检验科全套SOP文件5生化室作业指导书

1、 212/212 2/2生化室作业指导书 文件编号：ABCD-3-SF-0161第A版编制： 审核： 批准： 生效日期：2008年8月8日ABCD医学检测中心目 录序号主 题 内 容 代 号页 号1血清总胆红素测定ABCD-3-SF-0162血清直接胆红素测定ABCD-3-SF-02103血清总蛋白液体双缩脲法测定ABCD-3-SF-03134血清白蛋白溴甲酚绿法测定ABCD-3-SF-04165血清丙氨酸氨基测定ABCD-3-SF-05196血清天门冬氨酸氨基测定ABCD-3-SF-06237血清碱性磷酸酶测定ABCD-3-SF-07278血清-淀粉酶测定ABCD-3-SF-08319血清葡

2、萄糖己糖激酶法测定ABCD-3-SF-093510血清尿素氮谷氨酸测定ABCD-3-SF-103911血清肌酐苦味酸法测定ABCD-3-SF-114312血清尿酸TBHBA法测定ABCD-3-SF-124613血清总胆固醇酶试剂法测定ABCD-3-SF-135014血清甘油三酯酶试剂法测定ABCD-3-SF-145415血清镁二甲苯胺蓝法测定ABCD-3-SF-155816血清无机磷磷钼酸法测定ABCD-3-SF-166117血清钙偶氮胂法测定ABCD-3-SF-176518血清载脂蛋白A1测定ABCD-3-SF-186819血清载脂蛋白B测定ABCD-3-SF-197220血清高密度脂蛋白胆

3、固醇测定ABCD-3-SF-207621血清低密度脂蛋白胆固醇测定ABCD-3-SF-218022血清肌酸激酶(CK) 法测定ABCD-3-SF-228423血清肌酸激酶MB同工酶测定ABCD-3-SF-238824血清乳酸脱氢酶DGKC法测定ABCD-3-SF-249225血清乳酸脱氢酶测定ABCD-3-SF-259626血清a-羟丁酸脱氢酶测定ABCD-3-SF-269927血清总胆汁酸循环酶法测定ABCD-3-SF-2710328OLYMPUS钠、钾、氯离子测定ABCD-3-SF-2810629血清二氧化碳酶试剂法测定ABCD-3-SF-2911230血清糖化蛋白四氮唑蓝法测定ABCD-

4、3-SF-3011531尿液或脑脊液总蛋白测定ABCD-3-SF-3111832血清g-谷氨酰转移酶测定ABCD-3-SF-3212133钾的电极电位法测定ABCD-3-SF-3312434钠离子电极电位法测定ABCD-3-SF-3412735氯的电极电位法测定ABCD-3-SF-3513236钙的比色法测定ABCD-3-SF-3613737血、尿、脑脊液葡萄糖测定ABCD-3-SF-3714238血、尿液尿素氮（BUN）测定ABCD-3-SF-3814739血、尿液肌酐（Cr）测定ABCD-3-SF-3915240血清天门冬氨酸测定ABCD-3-SF-4015741动脉血气电极法测定ABCD

5、-3-SF-4116342血清乳酸脱氢酶速率法测定ABCD-3-SF-4216843血、尿液淀粉酶两点法测定ABCD-3-SF-4317344血清蛋白电泳法检查ABCD-3-SF-4417845高铁血红蛋白还原试验比色法ABCD-3-SF-4518146血清二氧化碳酶反应终点法测定ABCD-3-SF-4618347正常值、病理值复合控制品ABCD-3-SF-4718848载脂蛋白A1、B复合控制品ABCD-3-SF-4819049复合校准品ABCD-3-SF-4919250载脂蛋白A1、载脂蛋白B校准品ABCD-3-SF-5019451高、低密度脂蛋白胆固醇校准品ABCD-3-SF-51196

6、52722分光光度计维护规程ABCD-3-SF-5219853血气分析仪操作维护规程ABCD-3-SF-5320154Medical低温冰箱操作维护规程ABCD-3-SF-5420355MEDICA 90纯水机操作维护规程ABCD-3-SF-5520556AU1000 ISE分析仪操作维护规程ABCD-3-SF-5620757AU1000生化分析仪操作维护规程ABCD-3-SF-5720958电泳仪操作维护规程ABCD-3-SF-5821459干化学分析仪操作维护规程ABCD-3-SF-5921760离心机操作维护规程ABCD-3-SF-60222 修 订 页序号文件编号页码需更改的内容更改内

7、容批准人批准日期123456789101112131415161718192021血清总胆红素(T-BIL)测定1. 实验原理血清中的胆红素分为直接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。大多数方法是在1883年Ehrlich提出的重氮法胆红素测量法1，一些改良的方法已被用来增进反应。这些改良的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。申能总胆红素试剂是改良的重氮法。使用一种稳定的重氮盐，2,4-二氯苯胺重氮盐（DCA），与胆红素反应，形成红色偶氮化合物，它在540nm吸光度最大。在540/600nm时的吸光度与标本

8、中总胆红素的浓度成正比。胆红素+DCA 红色偶氮化合物 表面活性剂2. 标本：2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。3. 标本存放：1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；-20保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。4. 标本运输：常温条件下避光保存运输。5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6. 实验材料6.1 试剂：申能总胆红素试剂盒（141 0817170 1 试剂1试剂2）6.1.1 试剂组成试剂1：664 ml 磷酸缓冲液 40mmol/L氯化钠 9g/L表面活性

9、剂,稳定剂 适量试剂2：616 ml2,4-二氯苯胺重氮盐 1mmol/L盐酸 30mmol/L表面活性剂 适量6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用，不要入口，毒性还末确定；警告！腐蚀剂！不要入口；避免和眼睛，皮肤或衣服接触，如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟，接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的Tru

10、Cal U校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件。8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件。9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11. 计算方法：以

11、TruCal U复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以mol/L报告。手工测定计算方法为： Au总胆红素(mol/L) = 校准液浓度 As12. 参考值范围：婴儿： 出生24小时内 150mol/L出生第2天 22-193mol/L出生第3天 12-217mol/L出生第46天 1.7-216mol/L儿童： 一个月 3.4-17mol/L成年人： 1.7-21mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶

12、解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。14. 操作性能14.1 线性范围：1.2513mol/L1

13、4.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法5，AU1000批内精密度小于3%或SD0.07，总精密度小于5%或SD0.10。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20(mol/L)s(mol/L)CV(%)批间精密度n=20(mol/L)s(mol/L)CV(%)样品115.220.4643.05样品114.880.4082.74样品217.440.4052.32样品219.660.6863.49样品382.600.7850.95样品379.522.2742.8614.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对247个样品

14、进行T-BIL检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00 x-0.00mol/L；r=1.000。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为1.2mol/L。14.5 病人结果可报告范围：1.2513mol/L15. 超出范围结果处理：本法线性上限为513mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。16. 病危报警值的处理 当新生儿血清标本测定结果总胆红素340mol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。17. 方法局限性17.1 本法线性上限为513mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶

15、液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，血红蛋白浓度5.00g/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19. 参考文献 1.Thomas L ed. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt:TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.192-202.2.Tolman KG, Rej R. Liver function. In: Burtis CA, Ashwood ER

16、. editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999. P.1125-77.3.Rand RN, di Pasqua A. A new diazo method for the determination of bilirubin. Clin Chem 1962;6:570-8.20. 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清直接胆红素（D-BIL）测定1. 实验原理直接胆红素与2,4-二氯苯胺重氮盐形成重氮化

17、合物，在酸性条件下呈红色。2. 标本：2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。3. 标本存放：1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；-20保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。4. 标本运输：常温条件下避光保存运输。5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6. 实验材料6.1 试剂：申能总胆红素试剂盒：141 0827170 1 试剂试剂26.1.1 试剂组成试剂1：1664mlEDTA-Na2 0.07mmol/L氯化钠 6.6g/L氨基磺酸 70mmol/L试剂2：616

18、ml2,4-二氯苯胺重氮盐 0.09mmol/L盐酸 130mmol/LEDTA-Na2 0.02mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。警告！腐蚀剂！不要入口。避免和眼睛，皮肤或衣服接触。如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分

19、析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11. 计算方法 以TruCal U复合校准品校准仪

20、器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以mol/L报告。手工测定计算方法为： Au直接胆红素(mol/L) =校准液浓度 As12. 参考值范围：6.8mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血

21、症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。14. 操作性能14.1 线性范围：1.7171mol/L14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法5，AU1000批内精密度小于4%或SD0.04，总精密度小于5%或SD0.07。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20(mol/L)s(

22、mol/L)CV(%)批间精密度n=20(mol/L)s(mol/L)CV(%)样品16.00.203.34样品16.20.193.12样品212.80.121.00样品213.00.191.46样品336.40.260.71样品335.40.461.3014.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对85个样品进行DBIL检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=0.95x+0.68mol/L；r=0.995。14.4 灵敏度：1.7mol/L。14.5 病人结果可报告范围：1.7171mol/L15 超出范围结果处理 本法线性上限为171mol/L。样品测定

23、值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。16. 病危报警值的处理 无。17. 方法局限性17.1 本法线性上限为171mol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。血红蛋白浓度0.50g/L将产生干扰。18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19. 参考文献：Tietz, N.W.(Ed), Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd Editi

24、on, W.B. Saunders,1987.Van den Bergh, A. and Mueller, P., Biochem Z,77:90,1916NCCLS, Interference Testing in Clinical Chemistry, EP7-P,1986.Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, 4th Edition, AACC Press, 1995.NCCLS, Evaluation Protocol EP5-T2,1992.Rand, R. N., DI Pasque, A., Cli

25、n Chem 1962; 8: 570 Henry, J., Cannon, D. C., Winkelmann, J. V., Clinical chemistry, principles and technics, Harper & Row Publishers Ins., Hagerstown Maryland, 1974:1042Thomas, L.: Labor and diagnose, 4th edition, Die Medizinische Verlagsgesellschaft, Marburg, 1992: 23520. 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检

26、验科废物处置管理规定执行。血清总蛋白液体(TP)双缩脲法测定实验原理双缩脲比色终点法。在碱性条件下，蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。显色强度和蛋白浓度成正比。OH蛋白质 + Cu2+ 紫红色复合物2. 标本采集2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清或血浆。3. 标本存放 2025保存可稳定6天；48保存可稳定4周；-20保存至少可稳定1年。4. 标本运输 室温条件下运输5. 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。6. 实验材料:6.1 上海申能总蛋白测定试剂盒 货号试剂1试剂26.1.1 试剂组成试剂1（R1）：664ml氢氧

27、化钠80 mmol/L酒石酸钾钠12.8 mmol/L试剂2（R2）：616ml氢氧化钠100 mmol/L酒石酸钾钠16 mmol/L碘化钾15 mmol/L硫酸铜6 mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5 注意事项：试剂中含有氢氧化钠，不可入口！如与皮肤及粘膜接触，请立即用大量水冲洗。使用试剂时应采取必要的防护。6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准

28、品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7. 仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11. 计算方法：以Tru

29、Cal U复合校准品总蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/L报告。12. 参考值范围 g/L成人：6688儿童/青少年：男女130天4262416316个月446647676个月1岁56795570118岁57805780（注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义：总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值。肝脏蛋白合成缺陷、肾功能损伤引起蛋白丢失、肠道吸收不良或营养不良时总蛋白浓度下降。而在慢性炎症疾病、肝硬化和脱水时总蛋白浓度升高。

30、14. 操作性能14.1 线性范围：0.5150g/L14.2 精密度：重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内重复性小于3%，总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)天间精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)样品152.70.50.91样品152.40.61.06样品270.50.71.01样品270.71.11.53样品31040.80.80样品31041.41.3214.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对68个样品进行TP检测，将检测结果作方法

31、学比较，其统计结果如下：y=1.00 x-0.7g/L；r=0.997。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.5g/L。14.5 病人结果可报告范围 0150g/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。15. 超出范围结果处理：本法线性上限为150g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。16. 病危报警值的处理 无。17. 方法局限性17.1 本法线性上限为150g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。17.2 干扰物质：静脉滴注大量右旋

32、糖酐的病人血清或血浆，使用双缩脲方法的检测结果会明显增高，请选用其它方法（如凯氏定氮法）；当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度684mol/L，血红蛋白浓度5.00g/L，甘油三酯浓度11.3mmol/L时没有观察到干扰18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19. 参考文献 1. Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.644-7.2. Johnson Am, Rohlfs EM, S

33、ilverman LM. Proteins. In: Burtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999.p.477-540.20. 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清白蛋白（ALB）溴甲酚绿（BCG）法测定实验原理在pH值4.2时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm处比色，颜色的深度与白蛋白浓度成正比。 pH4.2白蛋白+溴甲酚绿绿色化合物

34、2. 标本采集2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆。3. 标本存放 留取标本后请尽快分离血清/血浆。在室温条件下（1525）可以稳定一周，在冰箱保存的条件下（28）稳定一个月，-20保存至少可以稳定3个月。4. 标本运输 室温条件下运输5. 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。6. 实验材料:6.1 上海申能白蛋白测定试剂盒（货号：11202271701，870ml）6.1.1 试剂组成柠檬酸盐缓冲液 pH 4.2 30mmol/L溴甲酚绿(BCG) 0.26mmol/L表面活性剂 适量6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。6.

35、1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5 注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与

36、分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11. 计算方法：以TruCal U复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。手工测定计算方法为：Au白蛋白 (g/L)= 校准液浓度 As 12. 参考值范围 成人 3552g/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义：白蛋白是血浆中多种物质重要的结合与运输蛋白，并

37、是维持血浆渗透压的主要组分。血清白蛋白可用于众多疾病的诊断。血清白蛋白升高通常见于脱水的。血清白蛋白降低多见于营养不良、肾脏疾病，肝脏疾病，感染性疾病，严重的烧伤和癌症。白蛋白的定量测定有助于对肝脏疾病如肝硬化的诊断与监视。此外，白蛋白量反映了个体的健康与营养状况，因此可用于营养不良的诊断及老年住院患者的预后评估。14. 操作性能14.1 线性范围 260g/L14.2 精密度：重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内重复性小于3%，总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)天间精密度n=2

38、0(g/L)s(g/L)CV(%)样品135.20.30.91样品133.50.51.58样品245.00.51.12样品243.20.61.44样品368.91.21.79样品367.31.11.6014.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对59个样品进行ALB检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00 x-1.1g/L；r=0.99814.4 灵敏度：2g/L。14.5 病人结果可报告范围：260g/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。15. 超出范围结果处理 本法线性上限为60g/L。如样

39、品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。16. 病危报警值的处理17. 方法局限性17.1本法线性上限为60g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度684mol/L，血红蛋白浓度 4.00g/L，甘油三酯浓度5.63mmol/L时没有观察到干扰。18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19. 参考文献 1. DOUMAS, B., WATSON, W. A., BIGGS, H. G., CLIN CHIM A

40、CTA 1971; 31: 87-962. WEBSTER, D., CLIN CHIM ACTA 1974; 53: 109-1153. TIETZ, N. W.: TEXTBOOK OF CLINICAL CHEMISTRY, 2ND EDITION, W. B. SAUNDERS COMPANY, PHILADELPHIA, 1994: 703AACC Press Friendman,R.B.,and Young,D.S.,Effects of Disease on Clinical Laboratory Tests,2nd Edition,1989.Rodkey,F.L.,Clin C

41、hem,2:478;1965Doumas,B.T.,Watson,W.A.and Biggs,H.G.,Clin Chem Acta 31:87-96,1971.Tietz,N.W.,Clinical Guide to Laboratory Tests,2nd Edition,W.B.Saunders,1990.NCCLS,Interference Testing in Clinical Chemistry,EP7-P,1986.Young,D.S.,Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests,4th Edition,AACC Press,199

42、5. NCCLS,Guideline EP5-T2,1992.20. 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定实验原理国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。 ALTLDH（乳酸脱氢酶）L-丙氨酸 + -酮戊二酸 丙酮酸 + L-谷氨酸丙酮酸+ NADH + H+ L-乳酸 + NAD+ + H2O加入磷酸吡哆醛（P-5-P）是为了稳定ALT活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造成测定结果假性偏低。(如心肌梗死、肝病和特别监护病人的结果)12. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。2.2 类型：血清，肝素

43、或EDTA血浆。3. 标本存放：3天内的活性损失：28保存：10%；1525保存：17%；标本稳定性：-20保存至少可稳定4周。4. 标本运输：常温条件下保存运输。5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。6. 实验材料6.1 试剂 申能ALT测定试剂盒（货号：141 27017170 1 试剂1 664ml试剂2 616ml）6.1.1 试剂组成试剂1（R1）：Tris缓冲液 pH 7.5 100mmol/LL-丙氨酸 500mmol/LLDH（乳酸脱氢酶） 1200U/L试剂2（R2）：a-酮戊二酸 15mmol/LNADH 0.18mmol/L磷酸吡哆醛试剂：Goods 缓冲液 pH

44、9.6 0.7mmol/L磷酸吡哆醛 0.09mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SO

45、P文件。7. 仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11. 计算方法：以TruCal U复合校准品ALT校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。12.

46、参考值范围 4不含磷酸吡哆醛 含磷酸吡哆醛女性 31U/L 1035U/L男性 41U/L 1050U/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义1,2：丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT），天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给-酮酸的反应。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测，可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/

47、ALT比率用于肝病的鉴别诊断。比率1和严重肝病有关，常见慢性肝病。14. 操作性能14.1 线性范围 4800U/L14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。不含磷酸吡哆醛批内精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)天间精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)样品122.80.703.08样品122.21.386.22样品242.60.681.60样品244.81.172.62样品399.30.920.92样品31011.021.00含磷酸吡哆醛批内精密度n

48、=20(U/L)s(U/L)CV(%)批间精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)样品133.30.992.96样品133.81.253.71样品272.11.361.88样品272.02.042.83样品31331.761.32样品31282.772.1614.3 方法学比较：不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对78个样品进行ALT活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00 x+0.00U/L；r=0.999。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对80个样品进行ALT活力检测，将检测结果作

49、方法学比较，其统计结果如下：y=1.00 x+0.00U/L；r=0.994。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为4U/L。14.5 病人结果可报告范围 4U/L-800U/L 15. 超出范围结果处理 本法对ALT活力检测的最大A/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：9稀释，重新测定，结果乘以10。16. 病危报警值的处理 17. 方法局限性17.1 本法对ALT活力检测的最大A/min在340、334nm为0.16,在365 nm为0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：9稀释，重

50、新测定，结果乘以10。17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度684mol/L，血红蛋白浓度4.00g/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19. 参考文献 Thomas L. Alanine aminotransferase(ALT), Aspartate aminotransferase(AST). In: Thomas L, editor. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsge

51、sellschaft; 1998.p.55-65.Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology. In: Burtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999. P.617-721.Bergmeyer HU, Horder M, Rej R. International Federation of Clinical Chemistry (IFCC) Scientific

52、 Committee, Analytical section: approved recommendation (1985) on IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 3. IFCC method for alanine aminotransferase(L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase, EC 2.6.1.2). J Clin Chem Clin Biochem 1986; 24:481-95.4. Lorentz K, R

53、ohle G, Siekmann L. Einfuhrung der neuen Standardmethoden 1994 zur Bestimmung der katalytischen Enzymkonzentrationen bei 37. DG Klinische Chemie Mitteilungen 1995;26:190-2.20. 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清天门冬氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定1. 实验原理：国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。L-天门冬氨酸+ -酮戊二酸 AST 草酰乙酸+L-谷氨酸草酰

54、乙酸+ NADH +H+ MDH苹果酸脱氢酶 L-苹果酸+NAD+H2O2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。3. 标本存放：3天内的活性损失：28保存：8%；1525保存：10%；标本稳定性：-20保存至少可稳定3个月。4. 标本运输：常温条件下保存运输。5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。6. 实验材料6.1 试剂：申能AST测定试剂盒（货号：141 26017170 1 试剂1：664ml；试剂2：616ml）6.1.1 试剂组成试剂1（R1）：Tris缓冲液 pH7.8 80mmol/LL-天门冬氨酸 240mmol/LMDH(苹

55、果酸脱氢酶) 600U/LLDH(乳酸脱氢酶) 600U/L试剂2(R2)：a-酮戊二酸 12mmol/LNADH 0.18mmol/L磷酸吡哆醛试剂：Goods缓冲液 pH9.6 0.7mmol/L磷酸吡哆醛 0.09mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2 校

56、准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7. 仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室

57、内质控操作规程.SOP文件。11. 计算方法：以TruCal U复合校准品AST校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。不使用校准品进行AST活力检测，可以直接使用A/min均值乘以计算因子得到结果，但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算ALT活力的计算因子见下表：A/min因子 = AST活力U/L 底物起始的反应（37） 样品起始的反应（37）340 nm 2143 1745334 nm 2184 1780365 nm 3971 323512. 参考值范围 4不含磷酸吡哆醛 含磷酸吡哆醛女性 31U/L 1035U/L男性 37U/L 1050U/L参考

58、值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义1,2丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT），天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给-酮酸的反应。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率可用于肝病的鉴别诊断。比率1和严重肝病有关，常见慢性肝病。14. 操作性能14.1 线性范围2-800U/

59、L。14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。不含磷酸吡哆醛批内精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)天间精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)样品125.10.823.25样品125.71.134.40样品251.31.573.06样品248.60.671.38样品31160.900.77样品31150.800.69含磷酸吡哆醛批内精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)天间精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)样品143.61.102.

60、51样品144.01.593.61样品274.51.792.41样品277.03.053.97样品31743.181.83样品31873.371.8014.3 方法学比较：不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对78个样品进行AST活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=0.98x-0.51U/L；r =0.999。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对80个样品进行AST活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=0.97x-0.79U/L；r=0.995。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为2U