马钱子及其不同炮制品水煎出物中士的宁和马钱子碱的含量测定

1、马钱子及其不同炮制品水煎出物中士的宁和马钱子碱的含量测定【摘要】：目的用hpl法对马钱子的江西法炮制品及其改进法炮制品的水煎出物中士的宁和马钱子碱含量进展测定。方法色谱柱填料为硅胶,流动相为正己烷-二氯甲烷-甲醇-浓氨水(47.547.550.35),检测波长为254n。结果江西法炮制品及其改进法炮制品中士的宁和马钱子碱的含量较低。其中以醋浸砂炒品中的含量为最低。结论江西法及其改进法炮制的马钱子比其砂烫法和油炸法更易降低毒性,使其平安范围增大,从而进步其临床用药的平安性。【关键词】马钱子炮制士的宁马钱子碱高效液相色谱法含量测定abstrat：bjetivehplethdasusedtdeter

2、inestryhnineandbruineinthedetinfseenstryhnianditspressedprdutsfjiangxiethdsandinnvatedethds.ethdssi2asusedasthestatinaryphase,n-hexanedihlrethaneethanlania(47.547.550.35)asthebilephase,ithdetetinavelengthat254n.resultthententsfstryhnineandbruineinthepressedprdutsfjiangxiethdsandinnvatedethdserel.the

3、ntentfthatinaetiaid-sakedprdutsaldedithhtsandasthelest.nlusinseenstryhnianditspressedprdutsfjiangxiethdsandinnvatedethdsanlerthetxiityandiprvethesafetyflinialuse.keyrds：stryhnsnux-vial.；pressing；stryhnine；bruine；hpl；deterinatin马钱子为马钱科植物stryhnsnux-vial.的枯燥成熟种子。主要成分为生物碱类,其中主要是士的宁,其次是马钱子碱,为临床常用毒剧中药,具有通

4、络止痛、散结消肿的成效。目前研究较多的主要是药典法炮制的砂烫马钱子和北方法炮制的油炸马钱子,而马钱子的江西传统炮制方法及相关改进法的研究较少,有些炮制方法如樟帮的尿泡滑石粉炒法和建帮的尿泡砂炒法甚至未见报道。本试验来用高效液相色谱法对马钱子及其各炮制品的水煎出物中士的宁和马钱子碱含量进展了测定。1实验材料1.1仪器agilent1100series高效液相色谱仪,7725i柱温箱,agilent1100色谱管理系统,可变波长扫描紫外检测器(vd)。1.2试药对照品士的宁和马钱子碱均购于中国药品生物制品检定所。士的宁(批号0705-200005)供含量测定用；马钱子碱(批号0706-9403)供

5、鉴别用,经纯化后,用归-化法测定含量为98.5%。甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。样品马钱子购自樟树药材市场,经鉴定为马钱科植物马钱stryhnsnux-vial.的枯燥成熟种子。2样品炮制2.1砂烫法取生马钱子粉碎成细粉,按?中华人民共和国药典?2022年版(一部)马钱子项下方法炮制。2.2油炸法1取市售麻油,倒入铁锅中加热至235左右(以400的温度计距锅底3处测定),投入马钱子炸至老黄色为度(约3in),取出,沥尽油,晾干即得。2.3樟帮尿泡法2原药放入童便中浸49d(夏季放入冰箱中,温度控制在1520左右)至鼓胀,取出,再用清水(长流水)漂约1421d,取出,刮去绒毛,再用水漂7d,

6、捞出,沥干水,用樟刀切成腰子片,晒干。2.4樟帮尿泡滑石粉炒法2取尿泡马钱子片,用滑石粉炒至黄色,筛去滑石粉,研末即可。2.5建帮尿泡砂炒法取原药材参加童便浸泡,加盖置49d后取出,用清水搅拌冲洗尽尿汁,再加清水漂35d,取出,用碎瓷片刮去绒毛,切薄片,晒至全干。取定量的净白砂,入锅内用武火炒至洪热或轻松流利,倒入马钱片,转文火不断翻炒至外表鼓起、转棕褐色时,迅速出锅,筛去砂子,摊凉,再碾细末。2.6醋酸浸法取净马钱子,用水泡2d,润半天,洗净,切1.5的薄片,再用5%的醋酸溶液浸泡5d,水漂3d,枯燥,碾碎。2.7醋酸浸泡砂炒法取醋酸浸马钱子片,按砂烫法项下炮制。2.8醋酸煮法取净马钱子用水

7、泡2d,润半天,洗净,切1.5的薄片,用%的醋酸溶液缓火煮1.5h,取出,晾干。2.9醋酸煮砂炒法取醋酸煮马钱子片,按砂烫法项下炮制。3结果3.1色谱条件色谱柱：hypersilsi2(4.6200,5)；流动相：正己烷-二氯甲烷-甲醇-浓氨水(47.547.550.35)；流速：1l/in；检测波长：254n。士的宁和马钱子碱的别离度值大于1.5,定量方法为外标工作曲线法。士的宁和马钱子碱的理论塔板数分别不低于2500和3000。3.2标准曲线的绘制精细称取士的宁和马钱子碱对照品分别为11.60g和11.20g,置25l容量瓶中,加氯仿至刻度,作为混合对照品溶液。精细汲取上述对照品溶液3、5

8、、7、9、11、13l,注入液相色谱仪,测定其峰面积积分值。以进样量为横坐标,峰面积值为纵坐标绘制标准曲线。士的宁和马钱子碱的回归方程分别为：y2116.75x9.29,r0.9999；y1249.84x21.35,r0.9998。3.3精细度试验分别精细汲取上述对照品溶液15l,注入高效液相色谱仪,重复进样6次,计算,rsd分别为：士的宁2.01%,马钱子碱1.75%。3.4重现性试验对砂烫品煎出液测定5次,结果士的宁平均含量为0.329%,rsd1.86%；马钱子碱平均含量为0.108%,rsd2.68%。3.5稳定性试验取同一样品试液,分别于2、4、6、8、10、12h进展测定,得士的宁

9、和马钱子碱的rsd分别为2.14%和2.32%。3.6回收率试验采用加标回收法,取含量的炮制品5份,精细称取,精细参加对照品贮备液适量,按样品测定项下方法操作,计算回收率。结果见表1、表2。表1士的宁加标回收率试验结果(略)表2马钱子碱加标回收率试验结果(略)3.7含量测定将马钱子生品和炮制品切成小块后粉碎成细末,过3号筛。精细称取生品及其炮制品各3份,每份约5g,置100l烧杯中,加水35l浸1h,煎45in,滤出药液,药渣再加水20l,煎20in,过滤,合并滤液并定容至50l,再精细量取20l于分液漏斗中,加氨水调ph至910,用氯仿萃取4次(15、10、5、5l),合并氯仿萃取液,水浴浓

10、缩,定容至25l。按“3.1项下色谱条件测定,每次进样15l,求得样品煎煮液中士的宁和马钱子碱的含量。结果见图1、表3、表4。表3不同炮制方法马钱子中士的宁含量测定结果(略)表4不同炮制方法马钱子中马钱子碱含量测定结果(略)4结论马钱子各炮制品的水煎出物中士的宁和马钱子碱含量以油炸品和砂烫品为高,其中油炸品最高,与生品比拟仍达90%以上,这可能与马钱子经油炸和砂烫后质地疏松,其化学成分易于煎出有关。江西法及其改进法炮制品的水煎出物中士的宁和马钱子碱含量较低,其中以醋浸砂炒品最低,士的宁含量为0.132%,仅为生品的31.7%,马钱子碱含量为0.031%,仅为生品的21.8%。马钱子碱的毒性为士的宁的1/8,但其疗效却只有士的宁的1/40,各炮制品中马钱子碱含量下降均比士的宁大,到达了去掉疗效差、毒性大的马钱子碱的目的。可见,江西法及其改进法炮制的马钱子比其砂烫法和油炸法更易降低毒性,使其平安范围增大,从而进步其临床用药的平安性。改进法用5%醋酸溶液代替童便炮制马钱子可缩短