同济医院检验科ISO15189体系文件18白细胞介素-2受体（IL-2R）测定

1、同济大学附属同济医院检验科免疫组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ718第2版标题：白细胞介素-2受体（IL-2R）测定第7章 第18号第 PAGE 4 页 共 NUMPAGES 4 页1. 目的：检测血清标本中的白细胞介素-2受体（IL-2R）。2. 适用范围：同济医院检验科免疫室。3. 项目名称：白细胞介素-2受体（IL-2R）。4. 检测方法：酶免疫分析法。5. 检测原理：采用双抗体夹心法。将抗人IL-2R抗体包被于酶标板上，加入标本和生物素化检测抗体，形成抗体-IL-2R-抗体复合物，再加入HRP标记的亲和素，在生物素-亲和素结合后，加入显色剂，最后加入终止液。上酶标仪在450n

2、m处测OD值，通过标准曲线测算样本中IL-2R的浓度。6. 试剂：6.1 品牌：购自北京晶美公司。6.2 包装规格:48人份。6.3 内含物:每盒试剂含以下成分：6.3.1 标准品1支；6.3.2 标准品/标本稀释液1瓶；6.3.3 浓缩生物素化抗体1支；6.3.4 生物素化抗体稀释液1瓶；6.3.5 浓缩酶结合物1支；6.3.6 酶结合物稀释液1瓶；6.3.7 浓缩洗涤液1瓶；6.3.8 底物显色剂1瓶；6.3.9 终止液1瓶；6.3.10抗IL-2R抗体包被板条8*6；6.3.11封板胶纸2张。6.3.12说明书1份。7. 仪器品牌、型号：BIORAD3550UV酶标仪，测定波长为450n

3、m。8. 操作步骤：8.1 打印工作单:8.1.1 打开LIS电脑及打印机电源；8.1.2 双击齐效检验系统，登陆工号与密码；8.1.3 双击报告处理，单击标本申请信息，打开标本申请明细信息查询，打开左上角的所有信息，选择未生成报告信息。8.1.4 在检验项目处选择IL-2R执行查询，点击打印申请单，打印出工作单。8.2 排列被检测标本:根据工作单上的库位号找出相应标本，并按工作单上的顺序排列。8.3 实验操作流程:8.3.1 将标准品用稀释液稀释成不同浓度：500、250、125、62.5、31.25、15.125 pg/ml。8.3.2 将标准品和待测标本（1：10稀释）各加100ul到板

4、条的微孔中，振荡混匀后37孵育90分钟。8.3.3 洗板4次。8.3.4 每孔中加入生物素化抗体（1：100稀释）100ul，37孵育60分钟。8.3.5 洗板4次。8.3.6 每孔加入酶结合物（1：100稀释）100ul，37孵育30分钟。8.3.7 洗板4次。8.3.8 每孔加入底物显色剂100ul，避光，37孵育15-20分钟。8.3.9 每孔加入终止液100ul，混匀后上酶标仪450nm处测量OD值（5分钟内）。8.4 结果判定：根据标准曲线测算出待测样品的浓度。8.5 发送报告：详见免疫报告发送程序。9. 参考范围：1-4.2ng/ml。10. 临床意义：10.1 白细胞及淋巴系统恶性疾病患者血清sIL-2R明显升高，病情缓解时sIL-2R水平下降。10.2 AIDS病及AIDS相关综合征（ARC）患者血清sIL-2R升高并且sIL-2R水平与CD4细胞数呈负相关。10.3 器官移植排斥患者血清sIL-2R水平可动态反应患者对移植物的反应，排斥期sIL-2R水平明显升高。10.4 其他：一些自身免疫性疾病；如活动期SLE血清sIL-2R明显升高。11. 病人准备、标本要求：血清，脂血、溶血不可使用。12. 注意事项：12.1 温育时，反应板温育时间必须严格控制，洗涤须彻底。12.2 实验前试剂盒置室温30分钟后方可加样。12.3