质粒DNA的提取与纯化实验教案

1、学习必备欢迎下载1、质粒DNA的提取与纯化实验教案授课题目：质粒DNA的提取与纯化授课对象：四年制生物技术本科生授课时间：2007年3月20/27日13：00至2007年3月20/27日18：00授课教师：刘清岱教学目标及基本要求1、通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒DNA。2、初步了解DNA纯化的原理。教学内容提要及时间分配1、质粒DNA的概念及其在分子生物学的应用。30分钟2、碱裂解法提取质粒DNA的原理。20分钟3、DNA纯化与保存的方法。20分钟4、分子生物学仪器的使用方法。30分钟5、实验条件及步骤。30分钟6、质粒DNA的提取。60分钟7、质粒DNA的纯化。60分钟8、质粒DNA

2、的保存。30分钟9、总结20分钟教学重点及难点1、碱裂解法提取、纯化质粒DNA的实验方法。2、质粒DNA的性质与应用。3、分子生物学基本操作。教学方法：结合理论实际，抽象知识内容用多媒体表示，实验操作过程给于示教。教学手段：观看碱裂解法提取质粒DNA的教学录相，同时采用画图，示范教学的方法。使用的教材及参考资料：生物化学实验和技术，袁道强，黄建华等编著，中国轻工业出版社，2006分子克隆实验指南第三版（上、下册），原著：美J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔，科学出版社，2002精编分子生物学实验指南，F.M.奥斯伯等编著，科学出版社，2005教研室主任意见：年月日本单元教学总结（教学的主要经验、效果

3、、存在的问题、改进措施等）：1、具体实验操作步骤较多，应让学生提前预习，并书写预习报告。2、观看碱裂解法提取质粒DNA的教学录相更加直观了解实验原理和方法。3、应该强化学生分子生物学实验操作基本技术。4、着重强调碱法提取质粒DNA操作过程中应注意的一些问题。学习必备欢迎下载2、质粒DNA的酶切与电泳检测实验教案授课题目：质粒DNA的酶切与电泳检测授课对象：四年制生物技术本科生授课时间：2007年4月3/10日13：00至2007年4月3/10日18：00授课教师：刘清岱教学目标及基本要求1、通过本部分实验学习质粒DNA的限制性内切酶酶切分析。2、初步了解如何建立双酶切的实验体系。3、掌握电泳仪

4、、凝胶成像系统等设备的使用。教学内容提要及时间分配1、限制性内切酶的概述及其在分子生物学的应用。30分钟2、琼脂糖凝胶电泳检测DNA的原理。10分钟3、不同质粒DNA电泳现象20分钟4、实验条件及步骤。30分钟5、琼脂糖电泳相关仪器的使用方法。30分钟6、质粒DNA的酶切。60分钟7、琼脂糖凝胶电泳与染色。90分钟8、凝胶成像系统分析实验结果。30分钟教学重点及难点1、限制性内切酶的性质和双酶切体系的建立。2、应用琼脂糖凝胶电泳分析质粒DNA的电泳行为。教学方法：讨论式教学，充分发挥学生的主体作用，引导学生去思考、去探索、去发现，要鼓励学生大胆提出问题。教学手段：通过质粒DNA酶切的电泳图片，

5、板书限制性内切酶的识别序列，同时采用示范教学的方法。使用的教材及参考资料：生物化学实验和技术，袁道强，黄建华等编著，中国轻工业出版社，2006分子生物学检验技术，徐克前等编著，人民卫生出版社，2003精编分子生物学实验指南，F.M.奥斯伯等编著，科学出版社，2005教研室主任意见：年月日本单元教学总结（教学的主要经验、效果、存在的问题、改进措施等）：1、介绍分子生物学工具酶在基因工程中的应用，增加学生兴趣。2、对于凝胶成像系统等设备应该让学生们多接触，使其能够独立操作，并对其结果进行分析。学习必备欢迎下载3、植物基因组DNA的提取和纯度鉴定实验教案授课题目：植物基因组DNA的提取和纯度鉴定授课

6、对象：四年制生物技术本科生授课时间：2007年4月17/24日13：00至2007年4月17/24日18：00授课教师：刘常金教学目标及基本要求1、掌握提取真核细胞基因组DNA的一种基本方法。2、学习使用紫外线分光法计算DNA的含量和纯度。教学内容提要及时间分配1、真核细胞基因组DNA提取的原理。30分钟2、紫外线分光法测定DNA的含量和纯度。30分钟3、紫外线分光光度计的使用方法。20分钟5、实验条件及步骤。30分钟6、植物材料丙酮粉的制备。60分钟7、基因组DNA的提取。60分钟8、产品浓度及纯度测定。30分钟9、总结30分钟教学重点及难点1、真核细胞基因组DNA提取的实验方法。2、DNA

7、浓度及纯度的计算方法。教学方法：结合理论实际，深入浅出。实验操作过程给于示教。教学手段：采用画图，示范教学的方法。使用的教材及参考资料：生物化学实验和技术，袁道强，黄建华等编著，中国轻工业出版社，2006分子克隆实验指南第三版（上、下册），原著：美J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔，科学出版社，2002精编分子生物学实验指南，F.M.奥斯伯等编著，科学出版社，2005教研室主任意见：年月日本单元教学总结（教学的主要经验、效果、存在的问题、改进措施等）：1、真核细胞基因组DNA提取步骤较多，应让学生提前预习并书写预习报告。2、使用紫外线分光光度计，正确计算DNA的浓度和纯度对于分子生物学非常关键。学习

8、必备欢迎下载4、聚合酶链式反应（PCR）基因扩增实验教案授课题目：大肠杆菌感受态细胞的制备及转化授课对象：四年制生物技术本科生授课时间：2007年5月8/15日13：00至2007年5月8/15日18：00授课教师：李静教学目标及基本要求1、通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。2、初步了解PCR引物的设计与相关软件的使用。教学内容提要及时间分配1、聚合酶链式反应（PCR）的原理。20分钟2、PCR在分子生物学与医学等领域的应用。30分钟3、如何建立一个PCR反应体系。30分钟4、PCR引物的设计与相关软件的使用。30分钟5、基因扩增仪的使用方法。30分钟6、PCR实验操作。90分钟7

9、、PCR结果的电泳检测。90分钟8、总结10分钟教学重点及难点1、PCR反应体系的原理与优化。1、PCR引物设计的原则与PCR相关软件的使用。教学方法：推演性教学，介绍简单的模式。抽象知识内容多媒体表示，具体实验操作过程给于示教。教学手段：观看聚合酶链式反应的课件，同时采用电脑示范Primer5.0软件来设计PCR引物。使用的教材及参考资料：生物化学实验和技术，袁道强，黄建华等编著，中国轻工业出版社，2006PCR技术实验指南，迪芬巴赫，德弗克斯勒等编著，化工出版社，2006PCR最新技术原理、方法及应用，黄留玉等编著，化工出版社，2005教研室主任意见：年月日本单元教学总结（教学的主要经验、

10、效果、存在的问题、改进措施等）：1、实验内容结合理论内容进行讲述，效果较好。2、分子生物学软件的使用应该详细讲解，使学生能够使用来初步设计、分析PCR引物。学习必备欢迎下载5、DNA体外重组实验教案授课题目：DNA体外重组授课对象：四年制生物技术本科生授课时间：2007年5月22/29日13：00至2007年5月22/29日18：00授课教师：刘常金教学目标及基本要求1、通过本部分实验学习重组质粒的连接、转化及筛选的原理与方法。2、初步了解外源DNA片段和质粒载体的连接反应策略。教学内容提要及时间分配1、概述质粒的连接、转化及筛选的原理。30分钟2、几种连接反应策略。40分钟3、实验条件及步骤

11、。30分钟4、质粒DNA的制备。60分钟5、外源DNA的制备。60分钟6、DNA的体外重组。60分钟7、总结20分钟教学重点及难点质粒的连接、转化及筛选的原理。教学方法：讨论式教学，抽象知识内容多媒体表示，实验操作过程给于示教。教学手段：观看基因克隆的教学课件，同时采用画图，示范教学的方法。使用的教材及参考资料：生物化学实验和技术，袁道强，黄建华等编著，中国轻工业出版社，2006分子克隆实验指南第三版（上、下册），原著：美J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔，科学出版社，2002精编分子生物学实验指南，F.M.奥斯伯等编著，科学出版社，2005教研室主任意见：年月日本单元教学总结（教学的主要经验、效果

12、、存在的问题、改进措施等）：1、本实验较抽象，多媒体教学尤为重要。2、应该介绍前后的实验之间的联系，使几个实验的学习成为一个整体。3、强调实验基本操作规范，让学生养成良好的实验习惯，具有扎实的实验技能。学习必备欢迎下载6、大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验教案授课题目：大肠杆菌感受态细胞的制备及转化授课对象：四年制生物技术本科生授课时间：2007年6月4/11日13：00至2007年6月4/11日18：00授课教师：刘常金教学目标及基本要求1、学习和掌握大肠杆菌感受态细胞的制备技术。2、能够计算转化率。3、了解其他的转化方法与筛选体系。教学内容提要及时间分配1、大肠杆菌感受态细胞制备的原理。30分钟2、计算转化效率，影响转化效率的因素。30分钟3、介绍转化细胞的筛选。20分钟4、-70冰箱等仪器的使用方法。30分钟5、实验条件及步骤。30分钟6、大肠杆菌感受态细胞的制备。60分钟7、质粒转化至大肠杆菌。60分钟8、转化细胞的筛选。30分钟9、总结10分钟教学重点及难点1、CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞的原理。2、如何正确计算转化效率，如何提高转化效率。教学方法：推演性教学，介绍简单的计算模式。实验操作过程给于示教。教学手段：采用板书计算转化效率的方法，同时结合课件进行讲述。使用的教材及参考资料：生物化学实验和技术，袁道强，黄建华等编著，中国