2023年最新的还原糖是什么7篇

1、第 PAGE43 页 共 NUMPAGES43 页2023年最新的还原糖是什么7篇1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理 2、学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用 二、实验原理 还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(还原糖以葡萄糖含量计)。 还原糖在碱性条件下加热可被氧化成糖酸及其它产物，而氧

2、化剂3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以系数0.9。 3、实验材料和试剂 1、实验材料 面粉 2、实验试剂 1mg/ml葡萄糖标准液 3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂 碘-碘化钾溶液： 酚酞指示剂： 6M HCl和6M NaOH 四 、 实验器材 具塞玻璃刻度试管，50ml离心管，100ml烧杯，100ml三角瓶，100ml容量瓶

3、，移液管：1ml；2ml；10ml，恒温水浴锅， 离心机，天平，分光光度计。 5、操作步骤 1、制作葡萄糖标准曲线 取7支具塞刻度试管编号，按表1分别加入浓度为1mg/ml的葡萄糖标准液、蒸馏水和DNS试剂，配成不同浓度的葡萄糖反应液。 将各管摇匀，在沸水浴中准确加热5min取出，冷却至室温，用蒸馏水补足至10ml，加塞后颠倒混匀，在分光光度计上进行比色。调波长540nm，用0号管调零点，分别测出16号管的光密度值。以光密度值为纵坐标，葡萄糖含量(mg)为横坐标，在坐标纸上绘出标准曲线。 2、样品中还原糖和总糖的测定 还原糖的提取 准确称取2.00g食用面粉，放入100ml烧杯中，先用少量蒸馏

4、水调成糊状，然后补足至50ml蒸馏水，搅匀，置50恒温水浴中保温20min，使还原糖浸出。，将浸出液用塞棉花的长颈漏斗过滤，沉淀可用20ml蒸馏水洗一次，将过滤的溶液收集在100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，混匀，作为还原糖待测液。 总糖的水解和提取 准确称取1.00g食用面粉，放入100ml三角瓶中，加15ml蒸馏水及10ml 6M HCl，置沸水浴中加热水解30min(水解是否完全可用碘-碘化钾溶液检查)。待三角瓶中的水解液冷却后，加入1滴酚酞指示剂，用6mol/l NaOH中和至微红色，用蒸馏水定容在100ml容量瓶中，混匀。将定容后的水解液过滤，取滤液10ml，移入另一100ml容

5、量瓶中定容，混匀，作为总糖待测液。 6、实验数据 第一天葡萄糖标准曲线的测定 还原糖的测定 第二天葡萄糖标准曲线的测定 总糖的测定 7、结果与计算 计算出7、8号管光密度值的平均值和9、10管光密度值的平均值，在标准曲线上分别查出相应的还原糖毫克数，按下式计算出样品中还原糖和总糖的百分含量。 8、注意 1.标准曲线制作与样品测定应同时进行显色，并使用同一空白调零点和比色。 2.实验分两次进行，每次都要重新测定并绘制标准曲线。 思考题 1、3,5-二硝基水杨酸比色法是如何对总糖进行测定的 通过测定波长为540nm处“标准葡萄糖浓度梯度的吸光度”和样品溶液的吸光度，绘制标准曲线，查对标准曲线并计算

6、，便可求得样品中还原糖的含量。 3，5二硝基水杨酸，3,5-Dinitrosalicylic acid ，简称DNS。在碱性条件下，还原糖与3,5-二硝基水杨酸共热，3,5-二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质)，还原糖则被氧化成糖酸及其它产物。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度量呈一定的比例关系，在540nm波长下测定棕红色物质的吸光值，查对标准曲线可求出样品中还原糖的含量 2、如何正确绘制和使用标准曲线 标准曲线应在坐标纸上绘制，横坐标轴距坐标纸底边1.52cm，标示出刻度和葡萄糖的毫克数；纵坐标轴距坐标纸左边1.52cm，标示刻度和光密度值；曲线为过原

7、点的直线，测定点均匀分布在直线的两侧；标准曲线只能在测试条件完全相同的情况下，用于确定样品中的物质含量。对于重复的测定，应取吸光度的平均值查标准曲线；测定数据不应记在标准曲线上。 还原糖是什么(2) 牛奶中还原糖的测定(实验) 1、实训内容 采用直接滴定法测定牛奶中还原糖 2、实训目的 1、通过本实验了解牛奶中还原糖的测定方法 2、通过本实验了解原理及操作要点 3、仪器和用具 150mL三角瓶、匹配的胶塞、25mL酸式滴定管、电炉、移液管 4、试剂 碱性酒石酸铜甲液:称取15g硫酸铜及0.05g亚甲基蓝，溶于水中，并稀释至1000mL； 碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠、75g氢氧化钠，

8、溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL，储存于橡胶塞玻璃瓶中 乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3mL冰醋酸，加水溶解，并稀释至100mL 亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解，并稀释至100mL 葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g至962干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解，并以水稀释至1000mL，充分摇匀。此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖 5、步骤 1.样品处理：准确量取25ml牛奶加50ml水溶解，加入10ml乙酸锌和10ml亚铁氰化钾溶液加水至刻度，定容至250mL容量瓶，摇匀备用 2.标定碱性酒石酸铜溶液 1）吸取5ml碱性酒石酸铜甲液及5m

9、l乙液，置150ml三角锥形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2粒 2）滴定管滴加9ml葡萄糖标液，摇匀，置电炉上加热至沸（2min内沸腾） 3）趁热以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖或其他还原糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好退去，显示淡黄色即为终点，记录消耗葡萄糖总体积 4）同时平行操作3份，取平均值，计算每10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量m1 M1=v M110ml碱性酒石酸铜溶液（甲液乙液各5ml）相当于葡萄糖的质量，mg 某种还原糖标准溶液的浓度，mg/mL V标定时消耗某种还原糖标准溶液的总体积，mL 3.样品溶液预滴定 1）吸取5mL碱性酒石酸铜甲液和5mL乙液，置于150mL三角

10、锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，摇匀 2）在电路上加热至沸（2min内），趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好退去为终点，记录样品溶液消耗体积 3）样液中还原糖浓度过高时应适当稀释再进行测定，使每次滴定消耗样液的体积控制在与标定碱性酒石酸铜溶液时所消耗的还原糖标准溶液的体积相近，约在10mL左右，记录消耗样液的总体积，作为正式滴定参考用 4.样品溶液的测定 1）吸取5mL碱性酒石酸铜甲液及5mL乙液，置150mL三角锥瓶，加水10mL，加入玻璃珠2粒 2）从滴定管加入比预测定体积少1mL的样品溶液至三

11、角锥瓶，摇匀，同上法滴定至终点 3）同法平行操作3份，得到平均消耗体积 5.结果计算 M1 100 X= m2v/2501000 式中，x试样中还原糖的含量，g/100g M110mL碱性酒石酸铜溶液相当于某种还原糖的质量，mg M2样品的质量，g V测定时平均消耗样品溶液的体积，mL 250样品溶液的总体积，mL 需配制的溶液 碱性酒石酸铜甲液:称取15g硫酸铜及0.05g亚甲基蓝，溶于水中，并稀释至1000mL； 碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠、75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL，储存于橡胶塞玻璃瓶中 乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌

12、，加3mL冰醋酸，加水溶解，并稀释至100mL 亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解，并稀释至100mL 葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g至962干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解，并以水稀释至1000mL，充分摇匀。此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖 准备的仪器 三角瓶150ml（11*3） 50mL酸式滴定管（11） 电炉（11） 移液管（25ml、5ml、10ml各11） 量筒（50ml，11） 玻璃珠（22） 容量瓶（11） 实验原理 首先将5ml的碱性酒石酸铜甲液、乙液等量混合，我们看到的现象是什么？立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的

13、可溶性酒石酸钾钠铜配合物。然后，在电炉上迅速加热两分钟内沸腾，以亚甲基蓝作为指示剂，先用还原糖进行标定，还原糖与酒石酸钾钠铜反应生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖将甲基蓝还原，滴定终点的颜色变化是蓝色刚好退去，溶液出现浅黄色，平行操作三次，记录消耗葡萄糖标准溶液的体积，计算10ml碱性酒石酸铜溶液相当于某种还原糖的质量。然后，再用同样的方法进行标定样液，记录样品溶液消耗的体积。在标定样品溶液之前，我们要先做一个预标定，以更好地确定滴定终点，同样平行测定三次，根据消耗样品的平均值来计算牛奶中还原糖的含量 还原糖是什么(3) 实验一 还原糖和总糖含量的测定 原理 3，5-

14、二硝基水杨酸溶液与还原糖溶液共热后被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范实验围内还原糖的量和棕红色物质颜色深浅的程度成一定比例关系，可用比色测定。操作简便，快速，杂质干扰较少。 实验方法 一 葡萄糖标准曲线的制定 葡萄糖标准曲线的制定：准确称取100mg分析纯的无水葡萄糖（预先在105干燥至恒重），用少量蒸馏水溶解后，定量转移至100mL容量瓶中，再定容至刻度，摇匀。浓度为1mg/Ml。 取9支25mm250mm的试管，分别按下表加入试剂：（ml） 项 目 0 1 2 3 4 5 6 7 8 G标液 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 G的量 0 0.2 0.4

15、0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 H2O 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 0.6 0.4 3，5-二硝基水杨酸 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 将各管溶液混合均匀,在沸水浴中加热5分钟,取出后立即用冷水冷却到室温,再向每管加入21.5mL蒸馏水,摇匀。于520nm波长处测A值。以葡萄糖mg数为横坐标，光吸收值为纵坐标，绘制标准曲线。 二 样品中总糖和还原糖含量的测定 以测定山芋中总糖和还原糖含量为例。 1样品中还原糖的提取：准确称取2g山芋粉，放在100mL烧杯中，先以少量水调成糊状，然后加工50-60mL蒸馏水，于

16、50oC恒温水浴中保温20分钟，过滤，将滤液收集在100mL容量瓶中，再定容至100mL。 2样品中总糖的水解及提取：准确称取1g山芋粉，放在锥形瓶中，加入10mL6mol/L盐酸，15mL水，在沸水浴中加热半小时，取出一、二滴置于白瓷板上，加1滴碘-碘化钾溶液检查水解是否完全。如已水解完全，则不呈蓝色。冷却后加1滴酚酞指示剂，以10%氢氧化钠溶液中和至溶液呈微红色，过滤并定容到100mL。再精确吸取上述溶液10mL于100mL容量瓶中，定容到刻度，混匀备用。 3样品中糖含量的测定：取7支队5mm250mm试管分别按下表加入试剂： 项目 空白 还原糖 总糖 0 1 2 3 4 5 6 样液ml

17、 H2Oml 3，5-二硝基水杨酸 0 2 1.5 1.0 1.0 1.5 1.0 1.0 1.5 1.0 1.0 1.5 1.0 1.0 1.5 1.0 1.0 1.5 1.0 1.0 1.5 加完试剂后，其余操作均与制作标准曲线时相同。测定后，取样品的A平均值在标准曲线上查出相应的糖量。用下式计算出山竽粉中还原糖与总糖的百分含量。 数据处理推荐同学们用origin软件处理！ 最小二乘法求标准曲线方程的公式： X：G的浓度（gmL）Y：吸光度AT 本实验要求相关系数r0.99 还原糖是什么(4) 检测还原糖 实验目的：学习检测还原糖 实验原理：斐林试剂是新配制的溶液，它在加热条件下与醛基反应

18、，被还原成砖红色的沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色棕色砖红色（沉淀）。 试剂及材料：苹果，研钵及研杵，试管若干，试管架，试管夹，烧杯，小量筒，滴管，酒精灯，三脚架，石棉网，火柴；斐林试剂NaOH ，CuSO4粉末，蒸馏水 实验步骤：1.研磨苹果获得滤液待用 2.配制斐林试剂：甲液：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液，乙液：质量浓度为0.05g/ml的CuSO4溶液 3取六支试管编号按下表添加试剂 试管号 1 2 3 4 5 葡萄糖 0 2ml样品 2ml 2ml 2ml 斐林试剂 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 蒸馏水

19、2ml 0 0 0 0 葡萄糖浓度 0 待测 0.01 0.1 1 颜色变化 淡蓝色-砖红色沉淀 浅橙色 深橙色 橙色 砖红色 4按最接近颜色试管浓度重新配浓度梯度 试管号 1 2 3 4 葡萄糖 2ml 2ml 2ml 2ml 斐林试剂 1ml 1ml 1ml 1ml 蒸馏水 0 0 0 0 葡萄糖浓度 待测 0.05 0.1 0.5 颜色变化 浅橙色 浅绿 茶色 浅橙色 5.探究： 试管号 1 2 葡萄糖 2ml 2ml 斐林试剂 先加入A液，后加入B液 1ml 水浴温度 55-60 5580 颜色变化 橙色 褐色 实验结果： 讨论： 1不足之处，制备苹果匀浆时，样品过多，研磨时间过长组织

20、中氧化酶将一部分组织氧化，影响实验结果：滴管在使用过程中造成了交叉污染，此外滴管和量筒的精度太低很难达到定量研究。 2.在实验之前葡萄糖的浓度梯度没有把握好 3.检测苹果中还原糖应出现的颜色变化为浅蓝色棕色砖红色沉淀。而本实验样品中都出现棕色，而混有葡萄糖杂质的对照组却出现了砖红色沉淀。说明组织还原糖浓度还须稀释，此外组织中被氧化的物质与生成的砖红色沉淀混合也会干扰实验结果。 还原糖是什么(5) 还原糖检测注意事项 1.费林试剂甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。 2.滴定必须是在沸腾条件下进行，其原因一是加快

21、还原糖与Cu2的反应速度；二是亚甲基蓝的变色反应是可逆的，还原型的亚甲基蓝遇空气中的氧时会再被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被空气中的氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进入，避免亚甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加消耗量。 3.滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液中。 4.本方法测定的是一类具有还原性质的糖，包括葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等，只是结果用葡萄糖或其他转化糖的方式表示，所以不能误解为还原糖=葡萄糖或其他糖。但如果已知样品中只含有某一种糖，如乳制品中的乳糖，则可以认为还原糖=某糖。 5.分别用葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖标准品配制标准

22、溶液分别滴定等量已标定的费林氏液，所消耗标准溶液的体积有所不同。证明即便同是还原糖，在物化性质上仍有所差别，所以还原糖的结果只是反映样品整体情况，并不完全等于各还原糖含量之和。如果已知样品只含有某种还原糖，则应以该还原糖做标准品，结果为该还原糖的含量。如果样品中还原糖的成分未知，或为多种还原糖的混合物，则以某种还原糖做标准品，结果以该还原糖计，但不代表该糖的真实含量。 6.乙酸锌可去除蛋白质、鞣质、树脂等，使它们形成沉淀，经过滤除去。如果钙离子过多时，易与葡萄糖、果糖生成络合物，使滴定速度缓慢；从而结果偏低，可向样品中加入草酸粉，与钙结合，形成沉淀并过滤。）A、裵林试剂的最终标定及样品的最终滴

23、定在1 min内完成. 7.配制葡萄糖标准溶液应非常准确.一定控制好滴定速度.每班测定一次C标，将浓度值填写在记录表格中。滴定终点则为兰色褪去出现明亮颜色（如亮红亮黄色） 8、碱性酒石酸铜甲液中的硫酸铜的铜离子为此化学反应定量的标物，次甲基兰为氧化还原指示剂（氧化型为蓝色、还原型为无色） 9、此实验为什么要在碱性条件下进行，主要是在酸性条件下，还原糖会形成酯（不具有氧化性或氧化性不强的含氧酸如乙酸）、有机酸（如被硝酸氧化），样液中的二糖及多糖与淀粉会水解成还原糖，结果可想而知。 10、碱性酒石酸铜乙液中的酒石酸钾钠的作用：既然实验得在碱性条件下进行，那么硫酸铜遇碱生成氢氧化铜沉淀后，不能使实验

24、正常进行，必需使其（铜离子）在可溶状态下才行，酒石酸钾钠与铜离子络合就达到了目的。 11、影响实验结果的主要因素为： a)反应液碱度：碱度越高，反应速度越快，样液消耗也越多，故样品测定时样液的滴定体积要与标准相近，原理在此，这样误差要小。 b)锥形瓶规格：不同体积的锥形瓶会致使加热的面积及样液的厚度有变化，同时瓶壁的厚度不同影响传热速率，故有时甚至是同一规格但不同批的锥形瓶也会引起误差。 c)加热功率：加热的目的一是加快反应速度，二是防止次甲基兰与滴定过程中形成的氧化亚铜被氧气氧化，使结果偏高。加热功率不同，样液沸腾时间不同，时间短样液消耗多，同时反应液蒸发速度不同，即时碱度的变化也就不同，故

25、实验的平行性也就受影响。 d)滴定速度：滴定速度越快，样液消耗也越多，结果会偏低。 12、滴定终点有时不显无色而显暗红色，是由于样液中亚铁氰化钾量不够，不能有效络合氧化亚铜成无色的原故。故可在反应液中适量添加亚铁氰化钾，标准与样液添加量一样。 13.滴定点是在静止加热沸腾中的颜色瞬间变化，如果人为摇晃会造成额外氧化反应的叠加，造成滴定量加大，结果漂高。用同一型号的滴定锥形瓶作空白，即可避免加热不均造成的热量差异。 14、碱性酒石酸铜甲液中的硫酸铜的铜离子为此化学反应定量的标物，次甲基兰为氧化还原指示剂（氧化型为蓝色、还原型为无色）1。 、滴定速度要保持均衡一致，速度每12秒一滴为好（速度不要受

26、滴定时间的长短而改变） 、空白滴定和样品滴定一定要保证预加标准糖液量与最终数值差0.50.7mL（最好0.5mL）比如空白测定是22mL，再滴空白时标准糖液预加入到21.5mL。如果这个空白又滴成了22.3mL，则下次空白滴定就预加到21.8mL，样品检测也依此类推。 、电炉的温度对检测结果也有影响，所以要保证电炉充分预热，同时三角瓶在电炉上的放置位置要保持一致。 、测定时液体沸腾后的开始滴定的时间也要保持一致，一般等液体充分沸腾后开始滴定。 、滴定终点的判断也要保持一致。一般等液面半边变透明为滴定终点。 、糖液稀释及取样也要注意精确，注意吸管正确使用方法。 、折光糖度精心检测，依此数据辅导还

27、原糖的检测。 、注意输液胶管漏液、变形，滴定管尖端气泡等对检测数值的影响。 、三角瓶使用后清洗干净。 样品检测注意加水体积，加水量为滴定数与空白数之差，使样品检测总体积与空白滴定总体积大致相等 还原糖是什么(6) 食品中还原糖的测定方法 食物中还原糖的测定方法：高锰酸钾滴定法和直接滴定法。 一、高锰酸钾滴定法 1.原理 样品经除去蛋白质后，其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐，以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量，再查表得还原糖量。 2.适用范围 GB5009.7-85，本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水

28、解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。 3.仪器 （1） 滴定管 （2） 25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚 （3） 真空泵 （4） 水浴锅 4.试剂 除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。 4.1 6 mol/L盐酸：量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。 4.2 甲基红指示剂：称取10mg甲基红，用100ml乙醇溶解。 4.3 5 mol/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。 4.4 碱性酒石酸铜甲液：称取34.639g 硫酸铜（CuSO45H2O），加适量水溶解，加0.5ml硫酸，再加水稀释至500ml，用精制石棉过滤。 4.5 碱性酒石酸铜乙液

29、：称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。 4.6 精制石棉：取石棉先用3mol/L盐酸浸泡23天，用水洗净，再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡23天，倾去溶液，再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时，用水洗净。再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。然后加水振摇，使成微细的浆状软县委，用水浸泡并贮存于玻璃瓶中，即可用做填充古氏坩埚用。 4.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。 4.8 1mol/L氢氧化钠溶液：称取4g 氢氧化钠，加水溶解并稀释至100ml。 4.9 硫酸铁溶液：称取50g硫酸铁，加入2

30、00ml水溶解后，慢慢加入100ml硫酸，冷却后加水稀释至1L。 4.10 3mol/L盐酸：量取30ml盐酸，加水稀释至120ml。 5. 操作方法 5.1 样品处理： 5.1.1 乳类、乳制品及含蛋白质的食品：称取约0.52 g固体样品（吸取210 ml液体样品），置于250 ml容量瓶中，加50 ml水，摇匀。加入10 ml碱性酒石酸铜甲液及4 ml1mol/L氢氧化钠溶液，加水至刻度，混匀。静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。（注：此步骤目的是沉淀蛋白） 5.1.2 酒精性饮料：吸取100 ml样品，置于蒸发皿中，用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至

31、原体积1/4后（注：如果蒸发时间过长，应注意保持溶液pH为中性），移入250 ml容量瓶中。加50 ml水，混匀。以下按5.1.1自加10ml碱性酒石酸铜甲液起依法操作。 5.1.3 含多量淀粉的食品：称取210 g样品，置于250 ml容量瓶中，加200 ml水，在45水浴中加热1 h，并时时振摇。（注意：此步骤是使还原糖溶于水中，切忌温度过高，因为淀粉在高温条件下可糊化、水解，影响检测结果。）冷却后加水至刻度，混匀，静置。吸取200 ml上清液于另一250 ml容量瓶中，以下按5.1.1自加10ml碱性酒石酸铜甲液起依法操作。 5.1.4 含有脂肪的食品：称取210 g样品，先用乙醚或石油

32、醚淋洗3次，去除醚层。加入50ml水混匀，以下按5.1.1自加10ml碱性酒石酸铜甲液起依法操作。 5.1.5 汽水等含有二氧化碳的饮料：吸取100 ml样品置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移入250 ml容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀后，备用。 5.2 样品测定： 吸取50ml处理后的样品溶液，于400ml烧杯中，加入25ml碱性酒石酸铜甲液及25ml乙液，于烧杯上盖一表面皿，加热，控制在4min内沸腾，再准确煮沸2min，乘热用铺好石棉的古氏坩埚或G4垂融坩埚抽滤，并用60热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不成碱性为止。（注：还原糖与碱性酒石酸铜试剂的反应一

33、定要在沸腾状态下进行，沸腾时间需严格控制。煮沸的溶液应保持蓝色，如果蓝色消失，说明还原糖含量过高，应将样品溶液稀释后重做。）将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400ml烧杯中，加25 ml硫酸铁溶液及25ml水，用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解，以0.1mol/L高锰酸钾标准液滴定至微红色为终点。 同时吸取50ml水，加与测样品时相同量的碱性酒石酸铜甲、乙液，硫酸铁溶液及水，按同一方法做试剂空白实验。 6. 计算： X1=（V-V0）N71.54 （1） 式中： X1-样品中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量，mg； V-测定用样品液消耗高锰酸钾标准液的体积，ml； V0-试剂空白消耗高锰酸钾标准液的体积，m

34、l； N-高锰酸钾标准溶液的浓度； 71.54-1ml 1mol/L高锰酸钾溶液相当于氧化亚铜的质量，mg。 根据（1）式中计算所得氧化亚铜质量，查附表氧化亚铜质量相当于葡萄糖、果糖、乳糖、转化糖的质量表，再计算样品中还原糖含量。 X2=（m1V2）（m2V1）（1001000） (2) 式中： X2-样品中还原糖的含量，g/100g（g/100ml）； m1-查表得还原糖质量，mg； m2-样品质量（或体积）， g（ml）； V1-测定用样品处理液的体积，ml； V2-样品处理后的总体积，ml。 7.举例： 称取某食物样品3.00g，经过处理后用水定容至250ml。取50ml进行测定，消耗0

35、.1003 mol/L高锰酸钾标准液5.20ml，同时测试剂空白为0.36ml，则样品中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量为： X1（mg） =（5.20-0.36）0.100371.54 = 34.73 查表得还原糖质量为相当于葡萄糖16.22 mg， 样品中还原糖含量（以葡萄糖计）为： X2（g/100g）=（16.22250）（3.0050）（1001000）= 2.70 8.注释： 本法用碱性酒石酸铜溶液作为氧化剂。由于硫酸铜与氢氧化钠反应可生成氢氧化铜沉淀，氢氧化铜沉淀可被酒石酸钾钠缓慢还原，析出少量氧化亚铜沉淀，使氧化亚铜计量发生误差，所以甲、乙试剂要分别配制及贮藏，用时等量混合。 二

36、、直接滴定法 1.原理 样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液，费林氏液被还原析出氧化亚铜后，过量的还原糖立即将次甲基蓝还原，使蓝色褪色。根据样品消耗体积，计算还原糖量。 2.适用范围 GB5009.7-85，本方法适用于所有食品中还原糖的检测。检出限0.1mg。 3.主要仪器 滴定管 4.试剂 除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。 （1） 费林甲液：称取15 g硫酸铜（CuSO45H2O），及0.05 g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1 L。 （2） 费林乙液：称取50 g酒石酸钾钠与75 g氢氧化钠，溶于水中，再加入4 g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至500

37、 ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。 （3） 乙酸锌溶液：称取21.9 g乙酸锌，加3 ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100 ml。 （4）亚铁氰化钾溶液。称取10.6g亚铁氰化钾，用水溶解并稀释至100ml。 （5） 盐酸。 （6） 葡萄糖标准溶液：精密称取1.000 g经过80 干燥至恒量的葡萄糖（纯度在99%以上），加水溶解后加入5 ml盐酸，并以水稀释至1 L。此溶液相当于1 mg/ml葡萄糖。（注：加盐酸的目的是防腐，标准溶液也可用饱和苯甲酸溶液配制） 5.操作方法 5.1样品处理： 5.1.1乳类、乳制品及含蛋白质的食品：称取约0.52 g固体样品（吸取210 ml液体样品），置于100

38、ml容量瓶中，加50 ml水，摇匀。边摇边慢慢加入5 ml乙酸锌溶液及5 ml亚铁氢化钾溶液，加水至刻度，混匀。静置30 min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。（注意：乙酸锌可去除蛋白质、鞣质、树脂等，使它们形成沉淀，经过滤除去。如果钙离子过多时，易与葡萄糖、果糖生成络合物，使滴定速度缓慢；从而结果偏低，可向样品中加入草酸粉，与钙结合，形成沉淀并过滤。） 5.1.2酒精性饮料：吸取50 ml样品，置于蒸发皿中，用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积1/4后，移入100 ml容量瓶中。加25 ml水，混匀。以下按4.1.1自加5 ml乙酸锌溶液起依法操作。 5.1.

39、3含多量淀粉的食品：称取25 g样品，置于100 ml容量瓶中，加50 ml水，在45水浴中加热1 h，并时时振摇（注意：此步骤是使还原糖溶于水中，切忌温度过高，因为淀粉在高温条件下可糊化、水解，影响检测结果。）。冷后加水至刻度，混匀，静置。吸取50 ml上清液于另一100 ml容量瓶中，以下按4.1.1自5 ml乙酸锌溶液起依法操作。 5.1.4汽水等含有二氧化碳的饮料：吸取50 ml样品置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移入100 ml容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀后，备用。 （注意：样品中稀释的还原糖最终浓度应接近于葡萄糖标准液的浓度。） 5. 2标

40、定费林氏液溶液：吸取5.0 ml费林氏甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中（注意：甲液与乙液混合可生成氧化亚铜沉淀，应将甲液加入乙液，使开始生成的氧化亚铜沉淀重溶），加水10 ml，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9 ml葡萄糖标准溶液，控制在2 min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液兰色刚好褪去并出现淡黄色为终点，记录消耗的葡萄糖标准溶液总体积，平行操作三份，取其平均值，计算每10 ml（甲、乙液各5 ml）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）。（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，

41、并且避免滴定时间过长。） 5.3样品溶液预测：吸取5.0 ml费林氏甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，控制在2 min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每秒1滴的速度滴定，直至溶液兰色褪去，出现亮黄色为终点。如果样品液颜色较深，滴定终点则为兰色褪去出现明亮颜色（如亮红），记录消耗样液的总体积。（注意：如果滴定液的颜色变浅后复又变深，说明滴定过量，需重新滴定。） 5.4样品溶液测定：吸取5.0 ml碱性酒石酸铜甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠

42、2粒，在2 min内加热至沸，快速从滴定管中滴加比预测体积少1 ml的样品溶液，然后趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定直至终点。记录消耗样液的总体积，同法平行操作两至三份，得出平均消耗体积。 6.计算 X3 =（Cv1 V）（m v2 1000）100 式中： X-样品中还原糖的含量(以葡萄糖计)，%； C-葡萄糖标准溶液的浓度，mg/ml； v1- 滴定10 ml费林氏溶液（甲、乙液各5 ml）消耗葡萄糖标准溶液的体积，ml； v2-测定时平均消耗样品溶液的体积，ml； V-样品定容体积，ml； m-样品质量，g； 7.注意事项 （1） 本方法测定的是一类具有还原性质的糖，包括葡萄糖、果糖、乳糖

43、、麦芽糖等，只是结果用葡萄糖或其他转化糖的方式表示，所以不能误解为还原糖=葡萄糖或其他糖。但如果已知样品中只含有某一种糖，如乳制品中的乳糖，则可以认为还原糖=某糖。 （2）分别用葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖标准品配制标准溶液分别滴定等量已标定的费林氏液，所消耗标准溶液的体积有所不同。证明即便同是还原糖，在物化性质上仍有所差别，所以还原糖的结果只是反映样品整体情况，并不完全等于各还原糖含量之和。如果已知样品只含有某种还原糖，则应以该还原糖做标准品，结果为该还原糖的含量。如果样品中还原糖的成分未知，或为多种还原糖的混合物，则以某种还原糖做标准品，结果以该还原糖计，但不代表该糖的真实含量。 还原糖是什

44、么(7) GB 551385 本标准适用于商品粮食中还原糖和非还原糖含量的测定。其中铁氰化钾法主要适用于小麦粉。 1 还原糖测定 1.1 铁氰化钾法 1.1.1 仪器和用具 磨口带塞锥形瓶：100 ml； 量筒：50 ml、25 ml； 移液管：5 ml； 玻璃漏斗； 试管：直径1.82.0 cm，高约18 cm； 铝锅：作沸水浴用； 电炉：2023 W； 铁丝笼：放置试管用； 试管架； 锥形瓶：100 ml； 微量滴定管：5 ml或10 ml（刻度0.02 ml）； 分析天平：感量0.0001 g。 1.1.2 试剂 95乙醇； 乙酸缓冲液：3 ml冰乙酸、6.8 g乙酸钠和比重1.84的硫酸4.5 ml，混合后用水稀释至1000 ml； 12钨酸钠溶液：12 g钨酸钠Na2WO42H2O溶于100 ml水中； 0.1 N铁