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1、同济大学附属同济医院检验科血液组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ132第2版标题: -丁酸萘酚酯酶染色第1章 第32节第 PAGE 3 页 共 NUMPAGES 3 页 目的:保证-丁酸萘酚酯酶染色 适用范围:-丁酸萘酚酯酶染色检测 项目名称:-丁酸萘酚酯酶染色 检测方法:化学染色法 原理:血细胞内的-丁酸萘酚酯酶将基质液中的-丁酸萘酚水解,产生丁酸萘酚, 与坚牢紫酱GBC偶联形成灰褐色沉淀,定位与胞浆内。 试剂:6.1 品牌: 丙酮 上海试剂三厂 37%甲醛 上海试剂三厂磷酸氢二钠 上海新华化工厂 磷酸二氢钾 上海试剂二厂丁酸萘酚 SIGMANN-二甲基甲酰胺溶液 上海华工试剂厂盐酸
2、 上海试剂三厂付品红 上海试剂二厂亚硝酸钠 上海振兴试剂厂6.2 货号: 丙酮 13-20102365II 37%甲醛 13-20102569II磷酸氢二钠 磷酸二氢钾 13-001-0802-113II丁酸萘酚 218-440NN-二甲基甲酰胺溶液 盐酸 13-001-0806-003II付品红 亚硝酸钠 13-0010801220II6.3 丙酮 500ml 37%甲醛 500ml磷酸氢二钠 500g 磷酸二氢钾 500g氯化醋酸AS-D萘酚 1gNN-二甲基甲酰胺溶液 500ml 盐酸 500ml付品红 25g亚硝酸钠 25g6.4 内含物:6.4.1 固定液: 丙酮 45ml 37%甲
3、醛 25ml6.4.2 六偶氮付品红溶液 甲液:40g/L盐酸付品红溶液付品红 4g2N盐酸 100ml冷时过滤,置棕色瓶内避光保存乙液:40g/L亚硝酸钠溶液 亚硝酸钠 4g 蒸馏水 100ml 配制后置4保存应用液:甲液1份、乙液1份混合,褪至无色即可使用6.4.3 0.067mol/L磷酸盐缓冲液(PH6.3)6.4.4 基质液:6.4.4.1吸取10l丁酸萘酚溶液于小试管内,加入0.5ml乙二醇单甲醚混匀6.4.4.2加入9.4ml缓冲液(PH6.3),再加入0.1ml六偶氮付品红应用液 仪器:显微镜 操作步骤;8.1 新鲜涂片冷固定液固定30秒8.2 水洗待干8.3 进入基质液,在37水温箱内孵育1小时8.4 流水冲洗干净8.5 用苏木素复染1-2分钟 线性范围:无10. 参考范围:用油镜观察,胞浆内出现灰褐色为阳性反应。11 临床意义:单核系细胞为阳性反应。12. 病人准备标本要求:采取病人骨髓液涂片13 注意事项:13.1 标本新鲜13.2 染色时间要充分。13.3 冲洗要
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