皱皮木瓜总黄酮对胃肠平滑肌的松弛作用及其机制分析

1、皱皮木瓜总黄酮对胃肠平滑肌的松弛作用及其机制分析【摘要】目的讨论皱皮木瓜总黄酮(FL)对胃肠平滑肌的松弛作用及其相关机制。方法采用家兔离体空肠、回肠和胃底平滑肌生物测定法,观察FL对空肠自主性收缩和Ah诱导收缩的影响,以及回肠和胃底对不同冲动剂Ah和al2的反响。结果FL对空肠自主性收缩和Ah诱导收缩反响均呈抑制作用;剂量依赖性抑制a2+诱导回肠收缩P0.01及Ah所致胃底肌条的收缩，非竞争性拮抗Ah和al2累积量效曲线,压低最大反响。结论FL松弛胃肠平滑肌与阻断VD减少外钙内流和内钙释放作用有关,但与胆碱受体阻断无关。【关键词】皱皮木瓜总黄酮胃肠平滑肌机制分析Abstrat:bjetiveT

2、eluidatetherelaxanteffetsandrelatedehanissfttalflavnefrhaeneleslagenariaKidz(FL)nrelaxantgastrintestinalsthusles.ethdsTherelaxanteffetsandrelatedehanisfFLerestudiednthentratinfislatedrabbitjejunu,ileuandgastrifundusagnizedbyAhandal2.ResultsFLinhibitedthentratinfislatedjejunalautniandjejunuagnizedbyA

3、h.Intheislatedrabbitgastrifundusrileu,FLerefundtinhibitthentratininduedbyAhandal2indse-dependentanner,andnn-petitivelyantagnizetheAhral2uulativedse-respnseurvesithaleraxialrespnse,hileAtr(atrpine)petitivelyinhibitedthegastrifundusntratininduedbyAh.nlusinTheehanissfrelaxantgastrintestinalsthuslefFLis

4、relatedtitsblkingeffetnthevltagedependenta2+hannelVD,butisntrelatedtusarinireeptrblking.Keyrds:FL;Gastrintestinalsthusle;ehanisanalysis皱皮木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠haeneleslagenaria(Lisel)Kidz的果实，主产于我国安徽，湖北和四川等地,其中的主要成分包括有机酸、黄酮类和皂苷等。针对皱皮木瓜的临床应用根底，我室曾对其乙醇提取物进展过整体动物研究。实验说明：皱皮木瓜乙醇粗提物具有松弛胃肠平滑肌和镇痛作用1，2，为了讨论其中的有效部位和深化的药

5、效机制，本实验利用皱皮木瓜总黄酮对胃肠平滑肌的松弛机制进展了分析和讨论。1材料和方法1.1材料安康家兔，雌雄兼用，体重2.03.0kg,由三峡大学实验动物中心提供。皱皮木瓜取自湖北长阳资丘，由三峡大学天然药物重点实验室汪鋆植教授鉴定。皱皮木瓜总黄酮FL由三峡大学化生学院提供，制备过程参照文献3以ADS-17大孔树脂纯化即得FL，临用时用双蒸水配制相应浓度备用。氯化乙酰胆碱Aetylhlinehlride，Ah,上海试剂三厂产品。维拉帕米Verapail,Ver购自天津药业集团公司。硫酸阿托品注射液Atrpine,Atr购自武汉远大药业集团公司。ADS-17大孔树脂，南开大学化工厂。其他试剂均为

6、市售分析纯。实验用StandardTyrde液(l/L)：Nal136.9,Kl2.68,al21.80,gl21.05,NaH2P40.42，Gluse5.55。无钙Tyrde液中不加钙而另加0.1l/LEDTA，使之成为含EDTA的无钙液。无钙高钾Tyrde液除无钙外，Kl改为40l/L，替代等l/L的Nal。PerLab离体器官灌流仪澳大利亚。1.2方法取禁食24h家兔,击头致昏后,迅速剪取与十二指肠相连的空肠约2.0和距回盲部约3的回肠1.52.0,用Tyrde液反复冲洗肠腔内容物备用;同时取胃底全层肌标本约22,Tyrde液冲洗干净后,按Vane氏法制备胃底肌条。受试标本分别置于含1

7、0l的Tyrde液(370.5)的浴槽中,pH7.27.4,标本一端连于张力换能器,另一端固定,标本张力负荷1g,实验过程中持续通入95%2+5%2混合气体,标本张力变化通过张力换能器记录于PerLab离体器官灌流仪。实验所用药物浓度均按浴液终浓度计算。统计学处理：数据以s表示,应用SPSS10.0软件,组间比拟用t检验；作图采用SigaPlt2001软件。2结果2.1FL对家兔空肠自主性收缩和Ah诱导收缩的影响空肠在Tyrde液平衡30in后，产生规律而衡定的自主性收缩，参加0.01l/LAh后收缩频率与正常无异，但张力增加约30%，然后分别参加0.2%,0.4%和0.8%FL，记录在不同实

8、验条件下空肠收缩频率和张力的变化，观察10in。结果见表1。2.2FL对al2诱导回肠平滑肌收缩的影响实验方法和条件同2.1项，标本温育后换无钙Tyde液，可见回肠自主性收缩逐渐减弱，当收缩频率和张力明显受抑制后，参加al22.0l/L,可见回肠收缩作用迅速恢复，记录收缩幅度和张力的变化，用无钙Tyde液冲洗标本3次，分别参加0.2%，0.4%和0.8%的FL，5in后同法参加al22.0l/L，比拟给药前后标本对al2收缩作用的影响。结果见表2。表1FL对家兔空肠自主性收缩和Ah诱导收缩的影响略aP0.05vs给药前;bP0.01vs给药前，n=6由表1可见，FL无论是对空肠自主性收缩，还是

9、Ah诱导收缩均剂量依赖性抑制其功能，对收缩频率与收缩张力相比，张力抑制更明显。表2FL对al2诱导家兔回肠平滑肌收缩的影响略aP0.05，vsntrlgrup;bP0.01；n=6由表2可见，当参加不同浓度的FL，再次复钙时，回肠的收缩张力明显减弱,且具有剂量依赖性P0.01,0.8%FL较对照组下降了75%。2.3FL和Atr对Ah致家兔胃底肌条收缩的影响标本在Tyrde中平衡1h后，参加不同浓度的Ah可见胃底肌条产生迅速而短暂的收缩，得Ah累积浓度的量效曲线，用Tyrde液冲洗标本，待肌张力恢复至基线，分别参加0.2%，0.4%，0.8%的FL和0.001l/LAtr,10in后重测Ah量

10、效曲线，结果0.4%，0.8%FL使Ah量效曲线非平行右移，浓度依赖性压低Ah量效曲线，而Atr使Ah量效曲线呈典型的竞争性拮抗,最大反响不压低。见图1。图1FL和Atr对Ah致家兔胃底平滑肌收缩的影响略2.4FL和Ver对al2致家兔回肠收缩的影响回肠标本在无钙Tyrde液中平衡30in，换无钙高钾液稳定30in，建立al2累积浓度依次为0.1，0.5，1.0，2.0，5.0，10l/L量效曲线,其他操作方法同“2.3项。结果FL和Ver均能浓度依赖性使al2量效曲线非平行右移，压低最大反响，Ver的pD2值为7.210.31。3讨论皱皮木瓜为传统中药，应用历史悠久，具有多方面的药理作用，但

11、其中的化学成分复杂，药理作用机制不清。根据以往的研究根底,我们将其中的黄酮作为重点研究对象。植物中的黄酮类化合物具有广泛的药理作用，而植物来源不同又有差异，如银杏黄酮、葛根黄酮、水杉黄酮抗心律失常，预防和逆转心肌肥厚；黄芪和黄芩总黄酮具有保肝及免疫调节作用；甘草黄酮等具有抑制胃肠平滑肌功能等49。皱皮木瓜的胃肠解痉作用早已被中医临床所证实，然而其药理作用机制和有效成分并不清楚。胃肠平滑肌的运动受多种因素的调控，包括神经因素，体液因素和部分激素等,其中神经因素和体液因素是主要因素,然而无论是神经因素,还是体液因素引起胃肠平滑肌收缩,最终均需要依赖胞内a2+介导，细胞内的a2+浓度的调节由细胞膜钙

12、通道、细胞器钙摄取和释放、钙泵及Na+-a2交换系统参与。静息状态下,a2+不能自由通过功能正常的细胞膜。当细胞膜兴奋时,膜特异的钙通道开放,细胞内a2+浓度升高,同时触发细胞内细胞器钙库释放a2+,胞浆内a2+升高到达一定程度(150l/L)时,a2+与肌钙蛋白或肌调蛋白结合,从而产生细胞收缩活动等。对于主要是依外钙而实现收缩(相对于骨骼肌)的胃肠平滑肌,一旦影响了外钙浓度或内流,即会明显影响其收缩活动。实验中发现：FL对复钙后的回肠标本呈浓度依赖性抑制；在无钙高钾Tyrde液中标本引起的收缩为高钾去极化，K+促使电压依赖性钙通道VD开放，胞内细胞器钙库释放a2+所致，经典的钙拮抗剂Ver可

13、阻断这一通道，从而抑制心血管和胃肠功能等，FL对a2+和高钾致肠平滑肌收缩均呈抑制作用，由此说明FL具有与Ver相似的作用,特异性阻断VD，减少外钙内流和内钙释放而松弛平滑迹在与阿托品的对照性实验中，可见FL并非通过阻断胆碱受体而松弛胃肠平滑迹本实验研究为皱皮木瓜用于胃肠解痉提供了理论基矗【参考文献】1杨兴海，柳蔚，钱京萍资木瓜乙醇提取物对胃肠道平滑肌的实验研究J.四川中医，2022，223：19.2柳蔚，杨兴海，钱京萍资木瓜乙醇提取物镇痛抗炎作用的实验研究J.四川中医，2022，228：7.3廖亮.银杏黄酮提取方法的研究J.食品科学，1994,8：33.4耿秀芳,李桂芝,康白,等银杏叶总黄酮对缩血管物质活性的影响J.潍坊医学院学报，2000，22(3)：192.5刘赛,苏冬梅,王春波,等葛根总黄酮对离体家兔主动脉平滑肌的作用J.青岛医学院学报，1998，34(3):191.6刘维莞,杨晓茹,屠治本,等水杉总黄酮抗实验性心肌肥厚及