天贞子胶囊对血小板聚集和血栓形成的抑制作用

1、天贞子胶囊对血小板聚集和血栓形成的抑制作用【摘要】目的研究天贞子胶囊(简称TZZ)对血小板聚集与血栓形成的影响。方法比浊法测定TZZ体外和灌胃给药对大鼠血小板聚集的影响，采用动-静脉旁路血栓形成法制作大鼠血栓模型，观察TZZ对血栓形成的作用。结果灌胃给药TZZ0.75g/kg，1.5g/kg及体外给药TZZ2g/l和4g/l，对ADP和凝血酶诱导的大鼠血小板聚集均有显著抑制作用(P0.01)；明显降低大鼠血栓形成湿重(P0.01)。结论TZZ能明显抑制血小板聚集与大鼠血栓形成。【关键词】天贞子胶囊天麻女贞子血小板聚集血栓形成Abstrat：bjetiveTinvestigatetheeffet

2、fTianzhenziapsule(TZZ)nplateletaggregatinandthrbsisanditsehanis.ethdsTheeffetfTZZnthrbsisasbservedinratsiththethrbgenesisdelfartery-vEinbypass.PlateletaggregatinasinduedrespetivelybyADP,andthrbinasdeterined.ResultsTZZuldarkedlyinhibittherat(invitr)andrabbit(inviv)plateletaggregatininduedbyADPrthrbin

3、.TZZ0.75g/kgand1.5g/kgsignifiantlyinhibitedtheratthrbsisfartery-veinbypass.nlusinTZZaninhibittheplateletaggregatinandthrbsis.Keyrds：Tianzhenziapsule;Plateletaggregatin;Thrbsis血栓形成的原因复杂，与血小板聚集亲密相关。天贞子胶囊TZZ是在苗药验方根底上研制的药物，主要由兰科植物天麻GastrdiaelataBI，木樨科植物女贞子LigustruluiduAit等组成。天麻具有熄风、祛麻木等成效。化学成分有天麻素、苷元等，据

4、报道天麻液能对抗大鼠肾上腺素的缩血管效应，显示对微循环障碍有预防及阻止血栓形成等作用1；女贞子可补肝肾，治头晕等症，其含萜类、黄酮类等成分，具有去除自由基、抗脂质过氧化及抗衰老作用等2。本实验观察TZZ防治实验性血栓形成和对血小板聚集的影响。1材料与仪器1.1药品与材料TZZ由贵阳春科药业技术研发提供，0.3g/粒，每克相当于生药6.5g，批号:2022001，临用时蒸馏水溶解,微孔滤膜过滤后备用，调pH至6.5左右，再用蒸馏水稀释到实验所需浓度。阿司匹林(ASP)美国AlfaAesar公司产品，批号：AD4831，临用时用蒸馏水溶解，NaH3调pH至7.0左右。二磷酸腺苷(ADP)华美生物工

5、程公司产品。凝血酶(thrbin,Thr)珠海经济特区生物化学制药厂，国药准字H44023936。1.2仪器LBL-NJ2血液凝聚仪,北京普利生仪器中心。1.3动物SD大鼠，雌雄兼用，体重280300g，购于第三军医大学大坪医实验动物中心，合格证号:2002022。雄性家兔，体重2.63.1kg，本院实验动物中心提供。2方法2.1分组、给药及血栓制模大鼠50只随机均分为5组:生理盐水对照组,ASP组(0.1g/kg),TZZ低(0.375g/kg)、中0.75g/kg、高(1.5g/kg)剂量组，每组10只。灌胃给药1次/d，连续3d，末次给药后1h制模3。大鼠戊巴比妥钠30g/kg静脉麻醉后

6、仰位固定，别离右颈总动脉及左颈外静脉备用。取内径1.5，长12的硅化聚乙烯管，在其中段置入长6的一丝线，管内充满肝素50U/l生理盐水溶液。然后将管两端分别插入左颈外静脉和右颈总动脉，形成颈动脉-颈静脉通路，开放血流15in，迅速取出管内丝线称重，总重量减去丝线原重量，即为血栓湿重。血栓形成抑制率%=生理盐水对照组栓重-给药组栓重/生理盐水对照组栓重100%。2.2血小板聚集的测定2.2.1体外法大鼠麻醉同上，颈总动脉插管取血,参加3.8%的枸橼酸钠抗凝(血抗凝剂=91),离心800r/in，10in，吸上清液即为富血小板血浆PRP。将剩余局部再离心4000r/in,10in，吸上清液制得贫血

7、小板血浆PPP。用PPP将PRP调数为(400450)109/L,待用。取上述调好的PRP200l,分别参加TZZ低浓度(1g/l)、中浓度(2g/l)和高浓度(4g/l)，ASP(1.4l/l)的药液各5l，生理盐水对照组PRP中参加生理盐水5l。37恒温孵育5in,诱导剂ADP(终浓度1.510-2l/l)和Thr(终浓度3U/l)，记录5in聚集曲线，取最大聚集率，计算聚集抑制率。血小板聚集抑制率%=空白管血小板聚集率-给药管血小板聚集率/空白管血小板聚集率100%。2.2.2体内法家兔35只，分组及给药同“2.1项，每组7只，测定方法同“2.2项。2.3统计学处理实验数据均以s表示，用

8、t检验判断显著性。3结果3.1TZZ对大鼠血栓形成的影响与生理盐水对照组比拟，TZZ0.75g/kg，1.5g/kg明显抑制大鼠血栓形成，且呈剂量依赖性，抑制率分别为39.12%和48.30%(P0.01)，低剂量那么无明显影响。见表1。3.2TZZ体外给药对大鼠血小板聚集的影响与生理盐水对照组比拟，TZZ2，4g/l明显抑制ADP诱导的血小板聚集，抑制率分别为26.21%，36.47%；对Thr诱导的血小板聚集产生类似的抑制作用。见表2。表1TZZ对大鼠血栓形成的影响略与生理盐水组比拟，*P0.01，n=10表2TZZ体外给药对ADP，Thr诱导大鼠血小板集聚的影响略与生理盐水组比拟，*P0

9、.05，*P0.01；n=73.3TZZ灌胃给药对家兔血小板聚集的影响大鼠灌胃给药，与生理盐水对照组比拟，TZZ0.75g/kg，1.5g/kg对ADP,Thr诱导的血小板聚集产生明显抑制。见表3。表3TZZ灌胃给药对ADP、Thr诱导家兔血小板集聚的影响略与生理盐水组比拟，*P0.01，*P0.01；n=74讨论本实验采用动-静脉旁路血栓形成模型，观察TZZ对血栓形成的影响。结果显示TZZ体内给药可剂量依赖性地减轻血栓的湿重，说明TZZ具有抗血栓形成的作用。体外和体内给药观察到TZZ对ADP，Thr诱导大鼠、家兔血小板集聚产生明显抑制作用，这一作用与其减轻血栓湿重作用呈平行趋势，提示TZZ的

10、抗血栓作用与抗血小板聚集作用具有一致性，说明药物的抗血栓作用与抑制血小板聚集有关。实验选用了两种不同的致聚剂，代表了不同的血小板激活途径。Thr可以激活血小板，表现为伪足生成、颗粒成分减少4；TZZ可能抑制了血小板的这种活化过程。ADP在血小板膜上的受体与腺苷酸环化酶有关5，ADP通过抑制该酶而降低AP，从而使血小板聚集。TZZ是否通过腺苷酸环化酶-AP途径产生抗血小板聚集作用，有待于进一步研究。【参考文献】1罗海,孙中吉.天麻素的根底药理研究和临床应用J.武警医学院学报,2022,16(4):465.2邱蓉丽,李磷.中药女贞子化学与药理研究进展J.中药材，2022,30(7):891.3孔祥英,龚培力.蝙蝠葛酚性碱对