2023届 一轮复习 浙科版 发酵工程 作业（浙江版）

1、2023届 一轮复习 浙科版 发酵工程 作业(时间：40分钟)考点一微生物的培养需要适宜的条件1.(2022温州三模)下列有关实验中无菌操作的叙述，正确的是()A.涂布器在使用前只需在酒精灯火焰上灼烧灭菌B.动物细胞培养基中的血清在超净工作台上进行过滤灭菌C.含葡萄糖、尿素等物质的培养基用500 g/cm2压力灭菌30分钟D.实验操作前，打开超净工作台的紫外灯和过滤风进行灭菌，30分钟后一起关闭答案B解析涂布接种时，将保存在75%酒精中的涂布器放在酒精灯火焰上，待涂布器上火焰熄灭后使用，A错误；动物细胞培养基中的血清在超净工作台上进行过滤灭菌，以保证不被杂菌污染，B正确；含有葡萄糖的培养基，通

2、常采用500 g/cm2，112 灭菌30分钟，防止葡萄糖焦化；含有尿素的培养基，不能加热灭菌，高温会使尿素分解，通常使用细菌过滤器进行除菌，C错误；实验操作前，打开超净工作台的紫外灯和过滤风进行灭菌，30分钟后关闭紫外灯，D错误。2.(2022柯桥适应性)在生产、生活和科研实践中，经常通过无菌操作技术避免杂菌的污染。下列有关无菌操作技术的叙述错误的是()A.当超净工作台处于紫外灯和过滤风打开状态时，人必须离开B.高压蒸汽灭菌时，只要压力达到设定要求锅内就可达到相应温度C.密闭空间内可采用紫外线照射消毒，在照射前可喷洒消毒液D.用乙醇和次氯酸钠处理过的外植体需经无菌水清洗后才可用于组培答案B解

3、析当超净工作台处于紫外灯和过滤风打开状态时，人必须离开，以免造成伤害，A正确；使用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌时，需要将灭菌锅内的冷空气排尽后，才能关闭排气阀，以保证锅中的高压只来自于水蒸气，从而能随着加热的进行将压力达到设定要求；若未将锅内冷空气排尽，则会出现锅内压力达到要求，而温度并没有达到相应要求的现象，B错误；紫外线能破坏DNA结构，照射前，适量喷洒消毒液，可强化消毒效果，C正确；用乙醇和次氯酸钠处理过的外植体需经无菌水多次冲洗后才可用于组培，D正确。3.(2021杭二中选考模拟)“细菌喜荤”“霉菌喜素”的意思是在配制培养基时()A.要调整培养基的pHB.要考虑不同微生物的代谢特性C

4、.要调整培养基的渗透压D.要考虑不同微生物的结构特性答案B解析不同的微生物代谢需求不同，只有满足目标微生物的代谢需求，才能使其快速生长。“细菌喜荤，霉菌喜素”，是说细菌培养基中要含有较高的有机氮，因此常用蛋白胨和酵母提取物等来配制；霉菌培养基一般用可溶性淀粉加无机物配制，或用添加蔗糖的豆芽汁等配制，因此，应选B。考点二目标微生物的分离和纯化4.(2021杭二中选考模拟)下图关于纯化微生物的部分操作，说法正确的是()A.步骤倒平板时，每倒入一个培养皿后立即轻轻晃动，铺满整个皿底后，将其置于水平位置上待凝固B.从中挑取单菌落，划线法接种在斜面上，适宜温度下培养一定时间后再置于4 冰箱中可保存菌种C

5、.图中方法纯化微生物操作简单，单菌落更易分离D.若用稀释涂布平板法，需制备细菌悬液，将1 g土样加到99 mL蒸馏水的三角瓶中，振荡一定时间，即成102土壤稀释液答案B解析要先将培养皿放置在水平位置上，然后再轻轻晃动，A错误；稀释涂布平板法，单菌落更易分离，C错误；蒸馏水不一定是无菌的，稀释过程应使用无菌水，D错误。5.(2021金色联盟浙江百校联考)下列有关微生物的培养和分离的叙述，正确的是()A.灼烧接种环后，为避免其他杂菌的干扰，应立即伸入菌液取菌种B.若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养C.在第一次划线前灼烧接种环和每次划线前灼烧接种环的目的相同D.若对大肠

6、杆菌进行计数，稀释涂布平板法统计的数目会比实际值略大答案B解析接种环必须冷却后，才可以伸入菌液中蘸取一环液，否则会烧伤或烧死微生物，A错误；可以将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照，以判断培养基灭菌是否彻底，若空白培养基上有菌种出现，则证明培养基被污染，B正确；在第一次划线前灼烧接种环和每次划线前灼烧接种环的目的不相同，第一次灼烧接种环的目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养基，而每次划线前灼烧接种环的目的是杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，C错误；由于在稀释涂布平板法中，可能会发生多个微生物形成一个菌落的情况，因此稀释涂布平板法统计的大肠杆菌数目会比实际值偏小，D错误。6.(20

7、21精诚联盟高三适应)下列关于微生物的培养与分离的叙述，正确的是()A.配制培养基时，需要在酒精灯火焰旁进行B.选择高压蒸汽灭菌条件时，不需考虑灭菌的材料和数量C.倒好培养基的培养皿要立即将平板倒过来放置D.单菌落的分离是微生物纯化的通用方法答案D解析配制培养基，无需在酒精灯火焰旁进行，配制好会进行灭菌，A错误；如葡萄糖的灭菌条件就要调整，B错误；待培养基冷却后倒置，C错误。7.(2021北斗星盟高三适应)下列属于稀释涂布平板法和平板划线法共同点的是()A.接种工具需保存在75%的酒精中B.接种前需对菌液进行不同浓度稀释C.可用于单菌落的分离D.可以对样液中的细菌进行计数答案C解析仅涂布器需保

8、存在75%的酒精中，A错误；一般仅稀释涂布平板法接种前需对菌液进行不同浓度稀释，B错误；仅稀释涂布平板法可以计数，D错误。8.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。请据图分析，下列说法错误的是()A.号试管的稀释倍数为103B.号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能恰为号试管的10倍C.号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7109D.将涂布器在酒精灯火焰上灼烧冷却后，再进行涂布答案A解析号试管的稀释倍数是104，A错误；号试管中稀释液进行平板培养，稀释倍数是号试管的1/10，如果稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能是号试管的10倍，B正确；号试管利用稀释涂布

9、平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168175167)30.1105100101.7109，C正确；将涂布器在酒精灯火焰上灼烧冷却后再进行涂布，以免温度过高杀死细菌，D正确。考点三传统发酵技术与发酵工程9.(2022北斗星盟联考)用成熟的葡萄制作葡萄酒过程中，以下哪种方式不利于缩短酿制的时间()A.加少量蔗糖B.加入适量干酵母C.将葡萄打成浆状D.将发酵瓶放在37 环境答案D解析制作果酒的原理是：利用酵母菌的厌氧呼吸产生乙醇和二氧化碳。酵母菌的新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。为加快酿酒过程，可加少量蔗糖，增加糖源；可加入适量干酵母，增加酵母菌含量；可将葡萄打成浆状，增大反应的接触面积；保

10、证发酵的适宜温度为25 左右等，A、B、C正确，D错误。10.鲸死亡后会沉入海底，俗称“鲸落”，“鲸落”后期会形成一个以厌氧菌和硫细菌等为主体的生态系统。厌氧菌以“鲸落”肌肉中的脂肪为食，同时产生一些硫化氢等硫化物，硫细菌将硫化物氧化成硫酸盐，并以该过程中释放的能量合成有机物。请回答相关问题。(1)培养微生物的培养基中一般都会含有水、无机盐、氮源和碳源，培养“鲸落”群落中厌氧菌的碳源必须是_。要培养硫细菌，培养基中的成分需要特殊配制，主要体现在_，这种培养基可以用来专一性培养硫细菌，所以称为_培养基。(2)在分离“鲸落”中的微生物时要制备固体培养基，在倒平板操作后，将平板倒置，这样做的目的是_

11、。(3)为了研究“鲸落”中含有微生物的情况，需将“鲸落”提取物加水稀释，然后将稀释水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，这种方法称为_。下面所示的四种菌落分布情况中，不可能由该方法得到的是_。(4)若想得到“鲸落”中某目标菌种，可用平板划线法进行纯化。若下图甲是接种培养后的菌落分布图，对应的平板划线操作示意图为_。图甲中的更易获得单菌落，判断依据是_。答案(1)含碳有机物(或脂肪)碳源必须是含碳无机物(或碳酸盐)，同时加入硫化物选择(2)防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染；防止培养基中水分过快挥发(3)稀释涂布平板法D(4)丙每次划线的菌种都来自上一次划线的末端，最后一次

12、划线结束时更容易获得单菌落解析(1)厌氧菌以“鲸落”肌肉中的脂肪为食，属于异养微生物，故培养“鲸落”群落中厌氧菌的碳源必须是含碳有机物(或脂肪)。硫细菌将硫化物氧化成硫酸盐，并以该过程中释放的能量合成有机物，即硫细菌为自养生物，所以要培养硫细菌，培养基中的成分需要特殊配制，主要体现在碳源必须是含碳无机物(或碳酸盐)，同时加入硫化物。这种人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基为选择培养基。(3)使用涂布器涂布接种微生物的方法为稀释涂布平板法。稀释涂布平板法接种的微生物会在培养基上形成均匀分布的菌落，而平板划线法接种的微生物在划线的起始部分

13、菌落连在一起生长，由图可知，A、B、C均形成了均匀分布的单个菌落，属于稀释涂布平板法接种的，而D中菌落是连在一起生长的，是通过平板划线法接种的。11.(2022诸暨适应性)造纸厂排放的污水中含大量木质素，某些真菌能分泌漆酶，催化木质素的降解。研究人员从不同环境地表上采集土壤接种到含有木质素及必需无机盐的培养基中，经过如下图所示的分离纯化过程，最终筛选出了高产漆酶的白腐真菌。请回答下列问题：(1)将土壤样品接种到含有木质素及必需无机盐的培养基中振荡培养若干天的目的是_。培养若干天后，应选择培养瓶中木质素含量_的培养液，接入新的培养液中连续培养。(2)在固体培养基上分离纯化目的菌时，若需统计菌落种

14、类和数量，要每隔一定时间观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致_，或培养时间太长导致_。答案(1)增加目的菌的数量最少(2)遗漏菌落的种类和数目菌落粘连影响计数、培养基表面干燥脱水解析(1)将土壤样品接种到含有木质素及必需无机盐的培养基中振荡培养若干天的目的是增加目的菌的数量。培养若干天后，应选择培养瓶中木质素含量最少的培养液(说明漆酶产量最高)，接入新的培养液中连续培养，目的是对目的菌进行扩大培养。(2)区分菌落种类的依据是菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征，统计菌落种类和数量时要每隔24 h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以有效防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的

15、种类和数目，或培养时间太长导致菌落粘连影响计数、培养基表面干燥脱水影响菌落数目的统计。12.(2021广东卷，21)中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜(甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖)为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。回答下列问题：(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为_，并不断提高其浓度，经多次传代培养(指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养)以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用_的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。(2)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力

16、强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60 g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60 d以上。该系统不需要灭菌的原因是_(答出两点即可)。(3)研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中_可能是高密度培养的限制因素。(4)菌株H还能通过分解餐厨垃圾(主要含蛋白质、淀粉、油脂等)来生产PHA，说明其能分泌_。答案(1)碳源稀释涂布平板法(显微镜计数法)(2)培养基是高盐浓度的液体环境，杂菌会由于渗透失水而死亡；培养基的液体环境是碱性的，其他杂菌的酶变性失活，生长繁殖受抑制(3)氧气(4)蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶以及与PHA合成相关的酶解析(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，在液体培养基中，可将蔗糖作为碳源。培养过程中可定期取样并采