检验主管技师-临床基础2021全1

1、考 纲一、检测原理（一）电阻抗法（原理）1.原理将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器中，将小孔管插进细胞悬液中。小孔管内充满电解质溶液，并有一个内电极，小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。当接通电源后，位于小孔管两侧的电极产生稳定电流，稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔（直径100m，厚度约75m）向小孔管，使小孔感应区内电阻增高，引起瞬间电压变化形成脉冲信号，脉冲振幅越高，细胞体积越大，脉冲数量越多，细胞数量越多，由此得2.白细胞分类计数原理液中血细胞数量和体积值。根据电阻抗法原理，经溶血剂处理的、脱水的、不同体积的白细胞通过小孔时，脉冲大小不同，将血液分析仪及其临床应

2、用一、检测原理二、检测参数三、血细胞直方图四、方法学评价五、临床应用体积为 35450fl 白细胞分为 256 个通道。3.血红蛋白测定原理当稀释血液中加入溶血剂后，红细胞溶解并红蛋白，血红蛋白与溶血剂中的某些成分结合形成一种血红蛋白衍生物，在特定波长（530550nm）下比色，吸光度变化与稀释液中 Hb 含量成正比，最终显示 Hb 浓度。如含 化钾的溶血剂，与血红蛋白作用后形成540nm。（二）光散射法血液分析仪检测原理1.白细胞计数和分类计数原理激光与细胞化学法容量、电导、光散射法电阻抗与射频法多角度偏振光散射（MAPSS）法（1）激光与细胞化学法过氧化物酶检测通道：白细胞过氧化物酶染色嗜

3、酸，中性，单核白细胞总数和分类计数，白细胞散点图吸光率（酶反应强度）为X 轴，光散射（细胞大小）为 Y 轴。嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道化血红蛋白，其最大吸收峰接近血液与酸性表面活性剂反应，不仅红细胞溶解，而且除嗜碱性粒细胞外，其他所有白细胞膜均被破坏，胞质溢出，仅剩 核。当激光束照射到细胞时，产生不同强度的散射光，形成二维细胞图，其中，嗜碱性粒细胞呈高狭角散射，定位于细胞图上部，核细胞则位于细胞图下部。（2）容量、电导、光散射（VCS）法利用电阻抗法原理测量细胞体积（V）利用电导（C）技术测量细胞结构利用光散射（S）技术测量细胞形态和核结构（3）电阻抗与射频法嗜酸性粒细胞检测系统：采用电阻抗

4、法计数嗜酸性粒细胞。嗜碱性粒细胞检测系统：采用电阻抗法计数嗜碱性粒细胞。白细胞分类检测系统：采用电阻抗和射频（能透入细胞内，测量核大小、颗粒多少）法。幼稚细胞检测系统根据幼稚细胞膜上脂质较成熟细胞少的特性进行检测。在细胞悬液中加入硫化氨基酸，幼稚细胞的结合量多于较成细胞，幼稚细胞对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂后，成熟细胞被溶解，幼稚细胞不被破坏，从而提供幼稚细胞信息（IMI）。（4）多角度偏振光散射（MAPSS）法当激光束照射到单个细胞时，从 4 个角度测定散射光密度：0：前角光散射（13），可测定细胞大小；10：狭角光散射（711），可测定细胞结构特征；90：垂直光散射（70110），可测

5、定细胞核分叶情况；-90：消偏振光散射（70110），可将嗜酸性粒细胞和其他细胞区分出来。二、检测参数红细胞参数血小板参数白细胞参数中文名称英文缩写中性粒细胞计数NEUT中性粒细胞百分率NEUT%淋巴细胞计数LYMPH淋巴细胞百分率LYMPH%单核细胞计数MONO血小板计数PLT血小板平均体积MPV血小板比容PCT血小板体积分布宽度PDW血小板平均浓度MPC血小板平均质量MPM中文名称英文缩写血红蛋白Hb血细胞比容HCT/PCV红细胞计数RBC红细胞平均体积MCV红细胞平均血红蛋白量MCH红细胞平均血红蛋白浓度MCHC单个红细胞血红蛋白浓度CHCM红细胞体积分布宽度RDW红细胞血红蛋白分布宽度

6、HDW不属于血细胞分析仪红细胞参数的是A.RDW B.Hb C.MPV D.RBCE.HCT正确CMPV 指的是血小板的平均体积。在电阻抗型血液分析仪中，哪项与脉冲振幅成正比A.细胞的数量 B.细胞的体积 C.细胞的D.细胞的移动速度E.以上都不是正确B脉冲振幅越高，细胞体积越大，脉冲数量越多，细胞数量越多。三分群白细胞直方图上，中间细胞区不包括哪类细胞A.嗜碱性粒细胞 B.嗜酸性粒细胞 C.单核细胞D.幼稚细胞E.中性粒细胞正确E淋巴细胞为单个核细胞，颗粒少，细胞小，位于 3590fl 的 fl 小细胞区，粒细胞（中性粒细胞）的核分多叶，颗粒多，胞体大，位于 160fl 以上的大细胞区，单核

7、细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始细胞、幼稚细胞等，位于 90160fl 的单个核细胞区，又称为中间型细胞。血液分析仪的检测原理不包括A.电阻抗法 B.光散射法C.容量、电导、光散射法 D.电阻抗与射频法E.单一角度偏振光散射法正确E白细胞计数和分类计数原理激光与细胞化学法；容量、电导、光散射法；电阻抗与射频法；多角度偏振光散射（MAPSS）。单核细胞百分率MONO%嗜酸性粒细胞计数EOS嗜酸性粒细胞百分率EOS%嗜碱性粒细胞计数BASO嗜碱性粒细胞百分率BASO%三、细胞直方图（一）白细胞直方图血液分析仪在计数细胞数量的同时，还提供细胞体积分布图形，横坐标为细胞体积大小，纵坐标 为不同体

8、积细胞的相对频率，称为细胞直方图。正常白细胞直方图，在 35450fl 范围内将白细胞分为 3 群：左侧峰又高又陡为淋巴细胞峰；最右侧峰又低又宽为中性粒细胞峰；左右两峰间的谷区较平坦为单个核细胞峰。白细胞直方图变化的部分原因（二）红细胞直方图正常红细胞直方图，在 36360fl 范围内分布两个细胞群体，从 50125fl 区域有一个两侧对称、 较狭窄的曲线，为正常大小的红细胞，从 125200fl 区域有另一个低而宽的曲线，为大红细胞、网织白细胞直方图变化主要原因淋巴细胞峰左侧异常有核红细胞、血小板、巨大血小板、未溶解红细胞、疟原虫、冷凝集蛋白、脂类颗粒、异型淋巴细胞淋巴细胞峰右移，与单个核细

9、胞峰左侧相连并抬高急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、异型淋巴细胞单个核细胞峰抬高增宽原始或幼稚细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞增多、嗜碱性粒细胞增多、单核细胞增多单个核细胞峰与中性粒细胞峰之间异常未成中性粒细胞、异常细胞亚群、嗜酸性粒细胞增多中性粒细胞峰右移、抬高、增宽中性粒细胞绝对值增多直方图多区出现异常以上多种原因引起红细胞。当红细胞体积大小发生变化时，峰可或右移，或出现双峰。（三）血小板直方图在 230fl 范围内分布，呈态分布，集中分布于 215fl 内。当有大血小板或细胞、聚集血小板时，直方图显示异常。四、方法学评价（一）仪器性能的评价新仪器安装、每次仪器维修后须对仪器性能进包括下列

10、内容：相关性准确度稀释效应精密度样本老化携带污染干扰（二）干扰血液分析仪检测的 血液分析仪产生假性结果的情况试、评价。ICSH的血液分析仪评价方案，参数假性增高假性降低WBC溶血红细胞抵抗（尿毒症、和新生儿样本）、出现有核红细胞、冷球蛋白血症和冷蛋白血症、血小板、副蛋白血症、多量巨大血小板、异常血红蛋白（如 AS、SS、AC AE、A-Arab）、肝病、冷凝集素、骨髓异常增生综合征细胞性贫血、脾切除后、蛋白丝、高脂血症、脂肪污染样本、疟原虫、不稳定血红蛋白因抗体或细胞膜改变出现肿瘤细胞引起白细胞之间或白细胞和血小板（如抗体介导中性粒细胞，淋巴瘤细胞或肿瘤性浆细胞）、血液放置时间超过3d 引起白

11、细胞溶解室温达 24h、冷凝集素微小凝块五、临床应用（一）部分检测参数的临床意义红细胞血红蛋白分布宽度（HDW）反映红细胞内 Hb 含量异质性的参数，用单个红细胞 Hb 含量的标准差表示，正常参考范围为 24 34g/L。遗传性球形红细胞增多症时 RDW、HDW 明显增高，为小细胞不均一性高色素性贫血。血小板平均体积（MPV）鉴别血小板减低的病因：MPV 增高，见于外周血血小板破坏过多所致血小板减低。MPV 减低，见于骨髓病变所致血小板减低。评估骨髓造血功能恢复情况：MPV 正常：局部炎症时，骨髓造血未抑制 MPV 减低：败血症时，骨髓造血受抑制 MPV 增高：白血病缓解时MPV 和血小板计数

12、持续减低：骨髓造血衰竭MPV 先上升，血小板计数随后上升：骨髓功能恢复时3.血小板分布宽度（PDW）仪器测量一定数量血小板体积后，计算所得外周血血小板体积大小异质性参数。用血小板体积变异系数（CV）来表示。PDW 增大见于急性白血病化疗后、细胞性贫血、慢性粒细胞白血病、脾切除后、巨大血小板综RBC冷球蛋白血症、冷蛋白血症、多量大血小板、高白细胞高脂血症冷凝集素、EDTA 依赖性凝集、极细胞或碎片使红细胞落在阈值下限以外、因样本不当或异常红细胞的体外红细胞溶解、微小凝块Hb高脂血症、内源性或胃肠外营养、高白细胞、副蛋白或球蛋白血症、冷球蛋白血症MCV高渗状态、冷凝集素和 EDTA 依赖红细胞、样

13、本在室温、高白细胞、EDTA 过量低色素红细胞、低渗状态HctMCV 增高（除冷凝集素外）、RBC 减低MCV 减低、因极小细胞或体外溶血引起 RBC 增高、冷凝集素、微小凝块、高血糖MCHHb 增高、RBC 减低、内溶血引起血浆游离血红蛋白增加MCHCHb 增高内溶血引起血浆游离血红蛋白增加、Hct 或 MCV和 RBC 减低、低渗状态MCV 减低（除冷凝集素外）因多量巨大血小板引起 RBC增高、高渗状态PLT冷球蛋白、高甘油三酯血症或高脂血症、白细胞碎片、细胞或红细胞碎片、血红蛋白H 病、微生物、经加热的血液样本部分凝集样本、采血时血小板活化、EDTA 诱导血小板聚集、肝素诱导血小板 、血

14、小板 、巨大血小板落在血小板阈值上限以外Ret红细胞包涵体、红细胞内、白细胞碎片、血小板巨大血小板样本室温合征、血栓性疾病、性血小板增多症、再生性贫血。PDW 减低见于反应性血小板增多症。4.LFR 和 HFR骨髓移植：网织红细胞计数是监测骨髓造血恢复的重要参数，通常移植成功后网织红细胞比白细胞提前 34d 增高。HFR 增高提示有较多未成熟细胞从骨髓进入外周血，故 HFR 变化比网织红细胞计数变化具有更重要意义。贫血：溶血性贫血时 Ret、LFR、HFR 明显增高；肾性贫血时 HFR 上升、LFR 下降、Ret 正常。（3）放疗和化疗：长期化疗导致网织红细胞亚HFR、MFR 又迅速上升。5.

15、网织红细胞成熟指数（RMI） RMI（MFRHFR）/LFR100。生变化，HFR、MFR 减低早于 LFR。骨髓恢复时，RMI 增高，见于溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、慢性淋巴细胞白血病（CLL）、急性白血病、真性红细胞增多症、再生性贫血、多发性骨髓瘤。RMI 减低，提示骨髓衰竭和造血无效，见于6.未成熟网织红细胞指数（IRF）细胞性贫血。指未成熟网织红细胞与总网织红细胞百分比。未成熟网织红细胞体积较大，含 RNA 的量多。监测骨髓移植后的情况：骨髓移植后，全血细胞计数、白细胞分类计数、网织红细胞计数是监测骨髓恢复造血的早期指标，其中IRF 是骨髓移植成功最早、最灵敏的指标。

16、监测肾移植后的情况：IRF 是肾移植成功较早、较灵敏的指标。（二）红细胞直方图在贫血中的应用1.小细胞性贫血（1）RDW 正常：红细胞主峰，分布在 55100fl，波峰在 75fl 处，基底较窄，为小细胞低色一性图形，见于轻型地中海贫血。（2）RDW 轻度增高：红细胞主峰，分布在 55100fl，波峰在 65fl 处，为小细胞低色素和细胞不均一性图形，见于缺铁性贫血。（3）RDW 明显增高：红细胞显示双峰，小细胞峰明显处，基底较宽，为小细胞低色素不均一性图形。见于铁粒幼细胞性贫血、缺铁性贫血经治疗有效时。，波峰在 50fl 处，大细胞峰顶在 90fl2.大细胞性贫血（1）RDW 正常：红细胞主

17、峰右移，分布在 75130fl，波峰在 100fl 处，为大细胞性图形，见于溶血性贫血、白血病前期、再生性贫血、细胞性贫血。（2）RDW 轻度增高：红细胞峰右移，基底增宽，分布在 75150fl，波峰在 105fl 处，为大细胞不均一性图形，见于细胞性贫血。（3）RDW 明显增高：红细胞峰右移，出现双峰，以 100fl 处峰为主，为大细胞不均一性图形，见于细胞性贫血治疗初期。3.正细胞性贫血（1）RDW 正常：红细胞分布在 55110fl，波峰在 88fl 处，为正常红细胞图形，见于慢贫血、急性失血、骨髓化、骨髓发育不良。（2）RDW 轻度增高：红细胞分布在 44120fl，波峰在 80fl

18、处，为红细胞不均一性图形，见于血红蛋白异常、骨髓化。（3）RDW 明显增高：红细胞分布在 40150fl，波峰在 90fl 处，为红细胞不均一性图形，见于早期或混合性营养不良。【小结】1.电阻抗（）脉冲高细胞大，脉冲多细胞多。2.光散射激光与细胞化学法：过氧化物酶E，N，M。VCS：V 细胞体积，C 细胞结构，S 细胞形态和核结构。电阻抗与射频法：E，B，WBC，IMI。MAPSS 法。 0前角大小10狭角测90垂直核分叶90偏振 E 区分3.细胞直方图 横为体积，纵为频小细胞右移大细胞底宽不均一双峰出现治疗有效对一位贫血患者行血液分析时发现，红细胞直方图出现双峰且底部变宽，此现象多见于A.细胞性贫血B.珠蛋白生成性贫血C.缺铁性贫血有效治疗后D.再生性贫血E.难治性贫血正确C通常情况出现双峰表示正在治疗期。RDW 明显增高：红细胞显示双峰，小细胞峰明显，波峰在 50fl 处，大细胞峰顶在 90fl