定性试剂盒阳性判断值研究决策树

1、定性试剂盒阳性判断值研究决策树（本人闭门造车，可能引起不适，请予以指导）：产品最低检测限应该已经知道Cutoff值应该稍微小于产品最低检测限，可以理论估计一个值X（有些省局认为是相等，特别注意！）配制在X上下20%浓度的参考品进行验证再使用已知阴阳结果的样本，对该试剂盒的阳性判断值进行验证。参考2017 213-1 促黄体生成素检测试剂（胶体金免疫层析法）注册技术审查指导原则 2017年第213号通告附件1定性试剂盒是真“定性”，还是以“定量”来做“定性”定性试剂盒，比如某胶体金产品以定量来做“定性”用一个临床检测指标来判断阴阳性，比如某核酸检测产品已知阴阳结果的样本，比如200例，做ROC曲

2、线（或其他方式）。根据已知检测结果，找出最优的cutoff值。可以制备在临界值浓度上下20%浓度的参考品进行验证（也可以不用）联检产品虽然是联检产品，但是各自独立的每个指标，均有各自独立的cutoff值1 如果能获得足够多的样本，可以每个指标都研究一遍。同上。2 如果难以获取足够多的每个指标的阳性样本，可以适当依据统计学要求，采用其他的统计学方法来确定cutoff值，采取较少的阳性样本进行研究（比如研究Z-SCORE值），最好是制备参考品再进行验证。 综合所有的检测指标，用一个拟合值来判断结果阴阳性1 需要用一定数量的已知阴阳结果的样本，来构建拟合公式，并得出一个“cutoff值”2 需要用一

3、定数量的已知阴阳结果的样本，对算法计算出来的cutoff值进行验证参考依据：一 ：胶体金类指导原则：1 2017 213-1 促黄体生成素检测试剂（胶体金免疫层析法）注册技术审查指导原则 2017年第213号通告附件11.1临界值的确定用空白对照液和含有10mIU/mL、25mIU/mL、50mIU/mL促黄体生成素标准品的样品液分别测定同批号试纸，每个浓度测定3条，结果显示临界值应为25mIU/mL。（五）阳性判断值或参考区间确定资料应当详细说明阳性判断值确定的方法或依据，说明确定阳性判断值所采用的样本来源，并提供阳性判断值确定的详细试验资料及总结。半定量产品则应根据医学上促黄体生成素的不同

4、分泌期分别进行参考区间的研究。应明确研究采用的样本来源、详细的试验资料、统计方法等。参考值范围可参考公认的权威资料/临床比对试剂，但应当进行验证。验证样本数量应不低于120例。不同样本类型（随机尿、晨尿等）应分别进行研究。研究结论应与产品说明书【参考区间】的相应描述保持一致。2 2017 213-2 心肌肌钙蛋白I肌红蛋白肌酸激酶同工酶MB检测试剂（胶体金免疫层析法）注册技术审查指导原则 2017年第213号通告附件2（五）阳性判断值确定资料应提交验证阳性判断值所采用样本来源、确定方法及详细的试验资料。研究时，建议包括正常人群组以及与心梗疾病易混淆的干扰组。且应提交临界值及灰区上下限（C95、

5、C5）确定的相关研究资料。阳性判断值研究结果应在说明书【阳性判断值】项中进行相应说明。二：核酸类：1 2020 16 国家药监局关于发布EB病毒核酸检测试剂等4项-1 EB病毒核酸检测试剂注册技术审查指导原则（五）阳性判断值研究资料申请人应考虑不同地理区域流行病学背景以及人口统计学特征（包括性别、地域、种族等因素）的差异，选择具有代表性的样本建立阳性判断值，注意应纳入一定数量的弱阳性样本。如采用其他研究方法，应说明其合理性。对于荧光实时PCR方法即为用于结果判读的Ct值和/或核酸浓度的确定资料，包括确定基线阈值（threshold）、阈值循环数（Ct）、核酸浓度（如适用）的研究资料等。另外，建

6、议申请人考虑建立阳性判断值时使用的受试者样本对于目标人群的代表性，通过临床评价进一步验证和确认阳性判断值的准确性。2 2020 32 国家药监局关于发布登革病毒核酸检测试剂注册技术审查指导原则的通告（2020年第32号）（五）阳性判断值确定资料对于基于荧光探针PCR方法的检测试剂，阳性判断值确定资料主要是指Ct值的确定资料。申请人应采用适当的统计学方法建立检测试剂的阳性判断值。申请人可采用受试者工作特征（ROC）曲线的方式确定申报试剂用于结果判断的临界值。有关ROC曲线分析的细节，请参考国内外相关的文件。如存在灰区，应提交灰区确定的详细的研究资料。三：联检： 2019 80 呼吸道病毒多重核酸

7、检测试剂注册技术审查指导原则(2019年第80号)（五）阳性判断值确定资料阳性判断值确定资料主要指对每种声称可检出的病毒核酸检测的Ct值进行确认，建议申请人对申报产品用于结果判断的临界值予以确认。阳性判断值研究资料样本来源应考虑不同年龄、性别、地域等因素，尽可能考虑样本来源的多样性、代表性。如存在判定值灰区，应提供灰区的确认资料。如采用其他方法对阳性判断值进行确认研究，应说明这种方法的合理性。提供内标值的确定方法和研究资料。2.2019 80 基于核酸检测方法的金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测试剂注册技术审查指导原则(2019年第80号)（五）阳性判断值确定资料对于此类试剂，阳性判

8、断值即为针对每个目标物能够获得理想的临床灵敏度和临床特异性的临界值（Cutoff），对于荧光探针PCR方法即为Ct值的确定资料。建议采用受试者工作特征（ROC）曲线的方式进行相关研究。申请人应选取适当的足够数量的临床样本进行试验以确定阳性判断值。四 综合类：定性检测试剂性能评估注册技术-审查指导原则-征求意见稿17. 阳性判断值申请人应当详细说明阳性判断值确定的方法或依据，采用样本的来源与组成，确定临床诊断信息的方法并提交阳性判断值建立的研究资料。建议使用具有统计学意义数量的受试者样本，样本为包含一定比例的阴、阳性样本的有代表性的目标人群样本，应充分考虑到地域性、季节、不同感染阶段/肿瘤分期和生理状态