同济医院检验科ISO15189体系文件22梅毒螺旋体抗体（TPPA）测定

1、同济大学附属同济医院检验科免疫组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ722第2版标题：梅毒螺旋体抗体（TPPA）测定第7章 第22号第 PAGE 3 页 共 NUMPAGES 3 页 目的:检测血清标本中的梅毒螺旋体抗体。2. 适用范围：同济医院检验科免疫室。3. 项目名称：梅毒螺旋体抗体测定。4. 检测方法：凝集法。5. 检测原理：将梅毒的精制菌体成分包被在人工载体明胶粒子上。这种致敏粒子和样品中的梅毒螺旋体抗体反应发生凝集，由此可检测出血清和血浆中的梅毒螺旋体抗体。6. 试剂：6.1 品牌：日本富士。6.2 包装规格：100人份。6.3 内含物：6.3.1 阳性对照：1瓶，每瓶0.5m

2、l。6.3.2 溶解液 ：1瓶，8ml。6.3.3 血清稀释液：1瓶，29ml。6.3.4 致敏粒子：5瓶，每瓶0.6ml。6.3.5 未致敏粒子：5瓶，每瓶0.6ml。6.3.6 说明书：1份。7. 操作步骤：7.1 打印工作单:7.1.1 打开电脑及打印机电源，7.1.2 双击齐效检验系统，登陆工号与密码；7.1.3 双击报告处理，单击标本申请信息，打开标本申请明细信息查询，打开左上角的所有信息，选择未生成报告信息。7.1.4 在检验项目处选择TPPA执行查询，点击打印申请单，打印出工作单。7.2 排列被检测标本:根据工作单上的库位号找出相应标本，并按工作单上的顺序排列。7.3 按以下步骤

3、开始操作:7.3.1 将100ul（4滴）稀释液滴入微量反应板第一孔中，第2孔到4孔各滴1滴(25ul)。 7.3.2 用微量移液管取样品25ul至第一孔中，然后从第一孔倍比稀释至第四孔。7.3.3 在第三孔中滴入1滴（25ul）未致敏粒子，在第四孔中滴入1滴（25ul）致敏粒子。7.3.4 在平板混合器上混合30秒，加盖后于室温下水平静置2小时后观察结果。7.4 结果： 反应图象 判定结果 颗粒呈纽扣状凝集，呈现出外周缘均匀且平滑的圆形 （） 粒子形成小环状，呈现出外周缘均匀且平滑的圆形 （）粒子状明显变大，其外周缘不均匀且杂乱的凝集外周 （+） 产生均一的凝集，凝集粒子在底部整体上呈膜状延

4、展 （+）7.4.1 阳性：样品与未致敏粒子为（），而与致敏粒子（最终稀释倍数1：40）为（+）；7.4.2 阴性：样品与致敏粒子（最终稀释倍数1：40）为（-）。 7.5 发送报告：详见免疫报告发送程序。8. 参考范围：正常人阴性。9 临床意义：9.1 本试剂用来测定样品中的梅毒的抗体效价，在判定为抗体阳性的情况下，应结合其他检查结果及临床症状综合判断。9.2 梅毒TP感染初期，有可能不产生抗体，如疑为感染，可经过一段时间再进行检查。9.3 应用了含有免疫球蛋白制剂的患者样品中，由于可能因服用的制剂而成阳性反应。 病人准备、标本要求：标本为血清时最好空腹采血，脂血、溶血不可使用。其它体液标本无特殊要求。11. 注意事项11.1 血清样品中存在的红细胞或其它有形成分应在试验前除去，以防止干扰试验结果。11.2 使用前应充分混匀致敏粒子和末致敏粒子。11.3 在滴加致敏粒子和末致敏粒子后，应充分混匀微量反应板各孔中的内容物。11