金钠多对体外缺氧致人大动脉内皮细胞分泌内皮素的影响

1、金钠多对体外缺氧致人大动脉内皮细胞分泌内皮素的影响李鸣皋，马贵喜，韩磊，刘玉，李靖，蒙果，刘昕【关键词】；内皮缩血管肽类EffetsfGinatnnhypxiainduedendthelinseretinfrhuanartiendthelialells【Abstrat】AI:TexplretheeffetsfGinatnatdifferentnentratinsnthehypxiainduedendthelin(ET)seretinfrulturedvasularendthelialells(VEs).ETHDS:ulturedVEseredividedint5grups:ntrlgrup,s

2、iplehypxiagrup,highnentratinGinatngrup,deratenentratinGinatngrup,andlnentratinGinatngrup.Frhypxia,allgrupsexeptntrlgrupereputinahypbarihaberatthehEightf5000fr30in.TheETntentsinsupernatantfVEsbefrehypxiaand0.5hafterhypxia,6hafterhypxiaasellas24hafterhypxiaereeasuredithradiiunassay.RESULTS:Siplehypxia

3、prtedVEsseretinfETandETntentinreasedsignifiantlyat0.5hafterhypxiaandreahedthepeakat6h(P0.01).GinatninhibitedVEsseretinfETinduedbyhypxia.Atthetief0.5hafterhypxia,highnentratinGinatnasreeffetivethanderatenentratinandlnentratinGinatn(P0.01).Atthetief6hand24hafterhypxia,deratenentratinGinatnasresignifia

4、ntlyeffetivethanhighnentratinandlnentratinGinatn(P0.05).NLUSIN:GinatnhassignifiantprtetiveeffetsnhypxiainduedETseretinfrulturedVEsandtheeffetsfderatenentratinGinatnarerebviusparediththsefhighnentratinandlnentratinGinatn.【Keyrds】endthelial,vasular/ytlgy;endthelins;ginatn;anxia【摘要】目的：讨论不同浓度金钠多对由缺氧所致培养

5、的血管内皮细胞分泌内皮素功能的影响.方法：将培养的血管内皮细胞分为空白对照组、单纯缺氧组、缺氧加高浓度金钠多组、缺氧加中浓度金钠多组和缺氧加低浓度金钠多组.采用低压舱上升至5000高度、停留30in，对培养的血管内皮细胞进展缺氧.用放射免疫法测定缺氧前和缺氧后0.5,6,24h各组细胞培养液中内皮素含量.结果：急性缺氧可显著促进血管内皮细胞分泌内皮素，缺氧后0.5h内皮素含量即显著升高，于缺氧后6h分泌内皮素含量最高.金钠多能明显抑制缺氧促血管内皮细胞分泌内皮素的作用，在缺氧后0.5h表现出高浓度金钠多强于中浓度和低浓度金钠多组，在缺氧后6和24h那么中浓度金钠多的作用要强于高浓度和低浓度组.

6、结论：金钠多能显著抑制缺氧促血管内皮细胞分泌内皮素的作用，且中浓度金钠多较高浓度和低浓度金钠多作用更明显.【关键词】内皮，血管/细胞学；内皮缩血管肽类；金钠多；缺氧0引言缺氧是多种疾病和损伤发生开展过程中的中心环节之一.缺氧对血管内皮细胞vasularendthelialells,VE的构造和功能有着复杂和明显的影响，缺氧可刺激血管内皮细胞生成和释放内皮素endthelin,ET增加，血浆ET含量明显增高.有关药物如内皮素受体拮抗剂、内皮素转化酶抑制剂及中药对血管内皮细胞分泌ET的影响有不少报道1，但是金钠多对缺氧所致血管内皮细胞分泌ET的影响尚未见报道.我们采用培养的人大动脉血管内皮细胞，通

7、过低压舱模拟缺氧，分别观察缺氧对血管内皮细胞分泌ET的影响及不同浓度金钠多的保护作用.1材料和方法1.1材料低压舱由本院高压氧治疗中心提供，内皮细胞采用由BI公司提供的人大动脉血管内皮细胞体系，培养液及内皮细胞生长因子由BI公司配套提供，金钠多(德国威玛舒培博士药厂)、内皮素放免试剂盒由华英所提供.细胞取回后按照常规方法进展细胞复苏，调整细胞适宜浓度，接种于752细胞培养瓶中，放置于细胞培养箱中进展培养，待细胞长满瓶底后，用胰酶消化、传代.当细胞传至第3代时，将细胞接种于24孔细胞培养板中接种密度为5000ell/2,继续培养，待细胞生长满交融后，准备进展干预实验.1.2方法将培养的内皮细胞按

8、每组8例样本分为5组：对照组、单纯缺氧组、缺氧加高、中、低浓度金钠多组.对照组：为细胞培养液不加特殊试剂，也不受缺氧因素影响，但于缺氧组缺氧前后相对应的时间点取上清液100L，待测定ET浓度；单纯缺氧组：将单纯缺氧组置于低压舱内，上升至5000高度，停留30in，以造成细胞缺氧，缺氧后将细胞放回培养箱中继续培养，分别于缺氧前和缺氧后0.5,6,24h取上清液100L.缺氧加不同浓度金钠多组：在缺氧加不同浓度金钠多各组的细胞培养液中分别参加金钠多使之终浓度分别为25,10,5g/L，然后同单纯缺氧组一起置于低压舱内上升至5000高度，停留30in造成缺氧.分别于缺氧干预前和缺氧干预后0.5,6,

9、24h取上清液100L.上述各组标本抽取后，均置于用抑肽酶处理过的离心管中，-20低温保存.由专人用同一批试剂采用放免方法测定培养液ET浓度.统计学处理：结果以xs表示，采用SAS8.2统计学软件进展数据处理，所用方法为有一个重复测量的两因素设计的方差分析，组间两两比拟用Bnferrni方法分析，P0.05为差异有统计学意义.2结果2.1单纯缺氧对VE分泌ET的影响单纯缺氧组与空白对照组比拟，于缺氧前无差异，于缺氧后0.5,6,24h三个时间点ET含量均增高P0.01,Tab1.在单纯缺氧后0.5,6,24h三个时间点之间ET含量的比拟中，缺氧后6h的ET含量最高，缺氧后24h次之，缺氧后0.

10、5h最低P0.01.以上结果提示，在缺氧后0.5h内皮素含量即已开场增高，至6h时达较高程度，到24h时ET含量有所降低，但仍高于缺氧前的含量.表1缺氧对血管内皮细胞分泌ET的影响略2.2金钠多对缺氧所致VE分泌ET的影响将单纯缺氧组作为对照组，缺氧加不同浓度的金钠多各组分别同其比拟发现，高浓度金钠多组在缺氧后0.5h及24h两个时间点，内皮素含量要显著低于单纯缺氧组P0.01，在缺氧后6h内皮素含量与单纯缺氧组相比拟无差异；低浓度金钠多组在缺氧后0.5h，内皮素含量较单纯缺氧组高，在缺氧后6h内皮素含量低于单纯缺氧组P0.05，缺氧后24h那么显著低于单纯缺氧组P0.01；中浓度金钠多组在缺

11、氧后0.5,6,24h时间点的内皮素含量均显著低于单纯缺氧组P0.01，中浓度金钠多组在缺氧后6,24h时间点的内皮素含量分别同高浓度和低浓度金钠多组相对应时间点比拟要低P0.05,表2.表2金钠多对缺氧所致VE分泌ET的影响略3讨论血管内皮细胞合成分泌多种血管活性物质，如：ET,血管紧张素AT,前列环素(PGI2)等，在调节血管收缩舒张功能、止血与抗血栓形成功能平衡及血管壁的组织修复和免疫功能等方面发挥重要作用1.在缺血或缺氧条件下，VE的构造和功能均产生复杂变化，对缺血和缺氧病理生理过程产生重要影响.本实验发现，单纯缺氧后05h,ET含量较缺氧前增加，缺氧后6达顶峰，缺氧后24h有所下降，

12、但仍高于缺氧前P0.01，与文献报道的根本一致2.缺氧因素引起VE分泌ET增加的主要机制是缺氧激活VE细胞膜钙通道，引起钙离子内流，使细胞内钙离子浓度升高，信息最终被传递到达ETRNA使RNA表达增多，ET程度升高2.金钠多Ginatn,EGB761是目前世界上公认的标准化银杏叶提取物，在临床多种疾病的预防和治疗上的应用价值得到广泛肯定.本实验结果提示，三种不同浓度金钠多均具有明显降低缺氧条件下VE分泌ET的作用，且发现中浓度金钠多10g/L较高浓度25g/L和低浓度金钠多5g/L更明显的保护作用.金钠多降低缺氧条件下VE分泌ET的作用，可能与金钠多的抗氧化活性和抗自由基活性相关3，与金钠多抑

13、制细胞内肌浆网a2+释放进而降低细胞内a2+浓度，最终阻断ETRNA过多表达有关4，与金钠多特异性地抑制血小板活化因子及调节兴奋性与抑制性氨基酸的平衡作用相关5.金钠多降低缺氧条件下VE分泌ET的作用，可能是其临床上治疗心脑血管疾病过程中发挥重要作用的机制之一.【参考文献】1郭峰，吉民，华维一，等.内皮素及其受体拮抗剂的研究进展J.中国药物与临床,2022,34:281-290.2高文祥，高钰琪，李素芝，等.缺氧对世居高原藏族人脐静脉内皮细胞ET和N程度的影响J.中国应用生理学杂志，2022,211:1-4.3王玉英，胡涛，贾国良，等.银杏叶提取物对人脐静脉内皮细胞增殖的影响J.第四军医大学学报，2022,2513:1179-11