同济医院检验科ISO15189体系文件12血清肌酸激酶（CK）测定

1、同济大学附属同济医院检验科生化组项目操作指导书TJYYJYKSH/XMZ112第2版标题：血清肌酸激酶（CK）测定第章 第12节第 PAGE 3 页 共 NUMPAGES 3 页1. 目的：保证CK检测结果准确、可靠2. 适用范围：CK在全自动生化分析仪上的检测3. 项目名称：CK4. 检测方法：酶偶联测定法 原理：CK催化磷酸肌酸（CrP）与二磷酸腺苷（ADP）反应产生三磷酸腺苷（ATP）与肌酸（Cr）； 偶联己糖激酶（HK）及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）的催化反应。HK催化葡萄糖（Glu）与ATP反应，形成葡萄糖-6-磷酸（G6P），G6PD催化G6P氧化，形成6-磷酸葡萄糖内酯（6

2、-PG） 及NADPH。NADPH生成的速率代表CK活力。其反应式如下： CK CrP + ADP Cr + ATP pH6.7 HK ATP + Glu G-6-P + ADP G6PD G-6-P + NADP+ 6PG + NADPH + H+ 6. 试剂：6.1 检测试剂：6.1.1 品牌：申能-德赛6.1.2 货号：141 1607060 16.1.3 包装规格：R1：580 ml + R2：520 ml6.1.4 试剂组成： 咪唑缓冲液：pH6.7，100mmol/L；肌酸磷酸：30 mmol/L；乙酸镁：10mmol/L； 葡萄糖：20mmol/L；N-乙酰半胱氨酸：20 mmo

3、l/L；EDTA：2mmol/L；ADP：2mmol/L； AMP：5mmol/L；NADP：2mmol/L；五磷酸二腺苷：10umol/L； 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶：1500U/L；己糖激酶：2500U/L 6.2 标准品：罗氏C.F.A.S.混合定标液7. 仪器：HITACHI 7180 生化分析仪8. 操作：自动生化分析仪测定，具体参数见附录。线性范围： 1000 U/L参考范围：25 200U/L（测定温度37）11. 临床意义： CK主要存在于骨骼肌和心肌，在脑组织中也有存在。各种类型进行性肌萎缩时，血清CK活性均可增高。神经因素引起的肌萎缩如脊髓灰白质炎时活力正常，皮肌炎时CK活性

4、可有轻度或中度增高。急性心肌梗塞后24小时就开始增高，可高达正常上限的1012倍。CK对诊断心肌梗塞较AST、LD的特异性高，但此酶增高持续时间短，24天就恢复正常。病毒性心肌炎时也明显升高，对诊断及预后有参考价值。CK增高还见于脑血管意外、脑膜炎、甲状腺机能低下等患者。还应注意到一些非疾病因素如剧烈运动、各种插管及手术、肌肉注射冬眠灵和抗生素等也可能引起CK活性增高。 标本要求：血清、肝素抗凝血浆标本。标本须在12h内完成测定，将盖紧的容器放在阴暗处，活性在48能稳定3天。13. 注意事项：13.1 超过测定线性范围，更高活力的血清用已知CK活性正常的血清稀释后再测。13.2 血清中存有内源性的抑制剂，表现CK活力随血清稀释倍数增加而增加，故不宜用盐水稀释。13.3 最好用血清标本，肝素血浆也可用。CK活性不稳定，血清保存时易丧失，标本采集后应尽快将血清冷却到4。13.4 红细胞不含CK，轻度溶血无影响。14