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文档简介

1、如何看流式细胞术结果中的图FCM数据的存贮的方式是FCS2.0（flowcytometrystandard），采用列表排队（ListMode）方式。易于加工处理分析，但缺乏直观性，数据的显示通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种；由数据还可以做出标准曲线进行定量分析。ContourPlwDinsixyPlolzZebraFlatPsuedwalafPlslPsufrde&leifP&liSiftKilha閃Pled；曲-I护4Q1：坐标轴的意义？1、单参数直方图每一个细胞单参数的测量数据可以整理成统计分布，以直方图的方式来显示。在图中，横坐标表示荧光信号或散射光信号相对强度的值其单

2、位是道数（channel），可以是线形（line）或者对数（log）。纵坐标一般是相对细胞/粒子数（count）!IHIP九朋II(X1ie10CD14FFTCIncfe-ssed4MAAifrianrEpfDNAih畔恥IhCellDNACnnhjzit2、二维图在二维图的中，横坐标/纵坐标都表示荧光信号或散射光信号相对强度的值，可以是线形（line）或者对数（log）。双参数图可以将样品细胞群分开，从而方便对感兴趣的细胞进行分析。THP1-WII001FLWQ2：“Gate”和“Regin”？设门是流式细胞分析中一种重要的技术，只有通过最佳的设门方式，才能准确地获取和分析数据，从而得到临床

3、诊断和科研中有价值的信息。On-linegating(thresholdgating)监测/获取数据Off-linegating：分析实验数据散射光设门/荧光设门散射光/荧光联合设门多重逻辑门（组合门）多重逻辑门G3=R1andR2（G3二R1XR2）其它：G=R1orR2G=R1notR2Q3:流式图中的颜色与荧光颜色？流式图中的颜色为区分不同细胞群而人为指定,与荧光颜色无关!Q4：流式图中的阴/阳（N/P）如何划分？如何做Ml阴性界限？实际上，这个Ml的划分完全是根据阴性（同型）对照来的！如下图：左图为同型对照，即：您所检测的物质在阴性组中的基础表达量，可以理解为背景、静息状态下、基础水平、未受刺激时等。右图即阳性组，也就是接受刺激后，功能状态下、药物作用后等。NORMO01SsfTifT&1FfTTCCDSFUCQ5:这么巧，阴性正好在101划分？其实,我们可以人为地将电压，放大倍数调到相应的大小，使阴性的右边界在某一个值上，（通常划在101附近）这样后期做sample时好看！当然也可以调到102，103次方。Q6:为什么要进行荧光补偿？流式细胞分析中经常要用到2种以上的荧光标记抗体进行染色，而目前所使用的多种

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