大孔吸附树脂纯化干姜姜酚类成分工艺研究

1、大孔吸附树脂纯化干姜姜酚类成分工艺研究【摘要】目的研究大孔吸附树脂纯化干姜中姜酚类成分的工艺条件及参数。方法以姜酚类成分的精制度为指标，考察大孔吸附树脂对姜酚的吸附性能和洗脱参数。结果最正确工艺条件为树脂类型选用AB-8型；树脂用量是2.25gg-1药材:干树脂；蒸馏水6BV、40乙醇5BV、80乙醇4BV以1BVh-1速度依次洗脱，搜集80乙醇洗脱部位。结论通过大孔吸附树脂富集与纯化，姜油含姜酚34.3%，精制度为357.7%。该法可以较好地纯化干姜姜酚类成分。【关键词】姜酚；干姜；大孔树脂；纯化Abstrat：bjetiveTstudythetehnlgialparaetersfpurif

2、yinggingerlsitharprusresinethdsiththepurityasindexes，theabsrptinharateristisandelutinparaeterserestudiedResultsThebesttehnlgialparaetersisusingarprusresinfAB-8andasashedith6BVfdistilledater，5BVf30ethanland4BVf70ethanl，suessivelyGingerlsasenrihedinthe80ethanlelutinnlusinEnrihedandpurifiedbyarpruresin

3、，thententsfgingersingingerilas34.3andthepurityreahed357.7.StheestablishedethdisfeasibleKeyrds：Gingerls；Zingibers；arpusresin；Purifiatin干姜为姜科植物姜ZingiberffiinaleRse.的枯燥根茎，为常用中药1，始载于?神农本草经?，味辛、性热，有温中散寒、回阳通脉、温肺化饮等成效，常用于脘腹冷痛及寒饮喘咳等症的治疗。干姜主要有效成分有挥发油、姜酚类、二苯基庚烷三大类成分2。其中姜酚是干姜呈多种药理作用的主要功能因子35。本文对大孔吸附树脂纯化干姜姜酚类成分

4、的工艺条件进展了研究。大孔吸附树脂是一类有机高聚物吸附剂，具有吸附快、解吸快、吸附容量大、易于再生等特点，已被广泛应用于天然药物有效成分的纯化和富集。大孔吸附树脂纯化中药有效成分的影响因素可从提取液、树脂类型及性质、洗脱过程3个方面考虑，对其纯化效果可以通过吸附量、解吸率、吸附动力学试验等指标进展综合评价6，7。本研究以姜酚类成分的精制度为指标，通过树脂挑选及洗脱过程各因素考察，确定了大孔吸附树脂纯化干姜姜酚类成分的工艺条件。2方法及结果2.1色谱条件的建立色谱条件：色谱柱为HypersilBDS182504.6，5，大连依利特分析仪器)；流动相为乙腈0.1%磷酸水甲醇55441；检测波长为2

5、80n；柱温为30；流速为1.0lin-1。2.2对照品溶液的配制及标准曲线的制备辣椒素对照品溶液的制备：精细称取辣椒碱对照品适量，置同一量瓶中，加甲醇制成每毫升含辣椒碱0.26g的溶液，即得。系统适应性溶液的制备：分别精细汲取1l辣椒碱对照品溶液及1l供试品溶液混合均匀，即可。标准曲线的制备：精细汲取对照品溶液1，2，4，6，8，10l注入液相色谱仪，按上述条件测定辣椒碱色谱峰面积，以辣椒碱量g为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线。回归方程：Y=551100X-4721.8，r=0.9999，说明辣椒碱在0.262.60g范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。2.3大孔吸附树脂纯化酚

6、酸类成分的工艺条件研究2.3.1树脂的预处理与装柱取大孔吸附树脂用乙醇浸泡24h，乙醇湿法装柱，乙醇洗脱，检测流出的乙醇液，至乙醇液与水混合(15)不呈白色浑浊，再以蒸馏水洗至无醇味。2.3.2大孔吸附树脂类型的选择以吸附量和解吸率为指标，对D101，DA201，D301，D140，AB-8大孔吸附树脂进展考察，以确定纯化干姜姜酚类物质的大孔吸附树脂类型。各类大孔吸附树脂物理性能见表1。表1各类大孔吸附树脂物理性能略精细量取各型树脂干重约1g置150l具塞锥形瓶中，分别精细参加川芎提取液75l(约含生药量0.1gl-1)静置24h，充分吸附后，滤过，测定滤液中剩余姜酚量，计算吸附量；将吸附平衡

7、后的树脂转移至锥形瓶中，用100l95%的乙醇解吸，测定解吸液中姜酚的含量，计算解吸率。见表2。表2各类大孔吸附树脂对姜酚的吸附量和解吸率略吸附量=上样液中姜酚量g-泄漏液中姜酚量(g)解吸率(%)=解吸液姜酚量g/吸附量g100%由表2可知，考察的几种大孔吸附树脂中，AB-8大孔吸附树脂有最大吸附量和最大解析率，分别为39.64g和91.62%，应选择AB-8大孔吸附树脂纯化干姜姜酚类物质。转贴于论文联盟.ll.2.3.3上柱药液浓度确实定量取一定体积的药液，分别稀释成不同浓度，通过装有约6gAB-8树脂的吸附柱中，以23lin-1流速进展吸附，搜集流出液，测定姜酚量，计算树脂比吸附量见表3

8、。表3上样液浓度考察略结果说明，上柱药液生药浓度为0.15gl-1时，AB-8大孔吸附树脂对姜酚的比吸附量最大，故确定上柱药液生药浓度为0.15gl-1。2.3.4比上柱量确实定比上柱量表示达吸附终点时，单位质量干树脂吸附夹带成分的总和，表示树脂吸附、承载的总体才能，比上柱量越大那么树脂的承载才能越强。将总体积为120l的药液生药0.15gl-1通过约6gAB-8型树脂柱，以23lin-1的流速进展动态吸附，分段搜集流出液，每份10l。测定流出液中姜酚量，绘制动态泄漏曲线见图1，由泄露曲线确定比上柱量为2.25gg-1药材:干树脂。2.3.5洗脱溶媒确实定按上述确定的工艺条件，精细量取上样药液

9、90l生药0.15gl-1，依法上柱，先用蒸馏水6BV洗脱，再依次用30乙醇，50乙醇，60乙醇，70乙醇，80乙醇，95乙醇各5BV洗脱，搜集洗脱液，测定姜酚量及固形物量，计算洗脱率。见表4。洗脱率(%)=洗脱液中姜酚量(g)/树脂吸附姜酚量(g)100%。表4不同浓度乙醇洗脱实验数据略结果说明，50%以上浓度的乙醇都可将姜酚不同程度的洗脱下来，且80乙醇能将大局部姜酚洗脱下来，故确定以80乙醇作为干姜姜酚类成分的洗脱溶媒；蒸馏水、30乙醇洗脱时均有一定量的固形物存在，说明蒸馏水、30乙醇洗脱到达纯化了姜酚类成分。2.3.6洗脱溶媒用量确实定精细汲取上样药液生药0.15gl-190l，按上述

10、确定工艺依法上柱，依次用蒸馏水、30%乙醇，80乙醇各6BV洗脱，洗脱速度为23lin-1，以1BV/份搜集流份。测定各流份中姜酚含量及固形物量，计算洗脱率。见表5。表5洗脱溶媒用量实验数据略结果说明，40乙醇洗脱时，在流份中未检出姜酚类成分，而固形物量较高，说明40乙醇洗脱可到达除杂质的目的，当40乙醇用量至5BV，几乎无固形物说明溶于40乙醇的杂质已除去，故确定40乙醇用量为5BV；80乙醇洗脱用量至4BV时，姜酚已根本被解吸附完全。故确定洗脱溶媒用量为蒸馏水6BV、40乙醇5BV、80乙醇4BV，搜集80乙醇洗脱部位。综上所述，初步确定最正确工艺为AB-8大孔吸附树脂纯化干姜中姜酚类成分

11、，蒸馏水6BV、40乙醇5BV、80乙醇4BV以1BVh-1速度依次洗脱，搜集80乙醇洗脱部位。2.4工艺验证实验上述确定的工艺条件，量取3份0.15gl-1药液90l进展验证实验。结果见表6。精制度%=(80%乙醇洗脱液固形物中姜酚含量/上柱液固形物中姜酚含量)100上柱液固形物中姜酚含量为9.6%。表6大孔树脂纯化工艺验证实验数据略结果说明，干姜提取物经大孔树脂纯化后有效地降低了固形物的含量，进步了姜酚的含量，且该工艺稳定、可行。3讨论目前，虽已有文献报道8，9采用大孔树脂别离纯化干姜总姜酚，但尚未对其制备工艺进展系统深化的研究，且使用甲醇或正己烷-乙醇洗脱，以上洗脱剂价格昂贵且毒性大，不

12、适于工业消费。本实验选用不同浓度的乙醇洗脱，并且对干姜大孔树脂吸附纯化工艺进展了深化的研究，选取了5种树脂进展实验，挑选出吸附别离纯化姜酚的最正确树脂为AB-8大孔吸附树脂；对AB-8大孔吸附树脂别离、富集总姜酚的性能、洗脱参数等进展了研究，挑选出了AB-8大孔吸附树脂纯化干姜总姜酚的工艺参数。【参考文献】1国家药典委员会.中国药典，部S.北京：化学工业出版社，2022:66.2王颖，李东伟.生姜的研究进展J.中国药业，2022，159：52.3陈燕，倪元颖.生姜提取物精油与油树脂的研究进展J.食品科学,2000,21(8):6.4黄雪松，宴日安，吴建中.姜酚的生物活性述评J.暨南大学学报(自然科学与医学版)，2022,26(3):434.5蒋苏贞，宓穗卿，王宁生.姜酚心血管药理作用研究进展J.时珍国医国药，2022，8(1):219.6刘友平，鄢丹，秦春梅.大孔吸附树脂纯化