用以及准确判别检验结果。 诊断试剂产品所涉及到的学科跨度较大、技术开展快、种类繁杂，不同类型产品的质量研讨任务既有一样的共性要求，也需求

12、根据产品的特点在某些方面有所偏重。本文主要针对该项研讨任务中的一些共性问题谈一些意见，以期与研发者共同交流。 一、质量研讨任务需求思索到的几个问题 1.不同产品如定性测定、定量测定、血型定型产品等质量研讨的内容不完全一样，研发者应详细问题详细分析。质量研讨的内容应尽能够的全面，即要包括通用性工程，又要包括针对性工程。同时必需采用多批产品进展质量研讨，以提高产质量量研讨结果的可靠性。 2.尽能够采用于患者的样品或样品池进展质量研讨。添加样品或质控品或规范品可作为质量研讨的补充，但不建议运用这些样品作为质量研讨的独一基质，由于这些样品能够无法对产品的性能目的进展全面的评价。 3.尽能够采用产品运用

13、阐明书中向用户引荐的实验方法，包括样本处置如细胞裂解、提取和离心等、质量控制及校准程序等进展质量研讨，以便能反映产品预期的性能。 4.建议详细阐明质量研讨的方法，以便能正确的了解质量研讨结果。如参照 NCCLS有关文献时, 建议阐明援用的文献，阐明进展了那些方面的修正。 5.如在质量研讨中运用了添加样品，建议提供有关添加物的详细信息如纯度、浓度等。 6.如采用不同类型的样本作为被测物如血清、全血等，必需证明不同类型样品的测定结果间有很高的相关性。 二、质量研讨任务中的方法学验证及调查 方法学验证和调查是一切体外诊断试剂质量研讨所必需开展的任务。方法学验证及调查任务普通包括：精细度、测定范围、灵

14、敏度、特异性、准确度以及与同类产品或其他方法的对比、样品保管和处置条件等。 1.精细度 1.1 建议最少运用三个浓度的样品进展精细度的研讨。宜选择医学上具有决议意义的样本浓度。 1.2 为了评价全部实验步骤的精细度，应对样本预处置方法(如核酸提取等)的影响进展评价，既应对每一反复实验分别进展样本的预处置。 1.3 建议学习NCCLS EP05-A文件 Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline，该文件对实验设计、样本选择、统计方法等进展了详细的阐明。 2、范围 2.1

15、 建议至少采用在测定范围内的5个浓度样品进展测定范围的研讨，该样品浓度应平均分布于试剂盒的整个测定范围。建议对每一个期望浓度样本分别进展预处置，以评价预处置对测定范围的影响。 2.2 某些免疫学试剂存在“HOOK效应，建议将用于测定范围研讨的浓度范围扩展，直到临床上出现的最高浓度，以评价能否存在HOOK效应。 2.3 如建议对超出测定范围的样品进展稀释，应对稀释方法进展研讨和评价。 2.4 建议学习NCCLS EP06-A 文件 Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods; Approved Guideline。

16、该文件对样本制备的方案、样本的分配、实验方法、统计方法及评价方法进展了详细的阐明。 3.灵敏度 3.1 灵敏度是指该方法对被测物所能测出的最小量，而临床灵敏度是指该方法对疾病人群正确检测的比例。质量研讨中需求进展分析灵敏度的研讨。 3.2 建议对每一被测样本分别进展样本预处置，既模拟患者样品的实践实验方法，以评价样本预处置对检测灵敏度的影响。 3.3 应在检测灵敏度程度处评价测定偏向及精细度，以阐明检测灵敏度所可以满足的精细度要求。 3.4 对于定性测定产品而言，可以将高浓度样本进展稀释，以最高稀释倍数作为检测灵敏度。 3.5 建议学习NCCLS EP17-P文件 Protocols for

17、Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Proposed Guideline。 4.特异性 4.1 分析特异性是指该方法仅仅测定某种被测物的才干，临床特异性是指该方法对无疾病人群正确检测的比例。质量研讨中需求进展分析特异性的研讨。 4.2 在分析特异研讨中，建议在以下方面思索影响要素： 1样本中含有能够影响检测特异性的内源化合物：如血样本中胆红素、血酯、血红蛋白等。尿样本中的尿糖、尿蛋白等。 2与被测物构造相近化合物：如甲基安非他明检测试剂盒，构造类似物包括麻黄碱、安非他命、MDEA、MDMA、雷尼替丁、

18、普鲁卡因、盐酸去甲肾上腺素、可待因、芬太尼酒精、吗啡等。如HCG测定试剂盒，构造类似物包括FSH、 LH和TSH等。 3分类位置相近或临床感染部位相近的微生物，如丙型肝炎病毒中心抗原测定试剂盒，分类位置相近或临床感染部位相近的病毒包括CMV、EBV、HIV、HSV、HTLV、HAV、HBV等。 4与样品接触的抗凝剂和防腐剂：如EDTA等。 4.3 建议学习NCCLS Document EP07-A Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline。 5.准确度对于定量测定产品而言，可以采用对国际或国家规范品的测定、参与回收实验等方法，评价该产品的测定准确度。 6.与同类产品或其他方法的对比实验 6.1 在质量研讨阶段进展的对比实验，是研发者在研发单位内部进展的小样本量临床研讨，其结果是该产品能否可以进展真正的大样本量临床研讨的重要根据。所以对比实验方法的科学性、规范性是实验结果科学、可靠的根底和保证，更是该产品临床研讨胜利与否的重要根底。 6.2 在质量