卫生微生物学课件：第四章 微生物危害的预防与控制

1、第四章 微生物危害的预防与控制学习目标消毒与灭菌感染性疾病特异性预防生物战剂伤害的防护掌握消毒与灭菌的基本概念及要求；消毒灭菌的基本方法、适用范围及影响因素特异性预防免疫的分类及特异性预防免疫制剂的种类与应用生物战剂与生物恐怖的概念；生物战剂伤害特点及流行病学特征；生物战剂的防护熟悉消毒灭菌的要求，各种消毒灭菌方法的原理，消毒剂应用剂量生物战剂防护的原则了解消毒液的污染问题和消毒剂杀菌效果；消毒灭菌在控制传染病中的作用免疫预防在控制传染病中的作用生物战剂种类和特点微生物危害的预防与控制的应用与前景第一节 消毒与灭菌消毒与灭菌的基本概念及要求消毒与灭菌效果的评价消毒与灭菌方法消毒与灭菌效果的影响

2、因素消毒与灭菌效果的评价与保证消毒与灭菌效果的监测消毒灭菌方法的选择一、消毒与灭菌的基本概念及要求清洁指能减少微生物附着在无机物体表面的数量的方法，达到人类可以接受的水平，以满足公众健康需要清洁是消毒与灭菌的前提：留在器械表面的有机物和无机物会影响消毒和灭菌的效果 消毒的基本概念及要求消毒(disinfection)用物理、化学或生物学的方法杀灭或清除传播媒介上的或环境中的病原微生物，使其达到无害化的处理消毒处理的重点是病原微生物，以达到保护暴露人群不受感染的目的抗菌(antibacteria)杀灭、抑制或阻止微生物生长繁殖的处理防腐(antisepsis)防止或抑制病原微生物和其他有害微生物

3、生长繁殖，以防止其腐败的处理消毒措施多用于卫生防疫、医疗器械和环境等的处理依应用场所疫源地消毒医院消毒公共场所消毒家庭消毒个人消毒食品厂消毒实验室消毒石油工业的消毒农业的消毒疫区消毒疫点消毒疫源地消毒(disinfection of epidemic focus)对存在着或曾经存在过传染源的场所进行的消毒；目的是杀灭或清除传染源排出的病原微生物；传染病病房、传染病患者家庭消毒随时消毒(concurrent disinfection)：疫源地内有传染源存在时进行的消毒；目的是及时杀灭或清除病人排出的病原微生物；传染病病人住院期间进行的病室或床边消毒终末消毒(terminal disinfecti

4、on)：传染源离开疫源地(包括传染源出院、转移、死亡而离开疫点或终止传染状态)后进行的彻底消毒；目的是完全消灭传染源所播散的、遗留在居室和各种物体上的活的病原体，使疫点无害化；医院内的感染症病人出院、转院或死亡后对其住过的病室及污染物品进行的消毒预防性消毒(preventive disinfection)对可能受到病原微生物污染的物品和场所进行的消毒医院的医疗器械、诊疗用品的消毒；一般病人住院期间和出院后进行的消毒；公共场所、粪便污水处理等医院消毒(disinfection in hospital)杀灭或清除医院环境中和媒介物上污染的病原微生物的过程预防和控制医院感染的重要手段工业消毒(dis

5、infection in industry)在工业生产中防止产品染菌所进行的消毒防止产品作为传染病的传播媒介，防止产品被微生物损坏等医疗器械、医疗用品；制药、生物制品；食品等消毒合格指标根据我国消毒技术规范规定，消毒需要达到的要求去除残留消毒剂效果的鉴定试验合格：应使用化学中和剂或其他残留消毒剂去除法中和或去除残留的消毒剂，并且不影响指示菌的使用标准消毒试验菌株和试验方法进行检测 消毒产品的实验室试验结果符合下列相应条件悬液定量杀菌试验，每次实验对标准试验菌株的杀灭对数值5.0(杀灭率 99.999%)；对照组微生物数在规定的范围内载体定量杀菌试验，每次试验对标准试验菌株的杀灭对数值 3.0(

6、杀灭率 99.9%) ；对照组微生物数在规定的范围内消毒模拟现场试验，每次试验对试验微生物的杀灭对数值3.0，对照组微生物数在规定的范围内现场试验，对消毒对象上自然菌的杀灭对数值 1.0(杀灭率 90%)，同时不得检出病原微生物，并且残留细菌数不超过国家卫生标准的规定为消毒合格 消毒产品用于饮用水消毒时，要求处理过的水符合饮用水卫生标准残留消毒剂的去除除药的原则可有效去除残留的消毒剂对微生物无害，不减少微生物应有的回收量不破坏培养基的营养成份，不影响其透明度必须按规定方法进行鉴定试验，并认为合格者方可在相应的消毒试验中使用残留消毒剂的去除除药的方法化学中和法过滤冲洗法：多用于难以找到适宜中和剂

7、的消毒剂试验中稀释法中和剂鉴定试验组设计1消毒剂 + 菌悬液观察消毒剂对试验菌有无杀灭或抑制能力2(消毒剂 + 菌悬液) + 中和剂观察残留消毒剂被中和后受到清毒剂作用后的试验菌是否能恢复生长3中和剂 + 菌悬液 观察中和剂是否抑菌4(消毒剂 + 中和剂)+ 菌液观察中和产物，或未被完全中和的残留消毒剂对试验菌的生长繁殖是否有影响5稀释液 + 菌悬液作为菌数对照6稀释液 + 中和剂作为阴性对照中和剂鉴定试验中和剂判为合格：第 1 组无试验菌，或仅有极少数试验菌菌落生长第 2 组有较第 1 组为多，但较第 3、4、5（组）为少的试验菌菌落生长，并符合下表要求者第 3、4、5（组）有相似量试验菌生

8、长、第6组无菌生长连续 3 次试验取得合格评价中和剂鉴定试验合格标准中对第 1 组与第 2 组菌落数的要求第 1 组平板平均菌落数第 2 组平板平均菌落数05X（110）（X + 5）Y（10）（Y + 0.5 Y）消毒合格指标根据我国消毒技术规范规定，消毒需要达到的要求去除残留消毒剂效果的鉴定试验合格：应使用化学中和剂或其他残留消毒剂去除法中和或去除残留的消毒剂，并且不影响指示菌的使用标准消毒试验菌株和试验方法进行检测 消毒产品的实验室试验结果符合下列相应条件悬液定量杀菌试验，每次实验对标准试验菌株的杀灭对数值5.0(杀灭率 99.999%)；对照组微生物数在规定的范围内载体定量杀菌试验，每

9、次试验对标准试验菌株的杀灭对数值 3.0(杀灭率 99.9%) ；对照组微生物数在规定的范围内消毒模拟现场试验，每次试验对试验微生物的杀灭对数值3.0，对照组微生物数在规定的范围内现场试验，对消毒对象上自然菌的杀灭对数值 1.0(杀灭率 90%)，同时不得检出病原微生物，并且残留细菌数不超过国家卫生标准的规定为消毒合格 消毒产品用于饮用水消毒时，要求处理过的水符合饮用水卫生标准消毒剂消毒效果评价用指示微生物化脓性球菌代表：金黄色葡萄球菌ATCC6538肠道菌代表：大肠埃希菌8099人结核分枝杆菌的代表：龟分枝杆菌脓肿亚种ATCC93326医院感染中最常分离的细菌繁殖体代表：铜绿假单胞菌ATCC

10、15442空气中细菌代表：白色葡萄球菌8032细菌芽胞代表：枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC9372致病性真菌代表：白假丝酵母菌ATCC10231、黑曲菌ATCC16404病毒代表：脊髓灰质炎病毒型疫苗株杀灭试验中微生物的选择 消毒对象微 生 物 的 种 类 金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌大肠埃希菌白色念珠菌黑曲霉菌白色葡萄球菌龟分枝杆菌脓肿亚种枯草杆菌黑色变种芽胞脊髓灰质炎病毒手+皮肤和黏膜 +足+空气+医疗器械和用品(灭菌与高水平消毒) +医疗器械和用品(中水平消毒) +医疗器械和用品(低水平消毒) +一般物品表面和织物+食(饮)具 +饮水和游泳池水 +瓜果、蔬菜 +消毒灭菌效力的确认实验室实验：

11、杀灭实验悬液定量杀灭试验载体浸泡定量杀灭试验载体喷雾定量杀菌实验载体定性法 模拟现场现场实验悬液定量杀灭试验菌种细菌悬液制备活菌培养计数残留消毒剂的去除悬液定量杀菌试验悬液定量杀菌试验试验组消毒产品鉴定：试验菌；一个消毒剂浓度(即产品使用说明书中指定的最低浓度)；3个作用时间(说明书指定最短作用时间，指定最短作用时间的0.5倍，指定最低作用时间的1.5倍)消毒产品监督机构日常监测：一株抗力较强的菌；一个消毒剂浓度(即产品使用说明书中指定的最低浓度)；一个作用时间(说明书指定最短作用时间)阳性对照组：用稀释液代替消毒剂溶液杀灭对数值 (KL)对照组平均活菌浓度(No)的对数值试验组活菌浓度(Nx

12、)的对数值消毒与灭菌指标值杀灭率 KR消毒处理杀灭微生物的百分率KR=(No - Nx)/ No 100%杀灭对数值 KL指消毒处理杀灭微生物数的对数KL= lgNo lgNx灭活指数指灭菌处理后微生物减少的程度，以处理后微生物存活数除原始微生物数，结果化为10的乘方形式D值指杀菌因子每杀灭90%微生物个体或使原存活微生物降低到1/10所需的时间(min)是反映杀菌速度快慢的参数杀灭对数值定量杀菌试验的评价规定产品监督检验：重复试验3次；要求悬液定量杀灭试验中，各次的杀灭对数值均5.00，可判定为消毒合格；要求载体定量杀灭试验，各次的杀灭对数值均3.00，可判定消毒合格产品申报卫生许可检验：重

13、复试验3次；在产品指定最低浓度与最短作用时间，以及最短作用时间的1.5倍时，要求悬液定量杀灭试验中各次的杀灭对数均应5.00，可判定为消毒合格； 要求载体定量杀灭试验中，各次的杀灭对数均应3.00，可判定为消毒合格；在产品指定浓度与最短作用时间的0.5倍时，可容许对不同细菌或在部分重复次数中，出现不合格结果定量杀菌试验的评价规定对载体浸泡定性灭菌试验，阳性对照组应有菌生长，菌数对照组符合要求，阴性对照组应无菌生长，5次试验所有作用时间均无菌生长为灭菌合格报告中应将各此试验的结果全部以表格的形式列出：阳性对照组应列出各次试验菌浓度，以及平均试验菌浓度；试验组应列出杀灭对数值，杀灭对数值大于5.0

14、0时，应表示为5.00，而不必列出具体的数字，杀灭对数值小于5.00时，应列出具体的数字消毒合格指标根据我国消毒技术规范规定，消毒需要达到的要求去除残留消毒剂效果的鉴定试验合格：应使用化学中和剂或其他残留消毒剂去除法中和或去除残留的消毒剂，并且不影响指示菌的使用标准消毒试验菌株和试验方法进行检测 消毒产品的实验室试验结果符合下列相应条件悬液定量杀菌试验，每次实验对标准试验菌株的杀灭对数值5.0(杀灭率 99.999%)；对照组微生物数在规定的范围内载体定量杀菌试验，每次试验对标准试验菌株的杀灭对数值 3.0(杀灭率 99.9%) ；对照组微生物数在规定的范围内消毒模拟现场试验，每次试验对试验微

15、生物的杀灭对数值3.0，对照组微生物数在规定的范围内现场试验，对消毒对象上自然菌的杀灭对数值 1.0(杀灭率 90%)，同时不得检出病原微生物，并且残留细菌数不超过国家卫生标准的规定为消毒合格 消毒产品用于饮用水消毒时，要求处理过的水符合饮用水卫生标准灭菌的概念及要求灭菌(sterilization)指用化学或物理方法杀灭或清除物体上所有微生物的方法，使之达到无菌水平是一个绝对的概念，灭菌处理后的物品必须是完全没有微生物存活，包括杀灭细菌芽胞在内的全部微生物错误说法：基本灭菌、部分灭菌严格意义：无菌、无毒、无热原质、无变应原等；彻底清洗是前提灭菌剂、灭菌器与灭菌相关的其他概念无菌(asepsi

16、s)不含活的微生物，往往是灭菌处理的结果在实践中要达到如此绝对意义上的无菌很难无菌操作(aseptic technique)：防止微生物进入人体或其他物品的操作技术；外科手术、微生物实验商业无菌(commercial sterilization)：杀灭食品中所污染的病原菌、产毒菌以及正常贮存和销售条件下能生长繁殖并导致食品变败的腐败菌，从而保证食品正常的货架寿命；无病原菌、产毒菌，仍可能存在少量的耐热芽胞灭菌合格标准微生物存活概率：微生物的种类和数量、灭菌加工的杀菌能力、环境灭菌保证水平(sterility assurance level, SAL)， 10-n灭菌处理后单位产品上存活微生物的

17、概率一般SAL不得高于10-6，即一百万件产品中可能存在活微生物的概率为1灭菌是否合格通过灭菌试验和无菌检测来确定一般以无菌试验方法检测细菌和真菌有无存活来判定消毒灭菌中常用生物指示剂灭菌方法常用的生物指示剂干热灭菌法枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC9372 湿热灭菌法嗜热脂肪杆菌芽胞 ATCC795360Co-射线辐射灭菌法短小芽胞杆菌ATCC27142紫外线消毒枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC9372；大肠杆菌ATCC25922过滤除菌法缺陷假单胞菌ATCC19146环氧乙烷气体灭菌法枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC9372过氧化氢气体灭菌法嗜热脂肪杆菌芽胞 ATCC7953二、消毒与灭菌的方法物理消

18、毒与灭菌方法化学消毒与灭菌方法生物消毒与清洗方法利用动物、植物、微生物及其代谢产物杀灭或去除微生物植物源消毒剂、抗菌肽、噬菌体、生物酶等，如复合溶菌酶水体、土壤、废物等生物净化物理消毒与灭菌方法首选方法杀菌效果可靠，性能稳定可准确控制剂量对自然环境无污染便于生产、便于管理热力、紫外线、电离辐射、滤过除菌、微波、脉冲强光等1、热力：湿热与干热灭菌法比较湿热灭菌法干热灭菌法杀菌机制使菌体蛋白质变性和凝固；使细菌核酸降解；使细菌胞质损伤使菌体蛋白质氧化、变性、炭化；电解质浓缩引起细胞中毒及对核酸的破坏热传导介质水或蒸汽空气损坏物品比较轻比较明显适应对象各种不怕热的物品金属和玻璃器材潜热 存在无热穿透

19、力较强弱于湿热作用温度80130160180 杀菌速度较快较慢常用消毒与灭菌方法 煮沸消毒、流通蒸汽消毒、巴氏消毒、压力蒸汽灭菌等 干烤、红外线照射、烧灼、焚烧等 干热消毒与灭菌法焚烧最彻底的灭菌方法 适用于对废弃污染物品、病人的尸体、动物尸体、无用的衣物、纸张、垃圾、污染的杂草等的消毒可直接点燃或在焚烧炉内焚烧烧灼主要用于微生物学实验室的接种针、接种环、涂菌棒等不怕热的金属器材的灭菌烧灼灭菌温度很高，效果可靠，但对灭菌器械有破坏性干热消毒与灭菌法干烤耐高温忌湿热物品：玻璃制品、陶瓷制品、油剂(如甘油)等干烤灭菌的温度和维持时间应根据消毒和灭菌对象确定有机物炭化红外线照射 医疗器械、食具干烤灭

20、菌时间-温度关系炉温/灭菌时间/ha炉温/灭菌时间/ha1800.51502.51701.01403.01602.0a.灭菌时间指的是物品到达指定温度后的消毒时间，并不包括加热时间。电热鼓风干燥箱干热灭菌效果的监测物理监测法：间接测试多点温度检测仪(热电偶温度计)：多个探头、灭菌器各层内、中、外各点；温度上升与持续时间，温度曲线达到预置温度-灭菌温度合格化学监测法：间接测试化学指示剂(指示温度和温度持续时间)35个分别放入待灭菌物品内，置于灭菌器最难达到灭菌的部位经一个灭菌周期后，据化学指示剂颜色及性状的改变判断是否达到灭菌效果：颜色和性状均变至规定的标准，则判为达到灭菌要求；若其中之一未达到

21、规定的标准，则判为未达到灭菌要求生物监测法：直接测定灭菌效果医疗机构自检时，一般为每月1次 应在满载的条件下进行：满载与否，灭菌效果差异较大指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽胞(ATCC9372)菌片含菌量为5.01055.0106cfu/片，其抗力应符合以下条件：温度1602时，D值为1.31.9min，杀灭时间19min，存活时间3.9min在灭菌器每层门把手对角线的内、外角处各放置2个含菌片的试管；经一个灭菌周期后，无菌操作取出试管菌片培养：普通营养肉汤培养基；361培养48h，观察初步结果，无菌生长管继续培养至第7日 存活时间(survival time，ST)指受试微生物样本经杀菌因子作用

22、后，经培养全部有菌生长的最长作用时间(min)杀灭时间(killing time，KT)受试微生物样本经杀菌因子作用后，经培养全部无菌生长的最短作用时间(min) 结果判定若每个指示菌片接种的肉汤管均澄清，判为灭菌合格若指示菌片之一接种的肉汤管混浊，判为灭菌不合格对难以判定的肉汤管，取0.1ml接种于营养琼脂平板，用灭菌L棒涂匀，放361培养48h，观察菌落形态，并作涂片染色镜检，判断是否有指示菌生长，若有指示菌生长，判为灭菌不合格，若无指示菌生长，判为灭菌合格湿热消毒与灭菌法煮沸消毒家庭卫生消毒、紧急医疗救助时方法简便、经济实用，效果也比较可靠适用于消毒食具、食物、棉织品、金属、玻璃制品等耐

23、热耐湿物品；塑料、毛皮、化纤织物等怕热制品则不能用煮沸法消毒流通蒸汽消毒常压、100流通蒸汽，3060min蒸笼、Arnold消毒器不能保证杀灭所有芽胞常用于食品、食具消毒和其他一些不耐高热物品、制剂的消毒 湿热消毒与灭菌法巴斯德消毒法(Pasteurization)加热至61.162.3之间，至少保持30min加热至71.7，保持至少15s既杀死病菌又能保持营养物质风味不变，广泛用于牛奶的消毒可用于血清的消毒和疫苗的制备超高温瞬时灭菌技术(ultra high temperature sterilizing, UHT)135150，28s；达到商业无菌要求牛奶、果汁、酸奶、葡萄酒牛奶专用红外

24、线电脑超高温瞬时灭菌机湿热消毒与灭菌法压力蒸汽灭菌法使用最普遍、效果最可靠适用于耐高温、耐湿热物品的灭菌压力蒸汽灭菌器：冷空气的排除方式下排气式：下部设有排气孔，用以排出内部的冷空气；装载量80%；手提式、立式和卧式预真空式：通入蒸汽前先抽真空，以利蒸汽穿透；不适用于瓶装液体的灭菌预真空式：“小装量效应”脉动真空湿热(饱和蒸汽)灭菌时间-温度关系温度/灭菌时间/mina13441261512120a.灭菌时间指的是物品到达指定温度后的消毒时间，不包括加热时间压力蒸汽灭菌效果监测为蒸汽的穿透创造良好条件：必须注意排除空气，保证蒸汽饱和度(85%)灭菌成功与否：温度、作用时间和热穿透的条件等是否合

25、乎要求程序监测/工艺监测压力、温度和时间记录物品的清洁去污、包装装载、灭菌与灭菌后的处理等化学监测：适用于日常灭菌监测生物监测：适用于医疗卫生等机构自检对日常使用的灭菌器和灭菌工艺的定期监测(每月1次) 对新灭菌设备效果的监测，对新包装容器、存放方式、排气方式与新灭菌工艺的鉴定，仪器设备大修后的验收化学监测化学指示胶带监测法将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外，经一个灭菌周期后，观察其颜色的改变，以指示是否经过灭菌处理；区别已灭菌物品与未灭菌物品，但不能表示包内物品达到规定灭菌剂量的处理化学指示卡(管)监测法既能指示温度又能指示温度持续作用时间的化学指示卡(管)放入大包和难以消毒部位的物品包

26、中央，经一个灭菌周期后，取出指示卡(管) ，根据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件；表明经灭菌规定剂量的处理，但不能确保微生物的杀灭已达灭菌要求B-D试验指示图预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌空气排除效果将指示图置于标准敷料包内的中层，处理后指示图变色均匀而完全，说明预真空效果良好；1次/天，一般多在每天第一次结果判定若其中之一未达到规定的标准，则灭菌过程不合格生物监测指示菌株耐热的嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC7953或SSIK31)菌片含菌量为5.01055.0106cfu/片在1210.5条件下，D值为1.31.9min，杀灭时间19min，存活时间3.9min培养基：溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水

27、培养基标准试验包中心部位处理后(561)培养48h观察初步结果，生物指示管则在56培养1224h，观察颜色变化；7日后观察最终结果 结果判定每个指示菌片接种的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨液培养基都不变色，判定为灭菌合格指示菌片之一接种的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨液培养基，由紫色变为黄色时，则灭菌过程不合格 432、紫外线紫外线UV：非电离辐射，100400nm用于消毒的紫外线主要位于C波段200280nm，杀菌作用最强波段250270nm，目前紫外线灯所采用的波长253.7nm机制：使DNA链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合而形成二聚体，影响核酸复制；破坏菌体蛋白质和糖类成分；产生自由基，损伤菌体操作方便，杀菌

28、谱广穿透力差，反射率低，影响因素多；阴影效应适用于对平坦光滑的表面、室内空气、水及其他液体的消毒杀菌波长紫外线对人体皮肤和眼睛有损伤作用-注意防护紫外线消毒效果监测物理监测测定紫外线辐照度值：了解紫外线灯管性能及计算消毒中使用的剂量紫外线辐照计测定法检测方法：开启紫外线灯5min后，将测定波长为253.7nm的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯管下垂直距离1m的中央处，仪表稳定时所示数据注意事项：测定时电压应稳定在220V5V，温度保持在2025，相对湿度60%；室内保持清洁干净无尘；紫外线灯先用95%乙醇棉球擦拭灯管上的灰尘和油垢，以免影响辐照强度；紫外线辐照计必须在计量部门检定的有效期内使用

29、；不得使紫外线光源直接照射到人体，以免引起损伤结果判定：普通30W直管型紫外线灯，新灯辐照强度90W/cm2为合格；使用中紫外线辐照强度70W/cm2为合格；30W高强度紫外线新灯的辐照强度180W/cm2为合格化学监测测定紫外线辐照度值紫外线强度照射指示卡检测法检测方法：开启紫外线灯5min后，将指示卡置紫外灯下垂直距离1m处，有图案一面朝上，照射1min，观察指示卡图案正中光敏色块的颜色，与标准色块比较，读出照射强度注意事项：指示卡应获卫生许可批件，并在有效期内使用；因指示卡光敏涂料的颜色会随时间发生变化，放置时间过久，指示卡会变淡，应及时记录判断结果；指示卡应用黑色纸包装，置4冰箱内储存

30、，以免光敏涂料遇日光照射不稳定变色，而影响监测结果 结果判定：当指示卡正中光敏色块的颜色变至与周围标有灯管强度(70W/cm2)的标准色块相一致，则判为紫外线灯管合格；当变至与周围某一相应色块相同时，则判定所接受紫外线照射剂量已达到该项消毒要求生物监测一般情况采用自然菌杀灭试验进行检测空气消毒效果监测：自然沉降法；撞击法物体表面消毒效果监测消毒后表面或空气菌落总数不应超过国家规定的卫生标准特殊情况也可采用载体照射定量法进行检测指示微生物：枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC9372；大肠埃希菌8099；含菌量为5.01055.0106cfu/片结果判定：试验组杀灭率均99.90%判为消毒合格注意事项：

31、测试前，应先用95%乙醇棉球擦除紫外线灯管表面灰尘和油垢，并保持室内洁净无尘；测试人员勿直视紫外线灯管，并应穿戴防护衣、手套、眼镜，在有人工作的环境中，空气中臭氧浓度不大于0.2mg/m33、电离辐射属于高频率、具有高能量和穿透力的电磁波高速电子、X射线、射线等常温下可直接破坏微生物的核酸、蛋白质等大分子；产生自由基损伤菌体穿透力强、射程短具有放射性损害-放射病由专门辐照中心进行冷灭菌：适用于忌热物品的消毒或灭菌主要用于大量的一次性医用塑料制品的灭菌外科缝线、手术刀、创口贴等一次性使用器材的灭菌食品、生物制品、药品(激素、抗生素、中药)的消毒灭菌消毒灭菌中常用生物指示剂灭菌方法常用的生物指示剂

32、干热灭菌法枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC9372 湿热灭菌法嗜热脂肪杆菌芽胞 ATCC795360Co-射线辐射灭菌法短小芽胞杆菌ATCC27142紫外线消毒枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC9372；大肠杆菌ATCC25922过滤除菌法缺陷假单胞菌ATCC19146环氧乙烷气体灭菌法枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC9372过氧化氢气体灭菌法嗜热脂肪杆菌芽胞 ATCC79534、微波波长在1mm1m(频率在3003000MHz)的电磁波用于消毒的微波采用915MHz、2450MHz两个专用频率杀菌机制热效应：物体分子受到微波作用后，产生激烈运动并形成偶极子，偶极子在电场中互相摩擦而产生热能，使物体温度升高

33、其他非热效应操作方便、作用速度快，穿透至物品内部，内外同时产热，杀菌作用强，对物品损害小微波消毒时需放入吸收载体如水或其他含湿物体(含湿率在30%50%较合适)，应保证一定的作用功率和作用时间生物体、水及含水材料吸收微波并产生热能转换多用于非金属器械(导管)、食品、食具、药杯等的消毒；可用于口腔科、眼科等一些体积小、结构复杂、需快速灭菌的器械和用品5、滤过除菌通过致密的过滤材料，以物理阻留的原理，去除气体或液体中的微生物-没有杀灭微生物微生物去除效果与过滤材料性质、结构和孔径大小有关常用滤菌器：薄膜滤菌器、陶瓷滤菌器、石棉滤菌器、烧结玻璃滤菌器、硅藻土滤菌器0.45m：颗粒和大多数细菌类微生物

34、0.22m：细菌、支原体、衣原体、病毒等不耐高温的血清、细胞培养液、毒素、抗生素、药液、生物酶制剂等空气：高效空气过滤器(生物安全柜、洁净手术室或病房)饮用水6、脉冲强光瞬间放电的脉冲强光安全、强效、节能的新型冷灭菌技术包装外表面、空气、水处理、食品加工7、干燥与低温抑菌保存食物以防食物变质菌种保存：冷冻真空干燥法化学消毒与灭菌法化学消毒法优缺点使用方便，无特殊设备适用范围广，各种物品、空气、水、人体和环境等均可使用节约，一次性投资少使用方法多样，可浸泡、擦拭、刷洗、喷雾、熏蒸以及与物理因子协同等存在毒性、腐蚀性、有污染环境的可能性 微生物对化学因子的抗力朊粒细菌芽胞 分枝杆菌 无包膜病毒真菌

35、包括酵母与霉菌细菌繁殖体有包膜的病毒 强 弱按消毒剂作用水平高效(水平)消毒剂 high-level disinfectant可杀灭所有种类微生物，包括细菌的芽胞，达到消毒合格要求戊二醛、过氧乙酸、过氧化氢、二氧化氯、含氯消毒剂等中效(水平)消毒剂 intermediate-level disinfectant可杀灭细菌繁殖体(包括结核杆菌)、大多数种类的病毒与真菌，达到消毒合格要求含碘消毒剂、醇类、酚类消毒剂等低效(水平)消毒剂 low-level disinfectant可杀灭大多数细菌繁殖体(分枝杆菌除外)、一些种类的病毒(有包膜病毒)与真菌，达到消毒合格要求季铵盐类、胍类消毒剂、植物类

36、消毒剂、金属离子消毒剂等按消毒剂化学成分与特性醛类过氧化物类含氯消毒剂含碘消毒剂醇类酚类表面活性剂：季铵盐类；胍类消毒剂重金属盐类按杀灭微生物的作用机制使菌体蛋白变性或凝固干扰细菌的酶系统和代谢损害细菌的细胞膜，增加其通透性，使胞质内容物溢出一种消毒剂对微生物的杀灭可能会通过多重作用同一种消毒剂在不同浓度下，对微生物的杀灭机制也会有所不同1、醛类：甲醛、戊二醛、邻苯二甲醛凝固蛋白质，还原氨基酸，使蛋白质分子烷基化戊二醛2%碱性戊二醛、2%强化酸性戊二醛、2%强效中性戊二醛特点：杀菌谱广，尤其是具有强大的杀芽胞作用 在有机物存在的情况下仍有较强的杀菌活性 对金属、橡皮、镜片和大多数物质无腐蚀性

37、杀菌作用快、使用简便具有较强刺激性与毒性不耐高温、不耐腐蚀医疗器械和精密仪器的首选消毒剂：内镜、呼吸机管道、麻醉装置等浸泡法：灭菌，2%戊二醛，10h；消毒，2%戊二醛，2045min2、过氧化物类过氧乙酸、过氧化氢、二氧化氯、臭氧强大的氧化能力破坏蛋白质的分子结构优点：杀菌谱广、杀菌力强、杀菌时间短 易溶于水 分解后生成无毒成分，无残留毒性缺点：性质不稳定、易分解 未分解前有刺激性或毒性 对物品有漂白或腐蚀作用过氧乙酸广谱、高效、快速、低毒性、低残留缺点：对金属及织物有腐蚀性，受有机物影响大，稳定性差影响因素：作用浓度和时间；温度；pH；有机物传统一元液体制剂、稳定型一元液体制剂、二元液体制

38、剂、固体制剂使用方法：浸泡、擦拭、喷洒适用范围：耐腐蚀物品、环境及皮肤等的消毒；广泛用于各种物品表面的消毒；可用于空气消毒 58过氧化氢特点：广谱、高效、速效、无毒、对金属和织物有腐蚀性，受有机物影响大，纯品稳定性好，稀释液不稳定影响因素：pH；温度；有机物适用范围：丙烯酸树脂制成的外科埋植物、隐形眼镜、不耐热的塑料制品、餐具、服装、饮水、空气等消毒；口腔含漱、外科伤口清洗使用方法：浸泡、擦拭、喷雾、熏蒸汽化过氧化氢消毒器59二氧化氯广谱、高效、速效杀菌对金属有腐蚀性，对织物有漂白作用，受有机物影响大，二氧化氯活化液和稀释液不稳定影响因素：pH；温度；有机物稳定型二氧化氯制剂：液体剂型、固体二

39、元剂型和固体一元剂型；使用前活化剂活化适用范围：医疗卫生用品、食品加工、餐(饮)具、生活饮用水及环境表面消毒 使用方法：浸泡、擦拭、喷洒；饮水消毒气体二氧化氯消毒设备603、含氯消毒剂高效消毒剂特点：广谱、高效、低毒，有强烈刺激性气味，对金属有腐蚀性，对织物有漂白作用，受有机物影响大，消毒液不稳定杀菌作用决定于次氯酸的浓度：有效氯(与含氯消毒剂氧化能力相当的氯量；衡量含氯消毒剂氧化能力的标志；碘量法)影响因素：pH；浓度；温度；有机物无机类含氯消毒剂：漂白粉、次氯酸钠、氯化磷酸三钠等有机类含氯消毒剂：二氯异氰尿酸钠（优氯净）、三氯异氰尿酸等适用范围：餐(饮)具、环境、医院污水、疫源地等消毒使用

40、方法：浸泡、擦拭、喷洒、干粉消毒614、含碘消毒剂中效消毒剂碘伏、碘酊、碘液、碘甘油碘伏碘与表面活性剂及碘化钾共同形成的不定型络合物，延长了碘的杀菌作用时间中效、速效、低毒，对皮肤粘膜无刺激，稳定性好；对铜、铝等金属有腐蚀性，受有机物影响很大影响因素：游离碘浓度；有机物；温度；pH非离子表面活性碘(PVP-1)、阳离子表面活性碘、阴离子表面活性碘适用范围：手、皮肤、粘膜、手术切口部位、伤口创面、注射和穿刺部位等的消毒使用方法：浸泡、擦拭、冲洗 625、醇类消毒剂乙醇：70%85%特点：中效消毒剂；中效、速效、无毒、对皮肤粘膜有刺激性、对金属无腐蚀性，受有机物影响很大，易挥发、不稳定影响因素：浓

41、度；有机物的影响；温度；乙醇与碘、氯己定、季铵盐等有协同杀菌作用适用范围：手、皮肤、环境表面、一般医疗器械、器材和用品的消毒；作为增效、助溶剂与其他消毒剂复配使用方法：浸泡法、擦拭法异丙醇正丙醇 636、胍类消毒剂特点：低效消毒剂；速效杀菌，对皮肤粘膜无刺激性、对金属和织物无腐蚀性，受有机物影响轻微，稳定性好；低浓度下也有抑菌作用影响因素：温度；pH；拮抗物质；有机物醋酸氯己定、葡萄糖酸氯己定、聚六甲基胍适用范围：常用的皮肤粘膜消毒剂；卫生手消毒、外科手消毒、手术部位皮肤消毒、粘膜消毒等使用方法：浸泡、擦拭、冲洗注意事项勿与肥皂、洗衣粉等阴离子表面活性剂混合使用或前后使用冲洗消毒时，若创面脓液

42、过多，应延长冲洗时间647、季铵盐类消毒剂阳离子表面活性剂特点：低效消毒剂；毒性低，对皮肤粘膜无刺激，稳定性好，对消毒物品无害影响因素：温度；pH；拮抗物质；有机物；水质硬度；棉织物品单链季铵盐；双长链季铵盐；复方制剂(乙醇、异丙醇)适用范围：手、皮肤粘膜的消毒、环境与物体表面的消毒使用方法：擦拭、浸泡、喷洒注意事项阴离子表面活性剂如肥皂、洗衣粉等对消毒效果有影响，不宜合用有机物严重污染时应加大使用剂量或延长作用时间有些微生物对季铵盐类化合物有抗药作用658、烷基化气体消毒剂对微生物蛋白质分子的烷基化作用特点：杀菌广谱、杀菌力强；对物品无损害或损害轻微 缺点：对人有一定毒性；有些烷基化剂可能有

43、致癌作用环氧乙烷：环氧乙烷灭菌器特点：广谱灭菌剂、穿透力强；对物品损害轻微，可用于不耐高温、不耐湿物品的消毒和灭菌急性毒性；慢性毒性影响因素：时间；温度；浓度；相对湿度；包装材料适用范围：电子仪器、光学仪器、医疗器械、内镜、透析器和一次性使用诊疗用品等缺点：消毒方法较复杂，消毒条件不易控制，消毒时间较长，安全性较差；液体不能用环氧乙烷灭菌，大多数药品和食品也不宜用环氧乙烷灭菌；易燃易爆；有毒66理想的化学消毒剂杀菌谱广有效浓度低作用快速性能稳定，不易受有机物、酸、碱与其他物理或化学因素影响易溶于水、使用方便无毒、无味、无刺激、无腐蚀无致突变、无致畸、无致癌作用消毒后易去除不易燃烧爆炸，使用安全

44、易储存便运输，可大量供应67化学消毒灭菌法的监测消毒剂的有效浓度有效成分测定浓度监测卡(试纸)作用时间消毒剂污染情况温度pH微生物学监测染菌量测定三、影响消毒灭菌效果的因素消毒方法方面的因素消毒剂性质杀菌效果差异明显：高效、中效、低效消毒剂必须依据消毒对象严格选择合适的消毒剂-消毒工作成败的关键消毒剂配方处理剂量-杀灭微生物的基本条件强度和时间，强度与作用时间的积即为剂量强度：热力消毒灭菌中的温度、紫外线的辐射照度、微波的输出功率、化学消毒剂的浓度等时间：所使用的处理方法对被处理物品作用的时间必须明确并充分保证所需强度与时间穿透力物理因子和化学因子对物品穿透力各有不同穿透力强：电离辐射、微波、

45、湿热；环氧乙烷、戊二醛穿透力弱：紫外线要保证足够的消毒时间，并为穿透创造条件在密闭环境中穿透力越强消毒效果越好环境因素温度温度不仅是热力消毒的决定因素，对其他消毒方法也有重要影响一般温度越高，消毒速度越快，消毒效果越好相对湿度主要影响气体熏蒸消毒剂的作用紫外线消毒也受空气相对湿度的影响PH值主要影响化学消毒剂的作用效果有机物对物理因子可阻挡其穿透对化学因子起到消耗和阻挡作用减少或避免消毒过程受有机物的影响应将污染物品清洗后再进行消毒对痰液、粪便等的消毒，应选择受有机物影响较小的消毒剂适当提高消毒剂浓度或延长作用时间化学拮抗物化学消毒剂有其独特的化学性质，其活性必然受性质相反物质的影响化学拮抗物

46、是消毒剂试验中和剂选择重要依据微生物方面的因素微生物种类不同类型微生物对消毒因子的敏感程度不同微生物抗力：在宿主体内表现出对抗微生物物质的耐受能力；在体外环境中表现出对各种理化因子的适应能力；耐受和适应能力可随环境条件的改变而逐渐发生变化微生物抗力是消毒试验指标菌选择的重要依据，也是消毒处理强度的重要参考，但并不完全作为唯一依据微生物污染程度微生物数量越多，所需消毒剂的浓度越高，作用时间越长四、消毒与灭菌效果的评价与保证消毒与灭菌效果的评价主要适用于消毒剂鉴定和日常监测，用来评价各种用途的消毒剂对微生物的杀灭效果只是对消毒剂的杀菌能力的重要方面进行验证，侧重反映消毒剂的实用剂量与杀菌能力不能反

47、映消毒剂的全面特性消毒与灭菌效果的监测微生物学监测法-最经典、最准确的方法无菌试验：灭菌处理最常用的微生物监测法现场消毒效果的验证；对消毒剂可疑杀菌效果的实验室验证指示物监测法化学指示物：过程指示物、特殊试验指示物、单参数指示物、多参数指示物、积分指示物、仿真指示物生物指示物：最为准确混合指示物程序监测法预先通过化学和生物学的反复检测，确定所设定的程序在规定的条件足以达到消毒或灭菌的要求，以后根据每次处理程序和有关参数的记录，判断是否达到相应的消毒或灭菌要求消毒灭菌方法的选择-保证消毒灭菌效果根据物品的性质进行选择根据物品上污染的微生物类型及数量进行选择根据物品污染后的危害程度进行选择根据物品

48、性质选择消毒方法总的原则：保护消毒物品不受损坏，使消毒方法易于发挥作用不同物品对各种消毒因子的穿透力及耐受力不同耐高温、耐湿度的物品和器材：压力蒸汽灭菌耐高温的玻璃器材、油剂类和干粉：干热灭菌不耐热、不耐湿及贵重物品：环氧乙烷或低温蒸汽甲醛气体消毒灭菌金属器械的浸泡消毒：应选择对金属基本无腐蚀的消毒剂 选择表面消毒方法应考虑表面性质：光滑表面可选择紫外线消毒器近距离照射，或液体消毒剂擦拭；多孔材料表面可采用喷雾消毒法无使用价值的医疗废物、患者衣物、尸体等：焚烧处理根据物品上污染的微生物类型(抗力、危害性)及数量选择消毒灭菌的方法致病性芽胞、真菌孢子、分枝杆菌污染：高水平消毒法或灭菌法经血传播病

49、原体(乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病病毒等)污染：高水平消毒法或灭菌法真菌、亲水病毒、螺旋体、支原体、衣原体和病原微生物污染：中水平消毒法或以上一般细菌和亲脂病毒污染：中/低水平消毒法较多有机物的物品：增加消毒剂使用剂量和(或)延长消毒作用时间微生物污染严重时：增加消毒剂使用剂量和(或)延长消毒作用时间根据物品污染后的危害程度选择消毒灭菌方法高度危险性物品必须选用灭菌方法处理中度危险性物品一般情况下达到消毒目的即可，可选用中水平或高水平消毒方法内镜、体温表等：高水平消毒方法低度危险性物品一般可用低水平消毒方法，或只作一般的清洁处理即可特殊情况(病原微生物污染)：必须针对所污染病原微生物的种

50、类选用有效的消毒方法第二节 感染性疾病的特异性预防固有免疫(Innate immunity)/天然免疫(Natural immunity)/非特异性免疫(Nonspecific immunity) 适应性免疫(Adaptive immunity)/获得性免疫(Acquired immunity)/特异性免疫(Specific immunity) 固有免疫和适应性免疫主要特点的比较固有免疫适应性免疫应答发生的特点先天获得，出现早，速度快个体出生后产生，速度较慢免疫原的激发不需激发需激发免疫原主要类型病原体相关分子模式非己蛋白质抗原免疫细胞M、NK细胞、中性粒细胞等T细胞、B细胞免疫分子炎症因子、

51、补体、细胞因子抗体抗原受体库的发育无有，显示抗原受体高度特异性二次应答和免疫记忆无有抗原特异性细胞克隆扩增无有机体的抗感染免疫抗感染免疫因素非特异性免疫屏障结构体表屏障：皮肤粘膜及其附属物 正常菌群拮抗作用内部屏障：血脑屏障、胎盘屏障吞噬细胞：中性粒细胞、单核吞噬细胞系统自然杀伤细胞固有免疫分子：补体、细胞因子、干扰素等特异性免疫粘膜免疫系统体液免疫：抗毒素、抗菌性抗体、抗病毒抗体细胞免疫细胞毒性T细胞CTLTh1 细胞及其释放的淋巴因子特异性免疫预防免疫预防(immunoprophylaxis)机体抵抗和清除病原微生物或其他异物的功能通过隐性感染、接种疫苗、注射或从乳汁或胎盘获得抗体等免疫效

52、应分子，增强机体特异性免疫功能，有效预防某些疾病发生传染病预防控制最经济、最有效的手段自然免疫：机体感染病原体或母体垂直传播建立的免疫防御机制人工免疫artificial immunization：人类接种疫苗等抗原或输注抗体等免疫效应分子，是机体主动或被动获得某种特异性抵抗力的方法-特异性免疫免疫预防分类免疫预防自然免疫自然主动免疫：机体通过病原体的显性或隐性感染后获得；最原始和最危险的途径自然被动免疫：机体在自然状态下通过直接获得免疫效应物质而获得；胎儿通过胎盘获得母体IgG抗体、新生儿通过母乳接受来自母体SIgA抗体人工免疫人工主动免疫：给机体输入疫苗或类毒素等抗原性物质，刺激机体免疫系

53、统产生免疫应答过程，使机体获得特异性免疫力；免疫力出现缓慢，维持时间较长，主要用于传染病的特异性预防人工被动免疫：直接给机体输入抗体、抗毒素及丙种球蛋白等免疫效应分子，使机体立即获得特异性免疫力；立即发挥免疫作用，但持续时间较短，多用于治疗或紧急预防人工主动免疫和人工被动免疫的比较区别要点人工主动免疫 artifical active immunization 人工被动免疫 artifical passive immunization输入的免疫物质抗原抗体或细胞因子等免疫的机制刺激机体产生免疫力从外界直接获得免疫力接种次数13次1次免疫出现时间慢，24周快，立即出现免疫维持时间长，数月数年短，

54、23周用途多用于预防多用于治疗或紧急预防特异性预防免疫生物制剂生物制剂 biological production用微生物本身或其毒素及人或动物免疫血清、细胞制剂或是细胞提取物等制成的用于预防、治疗、诊断某些临床疾病的制剂人工主动免疫生物制剂疫苗类毒素人工被动免疫生物制品抗毒素丙种球蛋白抗菌血清疫苗 vaccine用微生物或其抗原制品制成的用于预防某些传染病的生物制品传统疫苗：采用病原微生物及其代谢产物，经过人工灭活或减毒、脱毒制成的疫苗； 灭活疫苗、减毒活疫苗新型疫苗：应用基因工程技术、生物化学合成技术等现代生物技术生产的疫苗；亚单位疫苗、基因工程疫苗、重组载体疫苗、核酸疫苗灭活疫苗 ina

55、ctivated vaccine用物理或化学方法杀死病原微生物，但仍保留其免疫原性的一种生物制剂灭活制备工艺简单、安全性高，易于保存减毒活疫苗 attenuated vaccine通过毒力变异、人工选择而获得的减毒或无毒株，或从自然界直接筛选的弱毒或无毒株经培养后制成的疫苗 需要冷藏保存且保存期较短，有回复突变的危险灭活疫苗和减毒活疫苗的比较 区别点 减毒活疫苗灭活疫苗制剂特点减毒或无毒的疫苗死菌，仍保持免疫原性制备方法通过非正常培养减毒株通过物理化学方法使病原体失活接种次数 1次23次接种剂量 量小量大接种反应 类似轻型感染或隐性感染可出现发热、全身或局部肿痛等反应免疫的类型体液免疫和细胞免

56、疫体液免疫免疫效果较好，维持长(15年)较差，维持短(0.51年)毒力回复 有可能不可能安全性对免疫缺陷者有危险安全性好疫苗稳定性 相对不稳定(需冷藏)相对稳定保存 不易保存，4存活2周，真空冻干可长期保存易保存，4可保存1年以上亚单位疫苗 subunit vaccine利用微生物的保护性抗原成分制成的不含有核酸、能诱发机体产生免疫应答的疫苗肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌表面的荚膜多糖疫苗乙型肝炎基因工程疫苗-表面抗原基因工程疫苗利用基因工程技术获得带有病原体保护性抗原表位的目的基因，将其导入原核或真核细胞表达系统，用表达的保护性抗原制成的疫苗安全、经济、可批量生产技术要求高，对表达的

57、保护性抗原蛋白质的回收和纯化较困难鉴定引起保护性免疫应答的抗原成分克隆相应抗原基因在原核或真核系统中表达纯化、复性鉴定安全性、免疫原性等推广应用研制、开发基因工程疫苗的传统流程重组载体疫苗 recombinant vector vaccine将编码某一种病原体蛋白抗原的基因导入减毒的病毒或细菌而制成的疫苗载体(减毒微生物)在宿主体内增殖抗原基因表达为相应的蛋白质刺激机体发生免疫应答核酸疫苗 nucleic acid vaccine/DNA疫苗将编码保护性抗原的基因重组到质粒真核表达载体上，然后将重组的质粒DNA直接注入宿主体内，使外源基因在体内表达，表达的抗原能刺激机体产生免疫应答人体使用的安

58、全性？类毒素 toxoid外毒素经0.3%0.4%甲醛处理后，失去了毒性但仍保持免疫原性的生物制剂接种后可刺激机体产生抗毒素，外毒素所致疾病预防DPT三联疫苗：白喉、百日咳、破伤风抗毒素 antitoxin将类毒素或外毒素免疫动物，使之产生高效价抗体(抗毒素)后采血，分离血清，从中提取免疫球蛋白精制成抗毒素制剂外毒素所致疾病的治疗和紧急预防注意超敏反应的发生丙种球蛋白 gammaglobulin胎盘丙种球蛋白：从健康产妇的胎盘或婴儿脐带血液中提制而成血清丙种球蛋白：从正常人血清中提取某些感染性疾病的紧急预防及烧伤病人细菌感染的预防；丙种球蛋白缺乏症、长期化疗或放疗肿瘤病人抗菌血清 antiba

59、cterial serum其他IFN-、IFN-、IL、LAK细胞等特异性免疫预防的注意事项免疫对象和时间 接种剂量、次数与时间间隔 接种途径 应用生物制品可能发生的异常反应和禁忌证第三节 生物战剂伤害的防护生物战剂与生物武器生物战剂(biological agent)在军事行动中用来杀伤人员、牲畜和毁坏农作物、植被等的致病微生物、毒素和其他活性物质能在人员或动植物机体内繁殖并引起大规模疾病的微生物制剂生物武器(biological weapons)由生物战剂、生物弹药及其运载系统等组成的能杀伤有生力量和破坏动植物的特种武器、器材的总称生物战剂是构成生物武器杀伤威力的决定因素生物武器特点：危害

60、面积大；危害时间长；致病性强；具有传染性；生物专一性；难防难治等生物战剂与生物战、生物恐怖生物战(biological warfare)应用生物武器达到军事目的的作战往往是国家行为 生物恐怖(bioterrorism)一个组织或集团利用生物的烈性传播和产生强烈毒性的特征，制成生物战剂来胁迫另一群人或普通公众乃至国家，以达到其政治和军事目的所采取的卑劣行为 历史与现状生物战剂使用历史事件1364年：鞑靼人将死于鼠疫的士兵尸体投入卡法城内，导致鼠疫在城内流行1763年：英军将天花患者用过的毯子和手帕赠与北美洲印第安人，造成大规模疫情流行第一次世界大战：德国特工使用鼻疽伯克霍尔德菌和炭疽杆菌感染法国