细胞融合实验报告

1、山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合【实验题目】动物细胞融合【实验目的】1. 了解动物细胞融合的常用方法。2. 学习化学融合的基本操作过程。3. 观察动物细胞融合过程中细胞的行为与变化。【实验材料与用品】1 、材料鸡血红细胞、试剂50%PEG 、GKN溶液、 Alsever s 细胞保存液、 0.85%氯化钠溶液。、 器材倒置显微镜、离心机、载玻片、盖玻片、离心管、废液缸、滴管等。【实验原理】细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包

2、括：病毒诱导融合、化学诱导融和和电激诱导融合。1、病毒诱导融合仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融时也可介导细胞与细胞的融合。用紫外线灭活后，这些病毒即可诱导细胞发生融合。2、化学诱导融合很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。在恢复过程中想接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。化学诱导方法，操作方便，诱导融合的概率比较高，效果稳定，适用于动、植物细胞，但对细胞具有一

3、定的毒性。PEG是广泛使用的化学融合剂。3、电激诱导融合第 1 页 共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合包括电诱导、激光诱导等。其中，电诱导是先使细胞在电场中极化成为偶极子，沿电力线排布成串，再利用高强度、短时程的电脉冲击破细胞膜，细胞膜的脂质分子发生重排，由于表面张力的作用，两细胞发生融合。电诱导方法具有融合过程易控制、融合概率高、无毒性、作用机制明确、可重复性高等优点。【实验步骤 】在本次实验中采用的是化学诱导融合的方法， 利用 PEG使鸡血红细胞发生融合。 具体实验步骤如下：1、取鸡血

4、2ml+2mlAlsever 液，再加入 6mlAlsever 液，混匀后制悬液（ 4保存）【老师已做好，可直接使用】2、取（ 1）中悬液 1ml+4ml 的 0.85%的 NaCl 溶液，进行以下三次离心处理：在 1200r/min 下离心 5min，去掉上清液，再加入0.85%的 NaCl 溶液至 5ml；1000-1200r/min 下离心 5min，去掉上清液，再加入0.85%的 NaCl 溶液至 5ml；1000-1200r/min 下离心 7min【因时间关系此次实验只离心一次】3、 将离心后的沉降血球（去上清后约0.1-0.2ml ）加入 GKN至 1-2ml ，使之成为 10%

5、的细胞悬液；4、 取上述 10%的血球悬液 1ml, 加入 3mlGKN液，使每毫升含血球15000000 个；5、分别取（ 4） 1ml+0.5ml50%PEG，（ 4）0.5ml+0.5ml50%PEG，（ 4）0.5ml+1.0ml50%PEG，混匀滴片，编号分别为号溶液。在常温下2-3min 后，显微镜下观察。【实验结果 】1、 实验中可观察到两个和多个细胞发生质膜融合现象, 可看到不同融合状态的细胞：两细胞的细胞膜相互接触、粘连；接触部分的细胞膜崩解，两细胞的细胞质相同，形成一个细胞质的通道，呈现哑铃状；通道扩大，两个细胞连成一体，呈现一个长椭圆形细胞； 细胞融合完成形成含有双核或者

6、多核的细胞，呈圆形。比较典型的细胞融合时的形态如下图：第 2 页 共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合初步接触融合图1图2图3细胞进一步融合图4图5图6融合完成图7图82、在三种不同浓度的细胞悬液中，所观察到的细胞发生质膜融合的比率不同，如下图所示：第 3 页 共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合图 1：1 号溶液中细胞融合整体图像图 2：2 号溶液中细胞融合整体图像图 3：3 号溶液细胞融合

7、整体图像【讨论与结论】1、 实验结果经过 PEG的介导融合，鸡血红细胞中有少部分细胞发生了融合，且多处于融合刚开始的阶段。大部分细胞仍处于离散状态，另外，视野中还发现有细胞聚集成团的现象。另外，本次实验进行了细胞悬液三个不同浓度的融合实验，1ml+0.5ml50%PEG，第 4 页 共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合0.5ml+0.5ml50%PEG，0.5ml+1.0ml50%PEG，前两组的细胞融合率明显没有第三组的细胞融合率高，因此可以得出结论：在一定范围内， PEG的浓度越高，细胞融

8、合率越高。另外，由于本次实验中的细胞悬液浓度偏低，因此无法直观的对前两组进行融合率的比较，但从理论上分析，在 PEG浓度一定时应该是细胞浓度高的融合率高（细胞间的接触几率增大）。2、 结果分析本次细胞融合实验采用的是鸡血红细胞，鸟类红细胞存在细胞核，且细胞体积较大，易于实验观察。本次实验由于时间关系只进行了一次离心，而正常实验过程是要进行三次离心，目的是充分清洗细胞表面，使细胞接触面积达到最大，有利于细胞间的融合。每次离心前都要将样品小心混匀，否则有可能出现聚集成团的细胞。若视野中出现聚集成团的细胞，还有一种可能：制备的鸡血红细胞悬液浓度过高。 视野中经常会看到两个或多个细胞接触在一起，此时不

9、一定就是融合的细胞，需要转动细准焦螺旋对接触部分进行观察，通过观察接触部位细胞膜的有无判断其为融合细胞还是重叠在一起的细胞。 本次实验采用的是PEG介导，融合效果受到以下几个因素的影响： PEG分子的分子量和浓度、PEG作用时间、融合温度、 PH值。在一定范围内适当调节这些条件，可以将融合率提高。但在进行科研时还应考虑到，PEG分子对细胞存活的影响（ PEG具有一定的毒性，且分子量越大毒性越大），因此取分子量800-1000 较适合。1 号试管中的细胞悬液出现类似血丝的悬浊物， 可能是加入 PEG之后没有及时混合均匀， 细胞大量聚集。因此在加入 PEG后先反应 30s 左右后小心混匀，否则会导

10、致细胞融合不充分。且在加入时尽量避免震动。附：细胞融合的应用动物细胞融合是从细胞水平来改变动物细胞的遗传性，可用于生产单克隆抗体、疫苗等特定的生物制品。在培育动物新品种时，缩短动物的育种过程。动物细胞融合的应用范围已广及生物学的各个分支学科。动物细胞融合技术对于研究细胞分化、基因定位、肿瘤发生机制等方面都有重要意义。在实际应用方面，动物细胞融合技术在药物定向释放系统、细胞治疗以及抗肿瘤免疫等方面起到重要的作用。1、生产单克隆抗体第 5 页 共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合单克隆抗体技术的核

11、心是用骨髓瘤细胞与经特定抗原免疫刺激的B 淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能像骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖，又具有B 淋巴细胞产生特异性抗体的能力。因此，单克隆抗体技术又称为杂交瘤技术。2、用于基因定位和绘制人类基因图谱杂种细胞中某一染色体或其片段的存在与否与细胞的某一性状表达与否相联系，从而可以实现把基因定位于某一染色体或某一区段上。3、动物育种体细胞核移植技术是将细胞核移植到另一细胞的细胞质中的生物技术。动物体细胞融合后，杂种细胞难以发育再生为一个个体。但借助于细胞核移植的方法将融合后杂种细胞的细胞核移入去核成熟卵内，可培育新的杂种。另外，细胞核移植技术的建立，还为目前进行的哺乳动

12、物体细胞克隆和转基因技术做了良好的铺垫。4、细胞疗法将患者的任何体细胞与去核卵细胞融合，融合子进行有丝分裂形成囊胚，囊胚的内细胞团是多能干细胞，对多能干细胞进行诱导使其定向分化可形成所需的组织和器官用于器官移植，不仅解决了器官和组织来源问题，而且也避免宿主对外来物的免疫排斥。5、植物细胞融合植物细胞融合在育种上有重要的应用价值，在生产研究应用方面， 通过诱导不同种属间甚至不同科间原生质体的融合，可能打破有性杂交不亲和性的界限，广泛地组合各种基因型，从而有可能形成有性杂交方法所无法获得的新型杂交植株。植物细胞融合可以将细胞器、DNA、质粒、病毒、细菌等外源遗传物质引入原生质体，从而有可能引起细胞

13、遗传性的改变，为某些珍稀动物的复壮等提供了可行的方法，应用于植物育种、种质保存、无性系的快速繁殖和有用物质生产等等。6、微生物细胞融合技术对微生物而言，该技术主要用于改良微生物菌种特性，提高目的产物的产量，使菌种获得新的性状，合成新产物等。微生物细胞融合技术的一项突出应用是生物药品的生产，包括抗生素、生物活性物质、疫苗等。它适用于疾病的诊断、预防及治疗等。另一方面的突出应用就是为发酵工业提供优良菌种。赠送资料第 6 页 共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合青花鱼（北京）健康产业科技有限公司20

14、18 年财务分析报告. 主要会计数据摘要. 基本财务情况分析2-1资产状况截至 2011 年 3 月 31 日，公司总资产20.82 亿元。2-1-1资产构成公司总资产的构成为：流动资产10.63 亿元，长期投资3.57 亿元，固定资产净值5.16 亿元，无形资产及其他资产1.46 亿元。主要构成内容如下：流动资产：货币资金 7.01 亿元，其他货币资金 6140 万元，短期投资净值 1.64 亿元，应收票据2220万元，应收账款3425 万元，工程施工6617 万元，其他应收款1135 万元。长期投资： XXXXX2 亿元， XXXXX1.08 亿元， XXXX3496 万元。固定资产净值：

15、 XXXX 净值 4.8 亿元， XXXXX 等房屋净值 2932 万元。无形资产： XXXXXX 摊余净值 8134 万元， XXXXX 摊余净值 5062 万元。长期待摊费用： XXXXX 摊余净值 635 万元， XXXXX 摊余净值 837 万元。2-1-2资产质量(1)货币性资产：由货币资金、其他货币资金、短期投资、应收票据构成，共计9.48 亿元，具备良好第 7 页 共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合的付现能力和偿还债务能力。长期性经营资产：由 XXXXX 构成，共计 5.61

16、亿元，能提供长期的稳定的现金流。短期性经营资产：由工程施工构成，共计6617 万元，能在短期内转化为货币性资产并获得一定利润。(4)保值增值性好的长期投资：由XXXX 与 XXXX 的股权投资构成，共计3.08 亿元，不仅有较好的投资回报，而且XXXX 的股权对公司的发展具有重要作用。以上四类资产总计18.83亿元，占总资产的90% ，说明公司现有的资产具有良好的质量。2-2负债状况截至 2011 年 3 月 31 日，公司负债总额10.36 亿元，主要构成为： 短期借款 (含本年到期的长期借款)9.6亿元，长期借款5500 万元，应付账款707 万元，应交税费51 万元。目前贷款规模为10.

17、15 亿元， 短期借款占负债总额的93% ，说明短期内公司有较大的偿债压力。结合公司现有 7.62 亿元的货币资金量来看，财务风险不大。目前公司资产负债率为49.8% ，自有资金与举债资金基本平衡。2-3经营状况及变动原因扣除 XXXX 影响后， 2011 年 1-3 月 (以下简称本期)公司净利润605 万元，与 2010 年同期比较 (以下简称同比 )减少了 1050 万元，下降幅度为63% 。变动原因按利润构成的主要项目分析如下：2-3-1主营业务收入本期主营业务收入3938万元，同比减少922 万元，下降幅度为19% 。其主要原因为：(1)XXXX 收入 3662万元，同比增加144

18、万元，增长幅度为4.1% ，系 XXXXXXXXXXX增加所致。(2)XXXXX126万元，同比增加 3 万元，增长幅度为 2% ，具体分析详见“重要问题综述4-1 ”。第 8 页 共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合(3) 工程收入 150 万元，同比减少1069 万元，下降幅度为88% ，原因是：一、本期开工项目同比减少;二、 XXXX 办理结算的方式与其他工程项目不同。通过上述分析可见，本期收入同比减少的主要原因是工程收入减少。如果考虑按XXXX 项目本期投入量2262 万元作调整比较，

19、 则：本期工程收入同比增加1193 万元，增长幅度为98%; 本期收入调整为6200万元，同比增加1340 万元，增长幅度为28% 。2-3-2主营业务成本本期主营业务成本1161 万元，同比减少932 万元，下降幅度为45% 。按营业成本构成，分析如下：(1)XXXX 营业成本993 万元，同比增加102 万元，增加幅度为11% 。主要原因是XXXXXXX 计入成本的方式发生变化，去年同期按摊销数计入成本，而本期按发生数计入成本，此项因素影响数为117 万元。工程成本 168 万元 (直接成本 144 万元，间接费用 24 万元 )，同比减少 1034 万元，下降幅度为 86% 。主要原因是

20、：开工项目同比减少，使工程直接成本减少1002万元，下降幅度为 87%;开工项目同比减少，以及机构调整后项目部人员减少，使工程间接费用同比减少32 万元，下降幅度为57% 。已开支的工程间接费用占计划数的26% 。通过上述分析可见，本期营业成本减少的主要原因是工程成本的减少。2-3-3其他业务利润本期其他业务利润41 万元，同比增加15 万元，增长幅度为58% 。其主要原因是：其他业务收入 44 万元，同比持平。(2) 其他业务支出3 万元，同比减少15 万元，下降幅度为85% 。原因是：撤销资产经营分公司后，相关业务由 XXXX 部进行管理，除税费外没有其他直接费用。第 9 页 共 16 页

21、微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合2-3-4管理费用本期管理费用883 万元，同比增加425 万元，增加幅度为93% 。主要原因是：奖金 515 万元，同比增加 375 万元，主要原因是：总额差异：2010 年考核奖 515 万元较 2002 年考核奖457 万元在总额上增加了58 万元 ;时间差异：2009 年考核奖 457 万元中的 317 万元计列入2009 年的成本费用，在2010 年实际计列成本费用的考核奖为140 万元。而2010 年考核奖515 万元全额计列在2011 年，形成时间性差异3

22、17 万元。工资附加费 78 万元，同比增加 70 万元，主要是 2010 年考核奖形成的时间性差异。董事会经费 21 万元，同比增加 16 万元，原因是：总额差异：2002 年董事领取半年津贴，2010 年董事领取全年津贴。时间差异：2002 年董事津贴在2010 年陆续发放，2010 年董事津贴集中在2011 年 1 月发放。(4)本期转回已计提的坏账准备5 万元，而去年同期是计提了坏账准备56 万元，主要系去年同期对暂未收到的 XXXX 收入 830 万，计提了坏账准备50 万元。本期对暂未收到的XXXX 收入采用个别认定法，不予计提坏账准备。因此，坏账准备对管理费用的影响减少了61 万

23、元。本期暂未收到的XXXX 收入为 2242 万元，原因是： XXXXXXXXXXXXXXXX。经与 XXXX 公司协商， XXXX公司于 4 月 15 日前将全数结清所欠款项。2-3-5财务费用本期财务费用1204 万元，同比增加680 万元，增加幅度为130% 。原因是：贷款规模增大：本期银行贷款平均规模为10.25 亿元，去年同期为4.72 亿元，增加了5.53 亿元，增幅为 117% 。第 10 页 共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合贷款利率提高：自2010 年 9 月存款准备金率上

24、调至7% 以来，各家银行普遍出现惜贷现象，我公司的新增贷款不再享受按基准利率下浮10% 的优惠利率。2-3-6投资收益扣除 XXXX 影响后，本期投资收益217 万元，同比减少111 万元，下降幅度为34% 。按构成内容分析如下：(1)国债收益本期国债方面取得的收益为56 万元，同比减少213 万元，下降幅度79% 。主要原因是：投入资金的规模减小：本期投入资金的平均规模为1.73 亿元，同比减少8854 万元，下降幅度为34% 。实现收益的时间性差异：投资收益何时实现，取决于国债买卖、兑息时间和有关投资协议约定时间。(2) 股票收益本期股票方面取得的收益为575万元，同比增加 551 万元。

25、原因是：本期公司组织资金5.78 亿元，申购到 158 万股 TCL 新股，获利 575万元。(3) 跌价准备按 2011 年 3 月 31 日的收盘价计算，公司所持国债的市价为1.64 亿元，本期计提了跌价准备414 万元，而去年同期是转回已计提的跌价准备38 万元，因此跌价准备对投资收益的负影响同比增加452 万元。2-3-7 营业外支出净额本期营业外支出净额18 万元，同比增加了24 万元，主要因素是：(1) 本期报废4 辆汽车，帐面净值14万元 ;(2) 本期发生办理已转让的房屋的产权证费用3 万元，属于去年同期体现的转让房屋收益6 万元的滞后费用。2-3-8经营状况综述第 11 页

26、共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合本期净利润同比下降幅度较大的主要原因是管理费用和财务费用的大幅增加、投资收益减少所致。从具体的分析来看：一、造成费用增加的因素在控制范围内;二、投资收益的减少是受国债市场价格下跌影响。(1)管理费用增加的因素中，最主要的是考核奖的时间性差异。在形成原因上是XXXXXXXXXXXXXXX，而采取的一种处理策略。此因素已考虑在2011 年预算中，对2011 年经营目标不会产生影响，只是费用的期间性的表现。扩大后的贷款规模，仍控制在董事会的授权范围内。随着下半年可

27、转债的发行，公司对贷款规模的调整，财务费用会相应减少。(3)国债市场价格下跌，属不可控因素。若国债价格不恢复，对实现2011 年经营目标有较大影响。. 预算完成情况及分析3-1收入收益类本期收入、收益共计4195 万元，完成收入总预算3% ，扣除 XXX 因素和 XXXX 项目的影响，完成收入总预算 6% 。按预算项目分析如下：XXXXX 收入 3661 万元，完成预算 25% 。XXXXX 收入 126 万元，完成预算 24% 。(3)工程收入 150万元，完成预算 0.3% ，具体分析详见“重要问题综述3-2 ”。(4)其他业务收益41 万元，完成预算 57% ，剔除费用支出减少因素，完成

28、预算36% ，主要原因是收入实现的期间性。(5)短期投资收益217 万元，完成预算 11% ，主要原因是本期计提414 万元跌价准备， 具体分析详见 “重要问题综述4-2 ”。追加短期投资收益本期无，主要原因是：计划用于追加短期投资的资金是发行可转债后暂时闲置的资第 12 页 共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合金，属于时间性差异。XXXX 的现金股利目前尚未取得，若本年确能收到，则属于时间性差异。否则，将形成本年目标利润的缺口。3-2成本费用类本期成本、费用共计3484 万元，占支出总预算3

29、% ，扣除 XXX 项目和可转债发行费用的影响后，占支出总预算 6% 。按预算项目分析如下：XXXX 成本 993 万元，占预算 20% ，按预算项目分析如下：人员经费 197 万元，占预算 27% 。办公经费 28 万元，占预算 21% 。日常维护费 33 万元，占预算 13% 。专项维护费 196 万元，占预算 12% ，主要原因是大部分预算项目尚未实施。折旧与无形资产摊销 539 万元，占预算 25% 。(2)工程结算成本168 万元，占预算0.3% ，具体分析详见“重要问题综述4-3 ”。(3)管理费用 883万元，占预算 43%，扣除一些费用项目的期间性影响后，完成预算24% ，具体

30、分析详见“重要问题综述4-4 ”。财务费用 (利息净支出 )1204 万元，占预算 33% ，主要原因是资金计划中的上半年贷款规模大于下半年，使此项费用发生不均衡。具体分析详见“重要问题综述4-4 ”。营业外支出净额 18 万元，占预算 5% ，主要原因是列入预算事项尚未进行处理。3-3预算分析综述本期净利润605 万元，完成全年预算7% ，如果对 XXXX 收益按预算平均季度收益250 万元进行预计， 本第 13 页 共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合期净利润调整为855 万元，完成预算9

31、.6% 。从以上预算项目的分析来看，未完成预算的主要原因在于：本期利润构成中工程利润和投资收益与预算存在重大差距，将在“重要问题综述”里进行详细分析。4 .重要问题综述及建议4-1 XXXXX收入增长分析XXXX 本期收入126 万元，同比增加3 万元，增长幅度为2% 。根据有关部门的统计数据，XXXX 车辆通行情况与收入情况如下表：XXX 同比增长了14% ，总收入同比只增长2% ，原因是XXXXXX 在结构上发生了较大变化。本期98.4%的车流量集中在收费单价较低的XXXX 和 XXXX 上。建议：公司相关部门对XXX 和 XXX 下降的情况进行分析，找出下降原因。4-2国债跌价幅度较大国

32、债价格主要受资本市场供求关系和资本流向的影响，但是国债的到期价值是确定的，计提的跌价准备能在兑息和兑本时得到补偿。所以，计提的跌价准备在卖出国债前本质上是一种浮亏。所获投资收益与资金成本的差额，才是衡量投资损益的标准。国债价格在一定空间内与股市行情基本呈负相关。从本年股市行情来看，有持续走好的可能，国债价格在短期内可能难以上涨。2011年短期投资收益预算1900 万元 (不含追加投资收益)，若国债价格迟迟不上涨，计提的跌价准备将无法转回，对完成2011 年的经营目标会产生很大影响。对比 2010 年 12 月 31 日与 2011 年 3 月 31 日的市场价格， 各类国债跌价幅度为2.1%

33、4.1% 。除 21(07)外的其余国债品种均已跌破面值，跌破面值幅度为5.35% 9.56% 。建议：公司根据目前市场行情进行专题研究，制定出应对措施。第 14 页 共 16 页微生物实验报告山东大学实验报告2015年3 月5 日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合4-3工程项目完成量不足鉴于工程项目收入与成本的相关性，应按2011 年经营目标，着重从完成工程利润预算情况来分析。现按以下已经落实的工程项目(不含 XXXX 项目 )，对工程收入和工程利润进行分析调整：(1)XXXX 本年完工，可按合同计算的收入为2 亿元，预计工程利润为1200 万元。(2)目前 XXXXX 工程已签订正式合同，合同总价1400 万元，合同工期14 个月，可考虑本年进度按900万元计算，预计工程利润18 万元。分析调整后，可实现的项目工程收入为21050万元，可实现的工程利润为1200万元。2011年工程利润预算为2012.72 万元 (不含 XXXX 项目 )，可实现的工