《培养液中酵母菌种群数量变化》学案

1、培养液中酵母菌种群数量的变化酿酒和做面包都需要酵母菌，这些酵母菌可以用液体培养基（培养液）来培养。培养液中酵母菌种群的增长情况，与发酵食品的制作有密切关系。实验目的：探究培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？实验原理：对试管中培养液中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法，我们一般情况下是利用血球计数板对酵母菌的数量进行统计。一、血球计数板：血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻璃片制成的玻璃中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。方格网上刻有9个大方格，其中只有中间

2、的一个大方格为计数室。大方格的长和宽各2mm,深度为0.1mm,其容积为0.4mm3,即2mmX2mmX0.1mm方格的计数板。血细魏扳掏遇（O扎山面图：B織切面图I.耻堀胞计數扳:话的片；a计融窒卜貯怖咿厅眾血訓慝計数板抖阀c.）故丿、皤的削尊恪申幅人数电计数室通常也有两种规格：一种是X型，即大方格内分为中格，每一中格又分为小格；另一种是X型，即大方格内分为中格，每一中格又分为小格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由xx个小方格组成。4*1建羽审IH他瞽出莓I幘輕餾迹蜒鑒器器黑盟ITUvwmu齡fr-rd-:s!:sMa二、血球计数板的使用方法步骤使用血球

3、计数板计数时，按照如下的实验步骤进行：镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数；.加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去；.计数。稍待片刻（约），待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。三、血球计数板的使用注意事项培养液中酵母菌种群数量的动态变化实验是一个历时较

4、长（天左右）的实验，事前一定要做好周密的计划，定程序、定时间、定人员。每天采用抽样检测法使用血球计数板对酵母菌进行计数，在计数时应从以下几方面注意。.每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察天。从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几下，这样使酵母菌分布均匀，防止酵母凝聚沉淀，提高计数的代表性和准确性，求得的培养液中的酵母菌数量误差小。如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培养液进行稀释以便于酵母菌的计数。具体方法是：摇匀试管，取酵母菌培养液，加入成倍的无菌水稀释，稀释倍后，再用血球计数板计数，所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有一个酵

5、母细胞为宜。特别是在培养后期的样液需要稀释后计数。.活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时，即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为个酵母细胞。.对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数，一般可采取“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则处理，另两边不计数。计数时，如果使用格X格规格的计数室，要按对角线位，取左上、右上、左下、右下个中格即个小格的酵母菌数；如果规格为格X格的计数板，除了取其个对角方位外，还需再数中央的一个中格即个小方格的酵母菌数。.计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算，对每个样品可计数三次，再取其平均值。计数时应不时调节焦距，才能观察到

6、不同深度的菌体。按公式计算每（或）菌液中所含的酵母菌个数。血球计数板的清洁血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脫水使其干燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。实验过程：略实验结果：培养时I可（h）巩固练习：、在“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验中正确的实验方法是.将适量的培养液进行高温处理然后立即加入酵母菌将盖玻片盖在计数室上后从盖玻片边缘滴加酵母菌培养液.若取样的小方格中酵母菌过多多选择邻近的一个小方格计数.对压在小方格界线上的酵母菌只计数上下两条界线上的酵母菌TOC o 1-5 h z、在用血球计数板（X方格）对某一稀释倍样品进行计数时，发现在一个方格内（盖玻片下的培养液厚度为）酵母菌平均数为，据此估算培养液中有酵母菌个。、在“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验中，某同学用显微镜观察计数，统计发现血球计数板的小方格X内酵母菌数量的平均值为个。假设盖玻片下的培养液厚度为，那么培养液中酵母菌的个数约为XXXX、