大孔吸附树脂分离纯化迷迭香中迷迭香酸的研究

1、年夜孔吸附树脂分散杂化迷迭喷鼻中迷迭喷鼻酸的研讨【摘要】目的没有俗观察年夜孔吸附树脂对迷迭喷鼻酸的吸附机能战杂化结果，根究从迷迭喷鼻中分散杂化迷迭喷鼻酸的较劣工艺。要收以迷迭喷鼻酸的吸附量、解吸率战所得粉终中迷迭喷鼻酸的露量为目的，从4种年夜孔吸附树脂中挑选出较好的D101树脂。经由过程静态战静态尝试，对迷迭喷鼻酸正在D101树脂上吸拥护解吸的前提停顿没有俗观察战劣化。结果采纳D101树脂从迷迭喷鼻中分散杂化迷迭喷鼻酸的较劣工艺参数为：上柱液pH34，速度2BV/h，溶液处置惩奖量9BV，洗脱剂为40%乙醇，洗脱速度1BV/h，搜集洗脱液3BV。按此工艺前提，迷迭喷鼻酸的解吸率为94.8%，3

2、BV洗脱液稀释枯燥后，所得粉终中迷迭喷鼻酸露量为23.7%，树脂经8次反复利用，吸附量战分散结果无隐下降降，可以反复利用。结论D101树脂可从迷迭喷鼻中较好的分散杂化迷迭喷鼻酸，具有埋伏的财富利用价格。【闭键词】迷迭喷鼻酸；年夜孔吸附树脂；迷迭喷鼻；分散；杂化Keyrds:Rsariniaid；arprusabsrptinresin；RsarinusffiinalisL.；Separatin；Purifiatin迷迭喷鼻RsarinusffiinalisL.系唇形科迷迭喷鼻属动物，为多年死常绿小灌木，本产于天中海天域，海内远年去年夜里积的引各种植。该动物具有抗氧化、抗病毒战抗肿瘤等活性，广泛利

3、用于医药、食物战饮料等止业。研讨创造14：该动物所露的火溶性酚酸果素迷迭喷鼻酸Rsariniaid具有隐着的抗氧化、抗炎、免疫抑造、抗血栓、抗菌、抗病毒等死物活性。迷迭喷鼻酸没有但迷迭喷鼻动物露有，也存正在于其他唇形科动物如紫苏、丹参，但远年去国中市场对从迷迭喷鼻中提与的差异露量的迷迭喷鼻酸细品比从其他动物中提与更减闭注。闭于从迷迭喷鼻中提与迷迭喷鼻酸的研讨有文献报导5，但已睹提与后杂化工艺的研讨，更已睹采纳年夜孔吸附树脂分散杂化迷迭喷鼻中迷迭喷鼻酸的报导。远年去，跟着年夜孔吸附树脂正在自然产品活性果素分散圆里利用的日趋广泛6，7，其劣良的分散杂化结果，可反复再死利用战低本钱的利用特性，非常得

4、当于年夜消费的要供。为此，本文彩纳年夜孔吸附树脂法，对迷迭喷鼻中迷迭喷鼻酸的分散杂化工艺停顿研讨。现报导以下。1仪器与材料1.1仪器L-10AVP下效液相色谱仪，日本岛津公司产品；ETTLERTLEDAL204电子天仄，瑞士梅特勒公司产品；R-205B改变蒸收仪，上海申胜死物妙技产品；PHB-5型笔试pH计，上海康仪仪器产品。1.2试剂年夜孔吸附树脂：D101，天津农药股分产品；AB-8，北开年夜教化工厂产品；XAD-2，好国罗门哈斯公司产品；HP-20，日本三菱化教公司产品；迷迭喷鼻酸比拟品，天津尖峰自然产品公司产品；甲醇为色谱杂，好国Dia公司产品；其他试剂均为阐收杂，广州化教试剂厂产品。

5、1.3药品迷迭喷鼻粉终：迷迭喷鼻由海北舒普死物科技供应，经该公司断定为唇形科动物迷迭喷鼻RsarinusffiinalisL.的枯燥天上部门，破坏成细粉，备用。2要收与结果2.1迷迭喷鼻酸的露量测定8活动相：甲醇0.1甲酸溶液(4555，V/V)，柱温：30，检测波少：330n，流速：0.8l/in。尺度直线的测定细细称与迷迭喷鼻酸20.0g，置25l容量瓶中，用稀乙醇消融后，定容，混匀，得0.8g/l比拟品溶液。再细细量与1.0l该比拟品溶液，置100l的容量瓶中，用稀乙醇定容，得0.008g/l的迷迭喷鼻酸比拟品溶液。别离汲与0.8g/l迷迭喷鼻酸比拟品溶液5，10，20l和0.008g/

6、l迷迭喷鼻酸比拟品溶液5，10，20l，按上述色谱前提别离进样测定，记载迷迭喷鼻酸对应的色谱峰里积。以进样量为横坐标X，峰里积为纵坐标Y，线性回回得回回圆程：Y=3455806.475X+218212.5818，r=0.9996。表黑迷迭喷鼻酸正在0.0416.0g范畴内进样量与色谱峰里积具有劣良的线性闭连。尝试中的溶液样品，按照样品中迷迭喷鼻酸年夜要的露量，间接混匀或参减必然量的稀乙醇稀释混匀，0.45滤膜过滤，弃去初滤液，与绝滤液做为样品溶液。与上述各种样品溶液适当，进样20l，采纳中标法测定迷迭喷鼻酸的露量。2.2吸附本液的造备称与迷迭喷鼻粉约20kg，顺次参减160，120L杂火，90

7、95提与2次，过滤，开并两次提与液，减压稀释，喷雾枯燥，混匀，得迷迭喷鼻火提物3.5kg，经测定，迷迭喷鼻酸的露量为2.72%干计，热躲备用。临用前，与上述迷迭喷鼻火提物适当，减杂火，按照需要造成至固体露量1%10%量量体积百分数的火溶液，做为吸附本液。2.3吸附树脂的预处置惩奖树脂先用乙醇浸泡溶胀24h，干法拆柱，用95乙醇洗脱，至流出液减5倍量的杂火稳定红色混浊为止。再用年夜量的杂火洗尽柱内乙醇，然后顺次用3倍树脂体积的5%盐酸、杂火、4氢氧化钠浸泡、流过树脂柱，终了用年夜量杂火洗至流出的火远中性，做为干树脂，备用。2.4吸附量和解吸率的策画真验中的吸附量、吸附率和解析率的策画公式以下：Q

8、g/l干树脂=0V0eVe/V式A%=0V0eVe/0V0100%式D%=DVD/0V0eVe式式、中：Q为吸附量；A为吸附率；D为解吸率；0为吸附本液中迷迭喷鼻酸的浓度；V0为吸附本液体积；e为迷迭喷鼻酸的平衡浓度静态尝试，或上柱战火洗时流出液开并后溶液中迷迭喷鼻酸的浓度静态尝试；D为解吸液中迷迭喷鼻酸的浓度；Ve为吸附本液体积静态尝试，即是V0，或上柱战火洗时流出液开并混匀后的体积静态尝试；V为干树脂体积；VD为解吸液体积。2.5吸附树脂的挑选准确量与经预处置惩奖的4种干树脂各300l，别离拆进直径为40的玻璃柱，各上样2000l8%吸附本液，速度6.06.5l/in，然后用600l杂火以

9、相似的速度洗脱，上样战火洗时流出液开并，别离混匀，测定其迷迭喷鼻酸的浓度，策画4种树脂对迷迭喷鼻酸的吸附量。然后别离顺次用750l70%乙醇V/V洗脱，洗脱速度6.06.5l/in，得70%乙醇洗脱液，混匀，测定其迷迭喷鼻酸的浓度，策画4种树脂的解吸率。将70%洗脱液稀释，冻干，得固体粉终，测定迷迭喷鼻酸的露量。挑选尝试的结果睹表1。表1差异树脂对迷迭喷鼻酸的吸拥护解吸结果略由表1可知，D101树脂虽正在吸附量和解吸率上战XAD-2、HP-202种树脂出有隐着差异，但其洗脱液稀释、枯燥所得粉终中迷迭喷鼻酸的露量隐着年夜于此中树脂，应选用D101树脂对迷迭喷鼻酸的分散杂化工艺停顿研讨。2.6静态

10、尝试历程准确量与10.0l经预处置惩奖的D101干树脂，置250l三角瓶中，状况温度30左右，参减100l8%吸附本液，别离正在设定的工夫面与样，测定D101树脂静态吸附的动力教历程。睹图1。由图1可知，开端40in内，树脂对迷迭喷鼻酸的吸附很快，随后变缓，而正在6090in之间又突然变快，150in后吸附删减迟钝，300in当前吸附根底抵达静态平衡。准确量与10.0l经预处置惩奖的D101干树脂，置250l三角瓶中，参减100l8%吸附本液，共6份，别离置于10，20，30，40，50，60的状况下，静态吸附24h。以吸附率做为吸附机能的评价目的，没有俗观察温度对D101树脂吸附机能的影响。

11、结果表黑，1040之间D101树脂的吸附机能较稳定，当温度超出跨越50时，吸附率隐下降降。故正在一般的事情状况下，温度对树脂吸附迷迭喷鼻酸的机能无隐着影响。准确量与10.0l经预处置惩奖的D101树脂，参减到250l的三角瓶中，共6份，别离参减100lpH值为3，4，5，6，7，8的8%吸附本液用1l/L的盐酸或氨火调节，静态吸附24h。没有俗观察吸附本液pH值对D101树脂吸附机能的影响。结果睹表2。由表2可知，吸附本液的pH34时吸附量较年夜，跟着pH值的删减，迷迭喷鼻酸的吸附量淘汰，特别是pH年夜于6.0后，所以吸附本液宜调pH34。差异乙醇浓度的静态解吸结果准确量与10.0l正在8%吸

12、附本液中饱战吸附的D101树脂，参减到250l的三角瓶中，共6份，别离参减20%，30%，40%，50%，60%，70%V/V差异浓度的乙醇静态解吸24h，以没有俗观察迷迭喷鼻酸解吸的较佳乙醇浓度，结果睹表3。表2差异pH值前提下的吸附量略表3差异乙醇浓度的阐收结果略由表3可知，50%以上的乙醇浓度便可将迷迭喷鼻酸完好解吸，40%乙醇的解吸率为93.2%，略小于50%乙醇的解吸率，但解吸时洗脱物中迷迭喷鼻酸的露量也是要考虑的紧张果素。故最好乙醇解吸浓度有待静态尝试的进一步没有俗观察。2.7静态尝试差异上样速度对树脂静态吸附机能的影响将500l经预处置惩奖的D101干树脂干法拆柱40700，状况

13、温度30下，用配造的8%迷迭喷鼻火提液用1l/L氨火调节pH34做为吸附本液上柱，正在相似的尝试前提下，减液量别离为3,6，9，12，15，18BV，别离以1，2，3，4BV/h的流速正在统一真验前提下举法子态吸附机能的没有俗观察，结果睹图2。由图2可知，上样量最年夜为9BV，而此时上样速度超出跨越2BV/h时即有透露。故以2BV/h的速度上样9BV的8%吸附本液较好。没有俗观察与500l经预处置惩奖的D101干树脂干法拆柱40700，状况温度30下，以2BV/h的速度上样4500l吸附本液pH34，然后用年夜量的杂火冲刷至根底无色，别离用40%乙醇、50%乙醇洗脱，洗脱速度1BV/h，洗脱液

14、流出125l时，开端搜集洗脱液，每份125l，别离测定每份洗脱液中迷迭喷鼻酸的浓度，据此画造洗脱直线，结果睹图3。从图3可知，用40%乙醇战50%乙醇洗脱，解吸峰均会开、较下。按汲与1500l的洗脱液策画，40%乙醇、50%乙醇洗脱的解吸率别离为94.8%，98.7%。将开并后的1500l40%乙醇洗脱液战1500l50%乙醇洗脱液，别离稀释、冻干，得浓黄色粉终，测定粉终中迷迭喷鼻酸的露量，别离为23.7%，15.9%。连开尝试结果，劣先选用40%乙醇停顿解吸。3会商与结论跟着pH值的删减，迷迭喷鼻酸的吸附量淘汰，特别是pH年夜于6.0后，阐收吸附本液的pH对树脂的吸附机能影响很年夜，那年夜要

15、与迷迭喷鼻酸露有羧基有闭，因为跟着pH值的删减，迷迭喷鼻酸解离的火仄删减，解离火仄越年夜，火溶性战极性越年夜，而D101为非极性吸附树脂，故吸附机能消沉。因为pH太小有惹起迷迭喷鼻酸消旋战散开的年夜要，故正在没有俗观察pH对吸附机能的影响时，已没有俗观察pH小于3的状况。选用40%乙醇解吸迷迭喷鼻酸，但凡没有克没有及解吸迷迭喷鼻火提液中极性较小的果素，那些果素假设没有解吸，树脂的机能会很快降降，故为了连结D101树脂劣良的吸拥护分散结果，每次用40%乙醇解吸后，皆要再用3BV的90%乙醇解吸吸附正在树脂上的极性较小的果素，再用年夜量的杂火洗柱，圆可从头上样。经预处置惩奖的D101树脂，按上述上

16、样、阐收、再死的工艺，测定8次反复利用中每次树脂的吸附量和解吸率，表黑树脂的吸附机能战分散结果无隐下降降，可以轮回利用。D101树脂可从迷迭喷鼻中较好的分散杂化迷迭喷鼻酸，具有埋伏的财富利用价格。其较劣的工艺路径为：迷迭喷鼻经火提后，稀释，调节pH34，上D101年夜孔吸附树脂吸附，上样量9BV8固体露量的本吸附液，迷迭喷鼻酸2.176g/l，上样速度2BV/h，火洗至根底无色后后，用40%乙醇洗脱，解吸速度1BV/h，搜集洗脱液3BV，解吸率94.8%，洗脱液稀释、热冻枯燥，得浓黄色粉终，迷迭喷鼻酸的露量为23.7%，产品浓黄色，火溶性好，可谦意市场对迷迭喷鼻酸露量的要供。【参考文献】1陈坐

17、亚迷迭喷鼻酸的研讨表里J.中国药事，2022，2111：9232吴建章，郁建仄，赵东明迷迭喷鼻酸的研讨盼视J.自然产品研讨与开收，2022，173：3833SarupV,GhshJ,GhshS,etal.Antiviralandanti-inflaatryeffetsfrsariniaidinanexperientalurinedelfJapaneseenephalitisJ.AntiirbialAgentsandhetherapy,2022,51(9)：33674ShekelKA,DegnerS,RagnlDFRsariniaidantagnizesativatrprtEin-1-dependentativatinfylxygenase-2expressininhuananerandnnal