高效液相色谱法测定大黄虫丸中芍药苷的含量

1、高效液相色谱法测定大黄虫丸中芍药苷的含量【摘要】目的建立高效液相色谱法测定大黄虫丸中芍药苷含量的方法。方法采用HypersilDS2柱4.62505；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液1585；柱温30；检测波长230n。结果芍药苷线性范围0.121.08g，平均回收率=98.78%，RSD=1.35%。结论该方法简便、可靠、准确，可用于该制剂中白芍的质量控制。【关键词】大黄虫丸芍药苷高效液相色谱法Abstrat：bjetiveTestablishaethdfrdeterinatinfPaeniflrininDahuangZhehngPill.ethdsAnHPLethdasdevelpedand

2、theHypersilDS2lun4.62505asused.Thebilephaseasaetnitrile-0.1%rthphsphriaid(1585).Thedetetinavelengthasat230nandthelunteperatureas25.ResultsThereasagdlinearrrelatinshipintherangef0.121.08g,theaveragereveryas98.78%,RSD=1.35%.nlusinTheethdisnvenient,reliableandaurate.ItissuitablefrdeterinatinfthententfP

3、aeniflrininDahuangZhehngPill.Keyrds：DahuangZhehngPill;Paeniflrin;HPL大黄虫丸收载于?中国药典?2022年版部1，主要由熟大黄、土鳖虫、水蛭、桃仁、白芍、黄芩等12味中药组成，成效活血化淤，通经消癥。用于瘀血内停而致腹部肿块、肌肤甲错、经闭不行等，临床疗效确切。但原药为蜜丸，剂型落后，本实验拟对其进展二次开发，原方中药味较多，?中国药典?含量测定只对方中熟大黄中大黄素进展了含量测定，对用量较大的白芍未进展定量，实验采用高效液相色谱法建立了该药中芍药苷的含量测定方法，为进一步开发该制剂打下基矗1器材1.1仪器AngilentHP1

4、100高效液相色谱仪；G1314A紫外检测器；KQ-500DE型超声仪。1.2药品大黄虫丸广东阳江制药厂，批号051104，051218，060320；阴性样品自制。1.3试剂及材料芍药苷对照品批号中国药品生物制品检定所，批号0715-200211；高效液相使用乙腈为色谱纯，水为高纯水；其余试剂均为分析纯。2方法2.1含量测定色谱条件色谱柱为AngilentHypersilDS2柱4.6250，5；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液15:85；柱温30；流速1.0l/in；检测波长230n；进样量10l。2.2对照品溶液的制备精细称芍药苷对照品适量，加甲醇制成每毫升含0.6g的溶液，作为对照品贮备

5、液。2.3标准曲线的绘制分别精细汲取对照品贮备液0.2，0.6，1.0，1.4，1.8l置10l量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，备用。各精细汲取10l注入液相色谱仪中，测定，测得峰面积，以对照品进样量为横坐标，吸光度为纵坐标做标准曲线，线性范围为0.121.08g，回归方程Y=941.6X+6.2919，r=0.9999。2.4供试品溶液的制备取本品，研细，取约1g，精细称定，置具塞锥形瓶中，精细加甲醇50l，称定重量，超声功率250，频率40kHz，40处理40in，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精细量取续滤液10l，通过氧化铝-活性炭柱(中性氧化铝3g，湿法装柱，上覆

6、层析用活性炭1g，甲醇预洗)，用甲醇50l洗脱，搜集洗脱液，水浴浓缩至适量，转移至10l量瓶中，并加甲醇稀释至刻度，摇匀，以微孔滤膜0.45滤过，作为供试品液。HPL图谱见图1。2.5阴性实验按处方比例，制得缺白芍制剂，按供试品项下方法制备阴性样品，进展高效液相测定，证明阴性无干扰。2.6精细度实验取芍药苷对照品溶液60.8g/l，重复进样5次，测得峰面积分别为580.27545，580.94385，583.23654，582.19873，583.49573，RSD=0.24%,说明仪器精细度良好。2.7稳定性实验取供试品溶液批号051104，每隔2h进样测定1次，共进样6次，测得芍药苷的峰面

7、积值分别为345.85455，348.25948，351.16549，347.02654，349.98742，346.14215。RSD=0.62%，说明样品溶液在10h内测定稳定。2.8重复性实验取样品批号0511045份，按供试品制备项下分别提取，精制，测定，芍药苷含量分别为1.8026，1.8374，1.8244，1.8149，1.7886(g/g)，RSD=1.04%，说明实验重复性良好。2.9加样回收率实验取样品批号0511045份，分别参加芍药苷对照品适量，按样品制备项下方法制备。结果见表1。表1芍药苷加样回收率实验结果略2.10样品测定分别取3批样品，按供试品溶液制备项下制备供试

8、品，分别进样，测定即得。测定结果见表2。表2不同批次样品中芍药苷的含量测定结果略?中国药典?2022年版部中白芍药材中芍药苷含量不得少于1.6%，推算得知大黄虫丸中芍药苷含量应不得少于1.44g/g，因此以上3批样品含量均合格，二次开发制剂中芍药苷的含量应以此为根据。3讨论原方中药味较多，直接使用溶剂提取进展液相测定干扰较大，因此实验考察了供试品制备方法中提取溶剂甲醇，稀乙醇、提取方法回流、超声、提取时间20，40，60in、过柱上样量、洗脱量的条件，结果以正文所述方法最好，样品可以到达较好的别离。试比拟了3种流动相2：甲醇-水-冰醋酸49501；乙腈-0.1%磷酸溶液1585；乙腈-水(1387)，结果以流动相别离效果最好，应选择流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液1585。该含量测定方法简便，快速，重现性好，既可以为进一步开