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文档简介
1、 “变废为宝” 的探险家 -分解纤维素的微生物的分离 “变废为宝” 的探险家 -分解纤维素的微生物的分离北师大燕化附中生物组 彭伶俐我国是一个农业大国,全国秸秆每年的产量达到9亿多吨大豆秸秆水稻秸秆玉米秸秆秸秆焚烧露天焚烧秸秆是一种严重违法行为。环境保护法、大气污染防治法、治安管理处罚法、消防法等有关法律规定,禁止露天焚烧秸秆,违者将依法处以5002000元罚款,情节严重的,将依法予以行政拘留;对造成他人人身、交通、火灾等安全事故,由司法机关依法严惩。秸秆用途“种出来” 的 生物质能源饲料肥料能源其它纤维素是葡萄糖首尾相连的高分子化合物,是地球上含量最丰富的多糖类物质纤维素 纤维二糖 葡萄糖C
2、1酶CX酶葡萄糖苷酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶,Cx酶和葡萄糖苷酶纤维素酶对照组:卷烟纸 灭菌的土壤实验组:卷烟纸 未灭菌的土壤2018年11月11日2018年11月21日结论:土壤中有分解纤维素的微生物。提出课题:从土壤中筛选分解纤维素的微生物实验设计:如何取样地点?方法?如何筛选设置对照?培养基?如何培养温度?时间?移液枪锥形瓶酒精灯培养皿试管若干枪头滤纸铲子接种环涂布器如何取样?(地点?方法?)如何筛选?(培养基?设置对照)如何培养?(温度?时间?)如何设置培养条件?32恒温培养箱如何设置实验组和对照组?实验组对照组选择培养基(纤维素为碳源)涂布0.1ml菌液全营
3、养培养基(LB培养基)涂布0.1ml菌液(1)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。(2)纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素,从而使菌落周围形成透明圈。透明圈刚果红染色法如何鉴别纤维素分解菌?土壤取样选择培养基实验方案流程图:该培养基是固体培养基还是液体培养基?目的是什么?土壤取样选择培养基梯度稀释实验方案流程图:土壤取样选择培养基梯度稀释涂布到鉴别培养基上实验方案流程图:刚果红鉴别培养基的配方纤维素 5-10g酵母膏 1gKH2PO4 0.25g琼脂 15g土豆汁 100ml刚果红溶液 10mg/ml将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000ml。土壤取样选择培养基梯度稀释涂布到鉴别培养基上挑选菌落实验方案流程图:视频展示:生物兴趣小组实验过程实验结果:透明圈刚果红染色法鉴定纤维素分解菌先在培养基中加刚果红再筛选鉴定方法一先筛选细菌再加刚果红鉴定方法二优缺点?缺点:有些细菌可以分解色素,也会出现透明圈缺点:出现菌落的混杂,不可分离纯化动手操作:平板划线法分离纯化纤维素分解菌课题延伸(一)挑选出有透明圈的菌落一定是纤维素分解菌吗?如何验证?(二)土壤中筛选的菌种可以直接发酵降解秸秆,用于工业生产吗?课题延伸工艺应用:秸秆纤维素发酵生产燃料乙醇根据现有年产1万吨纤维素酶和5000吨秸秆乙醇生产线试运行情况来看,每生产1
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