高三生物pcr技术复习试题

1、高三生物PC做术复习试题、知识回顾聚合酶链反应法（PCR法）：PCR技术可模拟细胞核内 DNA复制的天然过程，可在 34h内使目的基因扩增上 百万倍，达到肉眼可见的量，不需要放射性同位素标记就能分析、检测基因，大大提高了基因检测的灵敏度。具 体过程：首先，把 DN劭口热，使双链分开；然后将人工合成的一段单链核甘酸即DNMI物，黏附到DNA股螺旋上；之后按照引物就能够复制出 DN林，重复放大50次后就可以制成10亿个基因。在PCRa大过程中的关键是 利用耐热DNAM合酶使少量的DNAa短期内即能扩增数百万倍，便于分析、检测。二、试题精练1、PC叱术是一种 DNA勺扩增技术。在一定条件下，加入模板

2、DNA DN咪合酶、dATR dCTR dGTP dTTP可以实现DNA的扩增。据此判断不合理的是dATP在DNAT增中可以提供能量，同时作DNA成的原料dTTP完全水解后产物有胸腺喀咤、磷酸、核糖DNAT增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNAB旋CTP水解脱去两个磷酸基后是组成 RNA的基本单位之一2、多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增 DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95 C下使模板DNA变性、解链一 55c下复性（引物与 DNA模板链结合）- 72c下引物链延伸（形成新的脱氧核昔 酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是：（）A

3、.变性过程中破坏的是 DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B.复性过程中引物与 DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C.延伸过程中需要 DNA聚合酶、ATP、四种核糖核甘酸D. PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高3、下列有关PCR技术的叙述，不正确的是：（）PCR术经过变形、复性、延伸三个阶段PCR术可用于基因诊断，判断亲缘关系等PC叱术需在体内进行D. PC叱术是利用碱基互补配对的原则4、PC叱术扩增DNA需要的条件是（）目的基因 引物四种脱氧核甘酸DNAm合酶等mRNA核糖体A、B、C、D5、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核甘酸对，其中

4、月I喋吟脱氧核甘酸460个）放入PCR仪中扩增4代，那么，在PCR仪中放入胞喀咤脱氧核甘酸的个数至少应是A. 640B. 8100C. 600D. 86406、对禽流感的确诊，先用 PCR技术将标本基因大量扩增，然后利用基因探针，测知待测标本与探针核酸的碱基 异同。下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置，M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置，哪份标本最有可能确诊为禽流感（）A. M B. N C. QD. W7、某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中，发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。他想了解该巨型动 物的DNA与现今印度大象的 DNA的相似性，于是做了如下检测工作

5、，其中正确的操作步骤及顺序是降低温度，检测处理后形成的杂合DNA双链区段通过PCR技术扩增巨型动物和大象的 DNA把巨型动物的 DNA导入大象的细胞中在一定的温度条件下，将巨型动物和大象的DNA水浴共热A.B.C.D.8.（8分）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术，反应系统中包括微量样品DNA DNA聚合酶、引物、足量的4种脱氧核甘酸及 ATP等。反应中新合成的 DNA又可以作为下一轮 反应的模板，故 DN峨以指数方式扩增，其简要过程如右图所示。（1）某个DNA样品有1000个脱氧核甘酸，已知它的一条单链上碱基 A:G:T:C=1:2:3:4 ，则

6、经过PCR仪五次循环后，将产生 个DNA分循环重复子，其中需要提供胸腺喀咤脱氧核甘酸的数量至少是 个。循环重复（3）请指出PC叱术与转录过程的三个不同之处:（2）分别以不同生物的 DNA（3）请指出PC叱术与转录过程的三个不同之处:。答案：（1） 3262 分） （2）碱基（脱氧核甘酸）的数目、比例和排列顺序不同（2分）PC破术以DNA勺两条单链为模板合成子代 DNA转录以DNA勺一条单链为模板合成 RNAPC叱术的原料为脱氧核甘酸，转录的原料是核糖核甘酸；二者反应时的催化酶不同（或其它合理答案）（7分）资料显示，近十年来，PC豉术（DN朦合酶链式反应技术）成为分子生物实验的一种常规手段，其原

7、理是利用DNAH呆留复制的特性，在试管中进行DNA勺人工复制（如下图），在很短的时间内，将 DNAT增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答：模板DHAD岫单链 引物DNA单链与擀离脱氧核2条完整的模板通过碱基互昔最连接到 双雄DNA分子剂结合DNA单链上（1）加热至94c的目的是使 DNA样品的 键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过 酶的作用 来完成的。通过分析得出新合成的DNA分子中，A=T, C=G,这个事实说明DNA分子的合成遵 循。（2）新合成的DN册子与模板DNA分子完全相同的原因是和。 TOC o 1-5 h z （3）通过PC叱术使D

8、NA分子大量复制时，若将一个用15N标记的模板DNA分子（第一代）放入试管中，以14N标记的脱氧核甘酸为原料，连续复制到第五代时，含15N标记的DNA分子单链数占全部 DNA总单链数的比例为。PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCRT增血液中的（）A.白细胞DNA B ,病毒蛋白质C .血浆抗体D .病毒核酸答案：（1）氢， 解旋，碱基互补配对原则。DNA子中独特的双螺旋结构（或以模板DNA子的一条链为模板进行半保留复制）复制过程中严格遵循碱基互补配对原则。1/16 。（4） D9. （8分）下面甲图中DNA

9、决定某一多肽链中的酪氨酸和丙氨酸过程示意图，乙图示样品DNA经PCR技术（聚合酶链式反应)扩增，可以获取大量 DNA隆分子。分析回答:TAT G c C lit TAT G c C lit I I ItDNA样品2个DNA分子蛋白质一酷氨酸丙氨酸，兀图甲图(1)甲图中含有 种核甘酸；丙氨酸的遗传密码子是。该图表示了 DNA中遗传信息的过程。(2)有一种贫血症是血红蛋白分子的一条多肽链上，一个酪氨酸被一个苯丙氨酸所替代造成的。此种贫血症的根本原因是,即 发生了改变。(3)乙图的“PCR与人体内的 DNA复制相比有何特殊之处 ？ 。(4)现在要通过“ PCR得到甲图中DNM段的1024个克隆片段，

10、则至少要向试管中加入个腺喋吟脱氧核甘酸。答案：(1)8 GCC 转录和翻译，(2)基因突变DNA的碱基序列(或基因结构)(3)离体条件，需要高温，高温酶 (答上两项即给分)(4)3069(2 分)10、(8分)PCR技术是把某一 DNA片段在体外酶的作用下，合成许许多多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异的扩增任何要求的目的或DNA分子片段；电泳技术则是在外电场作用下，利用分子携带的净电荷不同，把待测分子的混合物放在一定的介质(如琼脂糖凝胶)中进行分离和分析的实验技术，利用它可分离氨基酸、多肽、 蛋白质、核甘酸、核酸等物质和作亲子法学鉴定。下图中14是电泳装置及相应电泳结果。国2%派蛀普中J

11、t匚员由a国2%派蛀普中Jt匚员由a%曲皿拾维图液仅 代母轴匚代 来儿或西y 代善号灯男性】请回答:(1)电泳与叶绿体色素分离采用的纸层析法比较，后者使用的介质是 。电泳过程中分子的迁移速率除与本身所带净电荷的多少有关外，你认为还受什么因素影响(至少列出一种)?。PCR技术能把某一 DNA片段进行扩增，是依据什么原理？ 。(3)图3是把含有21个氨基酸的多肽进行水解，得到的氨基酸混合物进行电泳的结果，故可推知该多肽是 由 种氨基酸构成的。(4)图4通过提取某小孩和其母亲，以及待测定四位男性的DNA ,分别由酶处理后，生成含有若干DNA片段，并已进行扩增得到的混合物，然后进行电泳所得到的一组DN

12、A指纹图谱，请分析：谁是该小孩真正生物学上的父亲？为什么？答案：(1)层析液 分子的大小、形状；凝胶的种类、密度；电泳的电压大小DNA勺复制(3) 6F2是该小孩的生物学上的父亲因为C和F2两者之间的DNA旨纹图谱完全相同11、(7分)PCR技术是一项在短时间内可将DNA分子迅速扩增的方法。它的基本原理与细胞内DNA分子的复制类似。下面是 PCR的反应体系及反应条件，请据此回答：PC取应体系：PC取应体系：50ul缓冲液5ul脱氧核甘酸1ul (2.5mM)引物A0.5ul引物B 0.5ul2+温度 时间 TOC o 1-5 h z 预变性945min变性95C30sec复性56-60C30s

13、ec(1)请指出DNA分子复制所需的条件是： 、和。与细胞核中 DNA分子复 制相比，95c条件下变性30s的目的是：。反应体系中的缓冲液相当于细胞中的 (2)如果有反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后，DNA分子的数量将达到 个。答案(1)模板、原料、能量和酶；模板DN酚子的解旋；核液；30100X2 。12、(7分)在12月26日发生的印度洋地震海啸灾又t中，死亡人数已达到15万，为了帮助辨别遇难者身份，我国政府派出了 DNA鉴定专家组到泰国为遇难遗体做法医病理检验。下列是一组法医检验DNA时常用到的生物技术或物质：PCR技术是把某一 DNA片段在体外酶的作用下，合成许

14、多相同片段的一种方法，利用它能迅速而特异 的扩增任何要求的目的基因或 DNA分子片段；(2)限制性内切酶能识别特定的 DNA序列并进行剪切，不同的限制性内切酶可以对不同的核酸序列进行剪 切以选择目的基因或 DNA片段；(3)电泳技术则是在外电场作用下，利用分子携带电荷不同，把待测分子的混合物放在一定介质(如琼脂 糖凝胶)中进行分离和分析的实验技术，利用它能分离氨基酸、多肽、蛋白质、核甘酸、核酸等物质，也可用作 亲子法学鉴定。请阅读上述内容并回答下列问题：;禾1J用PC破术扩增DNA(1) PC叱术能把某一 DNA片段进行扩增，是依据什么原理;禾1J用PC破术扩增DNA(2)电泳过程中分子的迁移

15、率除与本身所带电荷的多少有关以外，你认为还受什么因素影响？(至少列出种)(3)如果将含有2条多肽链共48个氨基酸的蛋白质进行彻底的水解，然后再将得到的氨基酸混合物进行电泳,结果如下图1结果如下图1所示。则可推知该蛋白质由种氨基酸构成，该蛋白质水解时需要的水分子数OM C F(M代表母亲，OM C F(M代表母亲，C代表儿子, F1 F4代表待测四位男性)图2Ac用比帆口 2l=ll.T mi05.2moI=l3.t*=1 :1115=U.7=0313,30 31=0 ?=0.3=11.2=1.0(4)由于每个人的 DNA条带(经电泳后)分布图是独一无二的，因此“DNA指纹法”可帮助进行亲子鉴定或帮助司法部门进行案件侦破。如果取某小孩和其母亲、以及另外四位待测男性的DNA经合适的酶处理以后得到若干DNA片段，再经电泳以后得到“ DNA旨纹图谱”如上图2所示，请分析：四位男性中谁最可能是该小孩的生 物学父亲？ 。(5)现以3种不同的限制性内切酶对 6.2k