鱼病专题-日本国立北海道大学兽医学部传染病学讲座3

1、鱼病专题日本国立北海道大学兽医学部传染病学讲座三、鱼类细菌性疾病3.10 Streptococcicosis (链球菌症) 本症已被确认发生的鱼种有虹鳟、鳗、鹺鱼、狮鱼、Oncorhychus rhodurus及Tilapia nilotica等。多数的病原菌种名尚未确定，但可以分为以下三种，即streptococcus faecalis是虹鳟的病原菌，和S. equisimils相类似但未确定种名的是鹺鱼，Oncorhychus rhodurus及Tilapia niltica的病原菌，Streptococcus sp.为狮鱼、鳗鱼的病原菌。目前就养殖业而言，被害最大且常见的是狮鱼的链球菌症

2、，这里以狮鱼为例，加以详细说明之。(1)病 因 最初从发病狮鱼所分离出来的细菌，有和Streptoccus faecalis及S. faecium相似的性状，但因尚未能同定属那一种，乃以Streptoccus sp.报告之。本病原菌在BHI培养基上，25度培养24小时後，形成直径0.5mm以下的正圆形，周围圆滑的白色微小菌落。在普通培养基上发育不良，但在远藤、40胆汁培养基上则发育良好。本菌为球形(0.714m)，链锁状成列的Gram阳性球菌。培养温度范围1045度，至适温度2037度，培养pH值范围3.510，至适pH值7.6，培养盐浓度范围07，至适盐浓度0。(2)症 状 夏至秋的流行期间

3、，病鱼眼球突出，眼球周围出血及鳃盖内侧多量出血是本症的主要特徵。当水温较低时，除以上的症状外，还有各鳍的变赤、糜烂、体表特别是尾柄部出现血脓鶪及溃疡。开腹剖检可见幽门、肝、脾、肾脏及肠管有点状出血或出血斑。病理组织学特徵乃为眼部、鳃盖内侧、尾柄病巢部、脑及心脏等组织内出现化脓性及肉芽肿性的炎症变化。最近，不表现出典型的症状就死亡的病例已被确认。这些病鱼以狂奔游泳等异常行动而主要特徵。从病鱼脑(视叶内部第3脑室)及鼻腔内可容易地分离出病原菌。(3)诊 断 由眼球突出及鳃盖内侧出血等外观特微可诊断本病。但并不出现典型症状和病理变化的病鱼，还需进行细菌学检查。在EF培养基上由病鱼的脑、鼻腔等病变部可

4、分离出细菌。30度，3648个小时培养後，在EF培养其出现浓紫色或赤紫色的小菌落。所分离的streptococcus sp.疑似菌落再用Gram染色，镜检确认是否为Gram阳性球菌。用40胆汁培养，及添加6.5NaCl确定是否发育，再加以玻片凝集反应为辅助来同定之。(4)对 策 维护鱼的健康环境及良好管理是相当重要的。避免一种饲料的固定给饵及鲜度不良的食饵投与。保持适当的饲养密度及死亡鱼的迅速除去等对预防、及减轻被害是有效的。浸渍免疫及经口免疫疫苗已有实验的报告，但离实用阶段尚远。治疗时可用Dorycycline，Erythromycin及Spiramycin三种抗生素，该抗生素的特徵是在 鱼

5、体内残留期间长，因此对已形成肉芽肿的患部也非常有效。按药量为2050mg鱼体重1kg1日，37天投与就会出现治疗效果。投与时，给饲量改为平常的7080左右则效果更好。3.11 Bacterial Ridney diseases (细菌性肾脏症) 鲑鱼的Bacterial Ridney diseases，略写为BKD，在1930年几乎同时在英国的苏格兰及美国被发现，在苏格兰被称之为Dee diseases，而在美国和加拿大被称之为Ridney diseases。现在统一称之为BKD。在日本，於1973年发现此病。(1)病 因 本菌最初由Ordal和Earp两人分类为Corynebacterium

6、属，但在最近由Sanders 和Fryer两人分类，使用Renibacterium Salmoninarum新种。本菌为无运动性，非抗酸性Gramm阳性的小悍菌(0.31.01.5m)，多呈双杆菌。培养温度范围522度，至适温度1518度。本菌培养极其困难，早期的研究者未能分离出病原菌。後来发现盐酸Cysteine和血液(或血清)培养基，或含有盐酸Cysteine Muller Hinton培养基适合分离本菌。培养本菌需1个月後，才能确认出菌落的发育。(2)症 状 症状严重的病鱼，腹部呈膨胀状，体色变黑，眼球周围出血及眼球突出。病鱼无力 ，喜於排出口附近或水面附近游动。但症状轻的病鱼没有以上的

7、症状。开腹剖检时，可见体腔内贮留腹水，所有的病鱼的共通变化在肾脏。症状轻微的病鱼，出现数个直径23mm的小白点，严重的病鱼则出现直径35mm的白色斑。肾脏全体呈暗红色、肿大及失去弹力。脾脏有时也出现小白点病变。 肾脏及其他内脏上出现的小白点及白斑的病变，乃为组织坏死、细菌崩溃物，大吞食细胞为主的游走细胞及病原菌所形成的。由白点、白斑的病变组织作涂抹标本、染色，用显微镜检查时，很容易看到无数的Gram阳性的小杆菌。病鱼血液性状也因造血组织出现病变而呈现购化，即病鱼的Hb值及血清蛋白量为健康鱼的12至13。另外，副肾的维他命C量、红血素量、血糖值及肝醣量都降低。(3)诊 断 用病鱼肾组织的涂抹标准

8、，确认Gram阳性双杆菌可诊断本病。病原菌分离一般用CSA或kDM-2培养基。但在培养基上出现菌所需时间甚长，因此代替分离法的各种免疫学的诊断法被开发出来。 由含有病原菌的患部组织破碎或加热所得到的抽出抗原和抗血清做琼脂沈降反应。用家兔抗血清及营光标识羊免疫球蛋白进行间接营光抗体反应及直接营光抗体试验。以及coagglutination test (凝集试验)，此方法是应用含有protein A株的staphy lococcus aureus和抗体球蛋白IgG的Fc部分吸付现象来检测抗原的。对本病诊断非常有效，且所需反应时间仅需23个小时，不需萤光显微镜等为本方法的优点。(4)对 策 到目前为

9、止，还没有有效的预防手段。虽本病原菌对chloramphenecol，tetoracyclin等有较高的感受性，但本病是慢性病变，病原菌寄生在细胞内，且潜伏期长，发现病鱼时已经同一鱼群内的多数鱼已被感染，因此本病的治疗非常困难。磺胺剂，Erythromycin长期投药虽有效，但一旦停止投药後，有再发病的现象。3.12 Nocardiosis 最近，放射菌Nocardia感染症逐渐被重视，进入六十年代後，Conroy等在阿根廷首次分离出N. asteroides，然後，在北美、欧洲等地，也从鳟鱼，鲑鱼分离出Nocarclia sp.及N. asteroide。日本於1967年在三种县狮鱼养殖场分

10、离出N. Kampachi。(1)病 因 Nocardia. sp.属Gram阳性丝状菌。本又将以Nocardia Rampachi为例说明之。菌体形状随着培养日数的增加，由丝状变为长杆状、球状等。本菌在Lowenstein-Jensen及小川培养基上发育良好，但在普通培养基上则发育不良。培养温度范围是1232度，至适温度2528度。培养pH值范围是5.88.5，至适pH值6.57.0。培养盐浓度范围04，至适盐浓度01.0。(2)症 状 本病分为在躯干部皮下脂肪组织、肌肉等处形成脓疡、结节(躯干结节型)和鳃部形成结节(鳃结节型)两大类。其他还有口唇部也会出现结节。 躯干结节型的病变以躯干部和

11、尾部的表皮溃疡及皮下出现膨大病巢为特徵。剖开膨大病巢流出白色的脓汁。剖检时可在心脏、脾、肾脏、鳔等处发现结节病。真皮、肌肉组织病巢周围多被纤维芽细胞层包围。但在脾、肾脏病巢周围多被纤维芽细胞增值较不明显。这些病巢的炎症反应基本上是从化脓性，经增殖性转变肉芽肿性炎症。 鳃结节型病变一般多在冬季出现，鳃部出现结节病巢为特徵。鳃型的病变於严重的病鱼，内脏也会出现结节病巢。特别是越年的鱼鳔部易发现结节病巢。(3)诊 断 由躯干部或鳃的病变组织，脓汁进行涂抹标本，Cram染色後，很容易观察到丝状菌，大概初步可诊断为本病。本菌的分离可将体表患部、肾、脾脏及鳃的患部材料直接接种於1小川培养基上，或用4NaO

12、H处理後再接种於3小川培养基上。25度经45天培养後，可出现微小菌落，约2周後可见淡黄色、橙黄色的菌落。(4)对 策 避免过密饲养及超量投与食饵，并防止自家污染是抑制本病发生的有效手段。外伤通常是感染途径，因此鱼的移动应小心行之，也是预防对策之一。N. Kampachi经福马林处理或加热後的死菌直接注射於肌肉内，经5周後，抗体价上升约10,000倍，则有很好的防御效果。但实用疫苗免疫法则尚待开发。N. Rampachi对Chloramphenicol有较高的感受性。但本菌在鱼体内形成多数的结节，於生体内药效很难发挥。一般需投药20馀天，才能治愈。3.13 Cold water diseases

13、 (冷水病) 本病易发生於低水温季节固而得其名，对鲑鱼幼鱼的危害甚大。因病鱼尾柄部发生溃疡病变，又被称之为peduncle diseases(尾柄部)。本病目前只有在美国发生的报告。(1)病 因 Cytophaga psychrophila为本病的病原菌。本菌属Gram阴性长杆菌(1.50.757.5m)。则有滑走运动。在Cytophaga培养基上发育。培养温度范围423度，超过25度就不发育为其特徵。(2)症 状 本病症状虽因鱼种不同而稍异。病菌在虹鳟的幼鱼尾柄部皮肤上增值，造成溃疡为其特徵。病菌在鲑鱼幼鱼，主要在头部，特别是口腔壁、下颚、鳃盖皮肤等处感染，从皮下侵入肌肉组织深部，卵囊破裂，

14、使孵化出的幼鱼遭受巨大的损失。(3)诊 断 病原学诊断用Cytophaga培养基分离病原菌来诊断之。(4)对 策 适用的预防方法尚无。一般治疗可用磺胺剂。3.14 Mycosis (真菌病) 细菌和变形菌(即黏菌)除外的菌类总称真菌(Eumycetes)，水生动物的真菌病(mycosis)大致上可分为由卵菌(Oomycota)、接合菌(Zygomycota)、不完全菌(Deuteromycotina)及一些所属不明的菌所引起的几个病因。由於最近的养殖业已乱使用抗生素所造成的菌交代现象，使得真菌病较常发生。3.15 Water mald (水霉菌病)(1)病 因 水霉菌症乃鱼体表或孵化中的鱼卵表

15、面之外观上出现棉花状的菌丝感染所引起的疾病，目前为止的报告有Saprolegnia、Achlya、Leptolegnia、Diclynchus及APhanomyces属的霉菌被分离确定。(2)症 状 霉菌体所释放出的游走子在水中漂浮，随时可由鱼体之表面创伤侵入而固定在鱼表寄生，长出的菌丝和棉花状，菌丝不但寄生体表且向体内的肌肉层侵入，造成附近大块组织的坏死，病鱼因此可渐衰弱迟早则毙死。霉菌寄生後的困扰是：1.霉菌常常是发病的诱因，二次感染并发。2.寄生部位皮肤的崩坏而脱水。3.菌丝向体内侵入寄生後，造成内部真菌症，更使得治疗困难。鱼卵孵化时容易因霉菌的菌丝寄生使鱼卵发育中止。(3)诊 断 由眼

16、上很容易由棉花状的菌丝长而判定之。培养时，以一般培养基加链霉菌素或青霉素即可。含glncose和glutamic acid的特殊培养基更容易分离。(4)对 策 添加malachite greed 2-5ppm於孵化池中46次，每次间隔46天有效，对鱼体表的消毒亦同，但因本剂有致癌性在许多先进国家已禁止使用。3.16 鳗鱼水霉菌症 本症很久以来以散发性偶而的发生，直到1955年日本静冈县大量爆发而引起特别的注意，亚热带的台湾养鳗者尤其应重视本症。其病原菌乃属Saprolegnia spp.的外部寄生性霉菌，分类上尚未确定。症状上特别在头、尾部表现棉花状的病变为主徵，病鱼浮於近水面，很快就死亡。诊

17、断与对策与3.15相同，请参考之。3.17 内脏真菌症 本症属内部寄生性的霉菌，最初由Agersborg所报告，主要以胃肠等器官的寄生为主。(1)病 因 目前为止已知有2种霉菌引起本病，一为Saprolegnia diclina乃为本症的主因，另一为未固定的丝状真菌，菌丝细长分节，可能属不完全菌的一种。(2)症 状 发病时病鱼不活泼离开鱼群，病程加重时全身稍褪色，腹部全面或胃部膨胀，剖检时可见腹腔内明显地菌丝增生，把腹腔壁与内脏黏着。肠管或胃被菌丝塞满，或菌丝贯穿胃壁而出，最後因肠管闭塞而引起消化障塞衰弱而死亡。(3)诊 断 如前述3.15.方法检查菌丝确认之。(4)对 策 目前为止尚无有效方

18、法来治疗，预防止，应注意池水的换水及其他饲养管理。3.18 真菌性肉芽肿症 本症於鹺鱼常被报告，属内部寄生性的霉菌症，於日本尚未有正式报告，欧美较流行。(1)病 因 由Aphanomyces piscicida寄生所引起的，用普通的真菌用培养基不易分离，使用FME或GY特殊培养基则较易分离，FME乃含fish meat extract的特殊培养基，而GY则含 glncose10、酵母0.25。本菌的发育适温是1530，pH79。(2)症 状 最初在体表呈现1个或数个膨隆物及出血点，然後膨隆患部的皮肤坏死 ，下面的肌肉组织出现红色的芽肿，病变上与弧菌症相类似，只要将病患处做直接涂抹片检查菌丝即可辨别，且病理组织学上乃肉芽肿的标准变化，并可看出菌丝的存在。(3)诊 断 直接涂抹患部确认菌丝之存在，培养时用前述的培养基於25，7日後，再将菌丝移至一般滋菌蒸馏水内23天培养，可见胞子的形成。(4)对 策 现尚无有效的预防、治疗方法。3.19 鲤、鳗鱼的Dermocystidium症 主要在鲤鱼或鳗鱼的鳃及皮肤寄生所致害的霉菌症。(1)病 因 属Dermocystidium的种名，乃根据宿主、营养体的形状大小、胞子及球形封入体的直径而分类，在日本从鲤鱼所分离者，命名为Dermocyst