冰片联合顺铂对大鼠C6胶质细胞瘤的治疗作用

1、冰片结合顺铂对大鼠C6胶质细胞瘤的治疗作用【摘要】讨论冰片结合顺铂对大鼠6胶质细胞瘤的治疗作用。方法建立大鼠6胶质瘤细胞模型，于治疗组给予灌服冰片及静脉注射顺铂，21天后分析治疗组与对照组胶质瘤横截面积。结果治疗组脑胶质瘤的横截面面积明显小于对照各组P0.05。结论冰片能增加血脑屏障对顺铂的通透性，从而进步顺铂对胶质细胞瘤的治疗作用。【关键词】冰片；顺铂；大鼠6胶质瘤细胞模型；血脑屏障Abstrat:bjetiveTexplrethetreatentfratellline6braingliadelithbrnelandisplatin.ethdsPreparetheratellline6bra

2、ingliadel，thetreatedgrupreEivedralbrne1andintravenusinfusinfisplatin，theareaftreatedgrupandntrlgrupsereanalyzedafter21days.ResultsTheeanareareduedsignifiantlyP0.05parediththsefthentrlgrups.nlusinBrnelanenhanethepereabilityfbldbrainbarriertisplatin，andinreasethetreatentfbraingliaithisplatin.Keyrds:br

3、nel;isplatin;ratellline6braingliadel;bldbrainbarrier1材料1.1细胞系和试剂6细胞株购于中科院上海细胞生物学研究所细胞库；医用顺铂，20g/瓶，齐鲁制药；石蜡油，500l/瓶，南昌白云制药；冰片，购于杭州胡庆余堂；250l生理盐水5瓶，杭州民生药业；小牛血清购于杭州四季青胰蛋白酶及培养基购于GIB公司10水合氯醛(自配)：以3l/kg剂量腹腔注射麻醉大鼠；1.2仪器设备和器械细胞培养系统：TherSientifiRS自动化细胞培养系统；超净工作台：江苏苏净集团苏州安泰空气技术产；江湾I型大鼠脑立体定向仪：第二军医大学消费。1.3实验动物40只

4、雄性istar大鼠购于上海实验动物中心，体重300320g。2方法2.1细胞培养将6细胞分装于数只752(底面积)的培养瓶中。参加适量含有体积分数为10小牛血清的RPI1640培养液,置入温度37、25的培养箱中培养。在细胞处于指数生长期时，以胰蛋白酶适量消化35in后，弃去消化液。用Hanks液吹打冲洗12次形成细胞悬液，调细胞浓度为每10l含1.5106个6细胞的悬液用于接种。2.2颅内接种将麻醉后的大鼠头部固定在脑立体定向仪上，剪去头顶部毛发，碘伏消毒后铺洞巾。取内眦连线与头部正中矢状面交点向后纵向切开头皮约1，别离暴露颅骨。根据Batker法确定右尾状核靶点，于冠状缝前1，中线右旁开3

5、，以牙科钻在颅骨上钻孔，孔径约1.2，深达硬脑膜外表而不伤及脑组织。25l微量注射器抽取6细胞悬液10l，沿骨孔缓慢匀速注射10in，注射完毕后留针5in，缓慢退针，骨孔用医用明胶海绵填充，骨蜡封闭。生理盐水冲洗手术区，无菌丝线缝合切口后消毒皮肤，术后加用青霉素抗感染，整个过程在层流超净台中进展，麻醉复苏后单笼常规饲养14天。转贴于论文联盟.ll.2.3实验分组将40只大鼠随机分为冰片顺铂治疗组；单用顺铂组；冰片组；空白对照组，共4组，每组10只。2.4大鼠体内治疗实验于术后14天，实验组：灌服10的冰片石蜡油溶液/v3l/kg/次，1h后大鼠尾静脉注射顺铂1g/g,以后每48h给同等剂量冰片

6、+顺铂1次,共计3次。冰片组单用冰片石蜡油溶液。空白对照组那么采用同体积石蜡油溶液，无冰片组那么未加冰片，其余方法一样。2.5试验纪录观察大鼠活动状态。肿瘤最大横径测量。于肿瘤接种21天取大鼠全脑,10%甲醛溶液固定后沿肿瘤中心作冠状切面,程度方向测量每个肿瘤最大横截面面积(包括坏死等病变组织)。组织病理学检查：所有脑标本固定，脱水，常规石蜡切片，片厚4，HE染色，光镜下观察。2.6数据统计统计学处理应用SPSS13.0统计软件进展LSD检验分析。3结果3.1各组大鼠于肿瘤接种成功后均于恒温台上复苏，复苏时间24h不等。复苏之后的大鼠逐渐恢复正常的饮食活动等。各组大鼠于肿瘤接种后10天起出现皮

7、毛不洁、饮食变差等异常现象，实验组于给予顺铂治疗后病症改善情况明显好于对照的三组大鼠。3.2各组脑胶质瘤的平均横截面面积比拟见表1。表1脑胶质瘤的平均横截面面积治疗组与对照组略与对照组相比，*P0.056胶质细胞瘤病理切片，见图1。4讨论研究显示，冰片能可逆性开启BBB，作为“佐使药协助其他药物透过BBB。本实验研究发现，大白鼠灌服10%冰片石蜡油溶液及尾静脉注射顺铂后,实验组脑胶质瘤的横截面面积明显小于对照各组P0.05，具有统计学差异。这些均提示，冰片具有促进顺铂进入脑组织的作用，其结果与贾钰铭等4相关研究根本一致。本研究结果，可以说明冰片促BBB开放与脑炎、脑外伤的病理性开放有质的区别，其开放为生理性开放，冰片对脑及BBB有一定的保护作用，其