PBS缓冲液的配制

1、PBSPBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是总结：母液的配制：0.2MNa2HP04：称取71.6gNa2HPO4-12H2O，溶于1000ml水0.2MNaH2PO4：称取31.2gNaH2PO4-2H2O，溶于1000ml水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配0.2MPB(pH=7.4,100ml)：取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。然后只需将0.2MPB(pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：0.1MPB(PH=7.4):取500ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。0.01MPB(PH=7.4):

2、取50ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。0.02MPB(PH=7.4):取100ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。若需要NaCl的话，加入NaCl至0.9%(g/100ml)即可。另：其它各种另PH值的0.2MPB(100ml)配方：pH0.2MNaH2PO4(ml)0.2MNa2HPO4(ml)5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.22

3、8727.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.50.57.88.591.57.97938.05.394.70.01M磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8gNaCI、0.2gKCI、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4，溶于800ml蒸馏水中，用HCI调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。在15Ibf/in2（1034*105Pa）高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4C冰箱中。需要注意的是，通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na离子或K离子的浓度，Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。如果是用

4、于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。PBS是磷酸缓冲液的简称，不仅伪狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释，原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用，蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性；生理盐水不具有调整pH的作用，对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应，所以使用PBS是首选。PBS也不是万能的，有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高，就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分，维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。文献查得：磷酸缓冲液（PBS）：NaCl80

5、g,KH2PO40.2g，Na2HPO429g，KCl0.2g，重蒸水1000mL，调pH至7.4。【求助】关于配方及浓度的问题字体小中大打印发表于作者来源分析测试百科网查看完整版本请点击这里：【求助】关于PBS配方及浓度的问题我看到有不少关于PBS的配方，愈加迷惑：1、分子克隆上的PBS配方NaCl8g，KCl0.2g,Na2HPO41.44g,KH2PO40.24g,是指多大浓度的PBS?0.15M、0.05M还是0.01M?是指哪几种离子的浓度？2、看见过一种0.01MPBS的配方:NaCl17.5g，NaH2PO4.2H2O2.96g,Na2HPO4.12H2O29g,是否正确？查看完

6、整版本请点击这里：【求助】关于PBS配方及浓度的问题我也来说两句查看全部回复最新回复u234(2012-11-0315:28:25)1指的是0.01M的，就磷酸根而言的，10mMNa2HPO4+2mMKH2PO42磷酸根的浓度是19mMNaH2PO4.2H2O+8mMNa2HPO4.12H2O，而且没有K,应该分子克隆上的配方是没问题的，我一直这么配的，用得很好rxcc33(2012-11-0315:46:32)请问0.01M的磷酸盐缓冲液怎么配，做免疫组化用的，谢谢！急！66小飞侠(2012-11-0315:47:07)很简单，我做过不少组化了。如下：Nacl8g/L,Kcl0.2g/L,N

7、a2HPO41.44g/L(若为Na2HPO4*12H2O则2.9g/L),青、链霉素各100u/ml,Hcl调节PH至7.2分装，消毒kuohao17(2012-11-0315:47:27)你说的分子克隆上面的PBS指的时0.01M,它指的是溶液的浓度hold住(2012-11-0315:47:52)啊，各位大侠，请问一下，司徒镇强主编的细胞培养怎么和上面的不一样，NaCl8g，KCl0.2g,Na2HPO41.56g,KH2PO40.2gbling(2012-11-0315:48:22)谈谈我对这个问题的看法：我觉得里面的盐是为了保持一个恒定的渗透压，所以它的组成其实并不是很重要，也无所谓

8、是钠盐还是钾盐，当然关于缓冲液的浓度，取决于起到缓冲作用的离子的浓度，也就是HP04,H2PO4的浓度了，如二层楼主所言。qqq111(2012-11-0315:49:24)我们实验室是这样配的：1.先配好0.1M的PBIOOOml。(磷酸二氢钠2.96g,磷酸氢二钠28.7g,加双蒸水至1000ml)2称取40g多聚甲醛，放如广口瓶中，加入适量的0.1M的PB,摇晃后放入微波炉中，用微火加热两分钟，然后拿出摇匀，如没有熔化，再放如加热两分钟，直到融化为止。(瓶子一定要用牛皮纸包好，不然很难闻。一定要用温火，不要煮沸了。)3冷却后用滤纸过滤，最后用0.1M的PB定容至1000ml,既为4%的多

9、聚甲醛。*如果双蒸水没有，配0.1M的PB时也可以用去离子水，我们实验室都是这摸配的，没有任何问题。现在博士德和中山公司都有配好的粉末出售，买来直接加到1000ml双蒸水就行了，非常方便！大家可以试一试！GOODLUCK！orangecake(2012-11-0315:49:58)PBS母液配方I磷酸盐缓冲液（PJD巴磷駿氢二钠一礴酸二氢钠缓冲液3mol.Lh2mol/L1o.2moi/L12m&l.1皿迅10pHM盹HR*zEDz&2,C“61.0纵c-90.0和ni-.I.i35.0餌.779j2.0细。K；kC7.177.02(:RJ.iI1Sl-01407?；57-5瞅仁016-C73

10、.q07小4呼：2I呦川口.口卜吨井了奇3沐勺叫0.g分于蜃-i3i?.Qr0.2为并6冏曲*时O的g恥03,0.认扎砲为辽21,/1.;磷毁粗二钠一懈酸二氮诩缓冷液（1/胃和门九）29332602.snap.jpgorangecake(2012-11-0315:50:18)0.1的PBSi；f-7-Ljr.：)：.:I,Ihmoi传曲站m丽材I.基1mn|/LPBSpH7.27.4山2mo/LPBpH7.27.45加ml双鹽水300mlXaCl8,g涪駅后再加说蒸水至IQ&Oml:髙压幣壽后畫温保存-0.3%TriLonX100I),inml/LLUJS向DOOnil0.irtiol/LPB

11、S液中加入TrirgX-1G03mlt混匀商压清奉匚4.Tris-iCl缓冲液(u()5nml.1,.2505Qml0.ImoL/I.甲菇瑟基甲烷丁討溶液与Xrul0.】mol/I盐醸遐:卷!后；別範朋以稀释至J.Q0rnflPHX(ml)pHX(ml.)7.1045.7止1036,27.2044-78.2022.ft7-3043-1毘3019.A7.-1042.0&4017.27.50讥314.77,6Q38.5fi.tj-047.70対-8.,70id37.8C-34-58,80a.57-P032.07,Q&Q029.2启:中开载基翠就仆-馆I2J一14；CInwl几眾漑为12.U4g/L

12、D丁吊聲液可鸟懑中鱸收二練礁存铀注號即曲盘严70050866.jpgPINK(2012-11-0315:51:01)我曾经也碰到过这样的一个问题，关于磷酸盐缓冲液的浓度，其实就是磷酸根缓冲对的浓度，也就是溶液中的Na2HPO4以及NaH2PO4中磷酸根的浓度。另外，还有NaCI的浓度也很重要。主要是调节渗透压的作用。关于具体的配方，其实有很多种。我整理了一下，觉得下面的两种还是比较不错的。0.01MPBS工作液所需原料5000ml1000mlNa2HPO412H2O磷酸氢二钠克13.42g2.684TOC o 1-5 h zNaH2PO42H2O磷酸二氢钠克1.95g0.39NaCl克42.5g8.5三蒸水毫升5000ml1000是工作浓度，根据自己的要求配浓缩液，关键是pH,定要调在7.4左右，pH可以用NaOH和盐酸调。我在实验中用了很多次还是挺不错的。jujuba(201