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文档简介
1、生药学实验讲义生药学实验讲义漯河医学高等专科学校实验室守则 实验一 实验二 实验三 实验四 实验五 实验六 实验七 实验八 实验九 实验十实验室守则 实验一 实验二 实验三 实验四 实验五 实验六 实验七 实验八 实验九 实验十叶植物、裸子植物茎的构造 实验一 实验十二 实验十三 实验十四 实验十五 实验十六 理化鉴定 实验十七 理化鉴定67891011123 生药中常见的化学成分的理化鉴定(一)4 生药中常见的化学成分的理化鉴定(二)5 根类生药 根茎类生药 皮类生药 茎木类生药 植物细胞基本结构 植物的组织 根的组织构造双子叶植物茎的初生构造和次生构造单子 TOC o 1-5 h z 13
2、 叶的构造14花的组织构造15果实的内部组织构造16种子的内部组织构造17菌类、裸子植物的性状显微鉴定18双子叶植物根及根茎类生药的显微及显微19 单子叶植物根及根茎类生药的显微及显微20 TOC o 1-5 h z 实验十八皮类生药的显微及显微理化鉴定21实验十九花类生药的显微及显微理化鉴定22实验二十果实种子类生药的显微及显微理化鉴定23 实验二十一全草及其他类类生药的显微及显微理化鉴 定24实验二十二动物类和矿物类生药的性状鉴别25实验二十三户外见习26实验二十四附院药房见习27附录一常用试剂配置法28附录二层离法常用显色剂29附录三显微镜测量法30附录五显微镜的构造与使用31附录六生物
3、绘图32实验室守则一、实验注意事项:根据教学进程,温习与本次实验有关的课堂讲授 内容。仔细阅读本次实验的内容,要求弄懂实验的原理 与方法。准备好各种自备的实验用品,如铅笔、橡皮、直 尺、报告纸等。二、实验过程中的几点要求:遵守实验室规则,保持实验室安静。实验认真,观察仔细,观察应当与思考结合起来, 应当手、眼、脑三者并用。由于实验时间有限,实验时应当善于安排自己的 工作,注意力应当集中在主要问题上,不要用过多时间 去钻研细小的次要问题,一时解决不了的次要问题,可 田课外时间去解决o在实验过程中,应当随时注意观察到的现象,测I三I三实验进行过程中,必须注意听取教师的指导。实验桌前应随时保持整洁,
4、非实验必要物品一律 不许放在桌面或桌架上。纸屑、废物应放人污物缸内,不得乱丢地上,污 物缸内不得倒入液体。三、实验完毕时的几点要求:按照教师指定时间完成实验报告。把实验用仪器、用品等收拾干净,放在指定位置。mi发放给个人保管的可放抽屉或柜内。mi临时借用物品应及时归还。值日生负责最后清扫实验室卫生,并及时清除污 物缸内的废弃物。实验结束后,检查门、窗、水、电,保证无安全 隐患后方可离开实验室。实验一 生药中常见化学成分的理化鉴定(一)一、实验目的要求:1.1.2.3.应。熟悉药材鉴定中常用的理化鉴定方法。掌握生物碱,羟基蒽醌的理化性质和定性检识反二、实验主要材料、仪器及试剂:马钱子、黄柏(苦参
5、)黄连、大黄、秦皮、黄连乙醇液。水浴锅、荧光灯、蒸发皿、锥形瓶、试管、微量升 华装置。碘化铋钾试液、碘化汞钾试液、碘一碘化钾试 液、浓硝酸、浓硫酸、5%NaOH、HCl、乙醚、氨水。三、实验内容:显微化学反应法:将药材的切片或粉未置载玻片上,滴加适当试液, 加盖玻片在显微镜下观察产生的颜色或结晶等,作为鉴 别特征。 取干燥马钱子的胚乳部分作徒手切片,加1%硫矶 酸试剂1滴,镜检,观察结果。另取一切片,加浓硝酸1滴,镜检,观察结果。取药材粗粉加适当试剂浸出,将浸出液滴于载玻Ill片上,滴加适当试剂,加盖玻片,镜检观察反应结果。Ill取黄连乙醇液1滴,加浓HN03 1滴,镜检,观察结 果。(3)取
6、药材的切片或粉末滴加适当试剂,直接观察皇现 的种种颜色作为鉴别特征。取大黄饮片,加5%NaOH l2滴,出现什么颜色?再 加稀HCl 12滴,又出现什么颜色?微量升华法:是利用药材中所含的某些成分,在一定温度下能升华 的性质,获得升华物,在显微镜下观察其形状,颜色及 化学反应,作为鉴别特征。具体方法:取金属片,安放在有圆孔(直径约2cm)的 石棉板上,金属片上放一小金属圈(高度约08cm),对准 石棉板上的圆孔,圈内加药材粉末一薄层,圈上放一载 玻片,在石棉板下圆孔处用酒精灯徐徐加热(火焰距板约 4cm)数分钟,至粉末开始变焦,并有气化物发生,去火 待冷,则有结晶状升华物附着于覆盖的载片上,将
7、载玻 片取下反转,在显微镜下观察结晶形状,并可加化学试 液,观察其变化。取大黄粉未,进行如上操作,观察反应结果。3 .荧光分析法:将药材切片或粉末或提取液等,在荧光灯下观察荧 光,有些药材不产生荧光,如以酸碱处理或其他化学方法处理后,可使其中某些成分在荧光灯下产生荧光,以 便鉴别。如取黄连饮片、浙贝母粉末或秦皮水浸液,在紫外灯 下观察荧光颜色。层析法:分为纸层析、柱层析、薄层层析等(略)。化学定性检查:药材中的化学成分可利用其能与 某些试剂产生特殊的颜色、沉淀反应来进行鉴别。(1)生物碱的检出:沉淀反应 取黄连,马钱子,黄 柏(苦参)粉未各2g,分别盛入锥形瓶中,各加水l 5ml, 浓HCl
8、O. 5ml,60C水浴上温浸30分钟,时时振摇, 取滤液备用。各取2ml滤液于试管中,分别加下列试液23滴, 观察有何现象?碘化铋钾碘化汞钾碘一碘化 试液 试液 钾试液连马钱子黄柏(苦参)(2)羟基功醌的检出:Bomtrge;反应 黄粉未 0.2g,置试管中加入5%NaOH试液4ml,在小火上煮沸, 取滤液加HCl呈酸性后,再加乙醚5ml,振摇,分取醚 层,于醚层中加入等量氨试液,振摇,观察反应现象。四、作业:简要记录各反应的实验步骤和结果。五、思考题:显微化学反应法有几种操作方法?l=J微量升华法用于生药鉴别有何特点?l=J含何类成分的生药常会产生荧光?生物碱常甩的沉淀试剂有哪些?Born
9、trager反应过 程的原理是什么?实验二 生药中常见化学成分的理化鉴定(二)一、 实验目的要求:掌握香豆精类,强心昔类、皂昔类、鞣质类、氰昔 类、黄酮类的理化性质和定性检识反应。二、实验主要材料、仪器及试剂:秦皮、桔梗、穿山龙、五倍子、儿茶、苦杏仁、洋地 黄叶、黄芩(槐米水浴锅蒸发皿锥形瓶III盐酸羟胺甲醇液、10%氢氧化钾甲醇液、乙醚、氯仿、 盐酸、1%三氯化铁乙醇液、2%红血球悬浮液、1%盐酸 奎宁试液、明胶液、铁铵矶试液、三氯化铁试液、冰醋 酸、浓硫酸、镁粉。III三、实验内容:化学定性检查(1)香豆精类的检出:异羟肟酸铁反应 取秦皮粗粉0.2g,置具塞试管中, 加乙醚3ml,浸渍51
10、0分钟,时加振摇,放置,吸取上 清液(或滤过)于试管中加新配制的盐酸羟胺甲醇溶液 23滴,l 0%氢氧化钾甲醇溶液23滴,水浴温热12 分钟,冷后加l 0%盐酸,使pH为34,再加1%三氯化 铁乙醇溶液12滴,两液混合面或溶液应显什么颜色?(2)强心昔的检出:三氯化铁一冰醋酸反应取洋地黄叶粉末05g,加 水5ml,水浴加热20分钟,滤液加3m1CHC13,振摇萃 取后,再加乙醚3ml,待分层,用吸管吸取取下层,将 CHCl3层转于蒸发皿中蒸干,放冷,加冰醋酸lml使残 渣溶解,移人试管中,加三氯化铁溶液1滴,并沿管壁 缓缓注入浓H2S04 l520滴,观察上层液及界面的颜色 变化。皂昔的检出:
11、泡沫反应 取桔梗粉末02g,加水5ml,加热煮沸, 过滤,滤液在试管中强烈振摇,注意是否产生大量持久 性泡沫。溶血试验 取穿山龙的l%生理盐水溶液lml和 l%生理盐水lml,分别置试管中,各加2%红血球悬浮液0.3ml,摇匀后放置,注意观察哪支试管溶液变清而透明。(示溶血现象)hi透明。(示溶血现象)hi(4)鞣质的检出:显色及沉淀反应取五倍子,儿茶粉末各0.5g,分 别置于锥形瓶中,加25ml水,水浴加热,过滤备用。各取滤液2ml,分别加下列试剂,观察反应现象。1%盐酸奎宁试液明胶液铁铵矶试1%盐酸奎宁试液明胶液铁铵矶试液、五倍子儿茶(5)氤昔类的检出:苦味酸钠反应取苦杏仁一粒捣碎,用水湿
12、润置苦味酸钠反应取苦杏仁一粒捣碎,用水湿润置试管中,试管中悬挂用NaHC0饱和溶液湿润的苦味酸 3试纸一条,用软木塞塞紧,置4050。C水浴中,观察 试纸颜色变化。(6)黄酮昔的检出:盐酸镁粉反应取黄芩(槐米)粉末约0.2g,加乙醇III5ml,水浴温热约5分钟,滤过,取滤液2ml,加镁粉少 量,混匀,滴加盐酸数滴,注意有气泡产生,同时观察 呈现什么颜色。III四、作业:简要记录各反应的实验步骤和结果。五、思考题:1、香豆精昔,强心昔,氧昔,黄酮昔及鞣质的反应 机理是什么?2、黄酮类成分遇盐酸一镁粉是否都显红色?如不显红实验三根类生药黄黄 Rabix Astragali 甘草 Radix Cl
13、ycyrrbizae一、实验目的:1、掌握黄芪、甘草生药性状。2、掌握黄芪、甘草粉末显微特征。二、实验主要仪器及试剂:显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛溶液、 白瓷板、蒸发皿、蒸馏水、80%硫酸。三、实验材料:蒙古黄芪 Astragalis membranaceusBgc. Var. mongholieus(Bgc. )Hsiao 粉末、甘草 clycyrrbiza uralensis Fisch. 粉末。四、实验内容及步骤:1、镜检黄芪粉末,分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片,注意以下特征:纤维众多,成束,细长,直径936um,壁厚,I=Jw非木化,孔沟不明显。另取黄芪生药,刮取少量纤维粉
14、末),透化后装片,注意纤维的先端常纵裂成扫帚状。I=Jw导管 主为具缘纹孔导管,纹孔呈椭圆形,类方 类或斜方形。木栓细胞表面观呈多角形或类方形。淀粉粒单粒类圆形、椭圆形或类肾形,直径313 um,复粒由24分粒组成。2、镜检甘草粉末分别以蒸馏水和水合氯醛试液装 片,注意以下特征:11纤维 众多,成束或散离,细长,直径614 um, 壁厚,木化或非木化,孔沟不明显;晶鞘纤维易察见, 草酸钙方晶类双锥形,长方形或类方形,含晶细胞的壁 增厚,微木化或非木化。11导管主为具缘纹孔导管,多破碎,纹孔椭圆形或略呈斜方形,对列或互列,有的导管旁可见小型具缘 纹孔管胞。木栓细胞棕红色,壁薄,微木化,表面观呈多
15、角 形。淀粉粒众多,单粒椭圆形、卵形或类球形,直径 316um,脐点点状或短缝状。复粒稀少,由2分粒组 成。此外,尚有少数黄棕色或红棕色的色素块。五、作业:1、绘黄芪粉末特征图,示纤维,导管,木栓细胞与 淀粉粒。2、绘甘草粉末显微特征图,示晶纤维,具缘纹孔导 管,木栓细胞和淀粉粒。六、思考题:1、甘草的组织构造中,有哪些较显著的鉴别特征?2、什么是晶鞘纤维?3、如何能方便而有效地鉴别甘草和黄芪粉末?实验四根茎类生药黄连、大黄一、实验目的:1、掌握黄连、大黄的生药性状特征。2、掌握黄连大黄的粉末显微待征。3、了解其它根及根茎类中药的性状特征二、实验主要仪器及试剂:显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水
16、合氯醛试液。三、实验材料:黄连 Coptis chinensis Franch .原植物标本、生药(味连)组织切片及粉末。四、实验内容及步骤:1、取黄连粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片, 镜检下列特征:石细胞鲜黄色、类圆形、类方形或类多角形,有时稍延长,长径25- 75 um,孔沟及纹孔明显。韧皮纤维鲜黄色,纺锤形或长梭形,直径:2040 um,壁较厚,纹孔少。木纤维众多,常成束,鲜黄色,直径l 535um, 壁具裂隙状纹孔。导管多为孔纹导管,也有具缘纹孔,网纹及螺纹 导管。鳞叶表皮细胞类方形或长方形,壁薄曩垂厨壁微 波状。淀粉粒单粒长圆形、肾形或类球形,直径ll0um,复粒少,由24分粒组
17、成。m,2、取大黄粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片, 镜检下列特征:草酸钙簇晶大而多,棱角大多短钝。,。导管主为网纹导管,并有具缘纹孔及细小螺纹导 管,直径约至140 um,非木化。淀粉粒单粒呈圆球形或长圆形,脐点大多呈星 状,复粒由27个分粒组成。3、观察所示标本的性状特征。五、作业:1、绘黄连粉末显微特征图,示石细胞、韧皮纤维、 木纤维、导管、鳞叶表皮细胞及淀粉粒。2、绘大黄粉末显微特征图,示草酸钙簇晶、导管、淀粉粒。六、思考题:1、如何从性状与组织上鉴别“味连”、“雅连”和“云 连,?实验五皮类生药肉桂、黄柏一、实验目的:1、掌握肉桂、黄柏的生药性状与组织鉴别特征。2、掌握皮类生药的鉴
18、别特征。二、实验主要仪器及试剂:显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛试液、 稀甘油,间苯三酚溶液、浓HC1、小试管、氯仿、10% 盐酸苯肼试液三、实验材料:肉桂、黄柏粉末。四、实验内容及步骤:1、取肉桂粉末分别用蒸馏水及水合氯醛试液装片后 进行镜检,注意下列显微特征:.纤维大多单个散在,长梭形,壁极厚,木化,纹 孔及纹孔沟不明显。石细胞较多,类方形或类圆形,壁厚,有的一面 菲薄。油细胞类圆形或长圆形,有时尚含黄色挥发油滴。草酸钙针晶众多,细小,散在或成束,常存在于 射线细胞中。木栓细胞多角形,壁木化,内含红棕色物。淀粉粒单粒或24分粒组成的复粒。2、理化鉴定取肉粉末约0.1 g置小试管中,加
19、氯仿l2ml浸 数分钟。吸取氯仿浸出液2滴置载玻片上,再加10%盐 酸苯肼试液l滴,加盖玻片后镜检,可见桂皮醛苯肼杆 状结晶oI三取肉桂粉末少许,进行微量升华,于升华物上加 10%盐酸苯肼液l滴,加盖玻片镜检,可见桂皮醛苯肼 杆状结晶。I三3、取黄柏粉未分别用蒸馏水及水合氯醛试液装片进 行镜检,注意下列显微特征:纤维及晶鞘纤维较多,鲜黄色,直径18-32 u m, 多成束存在o石细胞鲜黄色,成群或单个散在,类圆形者直径 40128um,分枝状石细胞较多,长可至240 um,壁厚, 层纹细密,孔沟不明显或较短。草酸钙方晶较多,直径824um。粘液细胞多见,直径可至80 um。淀粉粒细小,多单粒球
20、形,直径28um。五、作业:1、绘肉桂粉末特征图、示木栓细胞、纤维、石细胞 及草酸钙针晶。2、绘黄柏粉末特征图,示纤维及晶鞘纤维,石细胞, 粘液细胞等。六、思考题:1、如何从性状及组织上鉴别川黄柏与关黄柏?2、黄柏的石细胞有何特征?3、肉桂横切组织有何特征?实验六叶类、花类、果实、菌类生药 大青叶、金银花、小茴香、茯苓 一、实验目的:1、掌握大青叶、金银花、小茴香、茯苓的生药性状及 粉末显微特征。2、熟悉其它叶类、花类生药的显微特征。二、实验主要仪器及试剂:二、液,三、显微镜,临时装片用具,水合氯醛试液,甘油醋酸 5%KOH液,三、实验材料:大青叶、金银花、小茴香生药、茯苓。四、实验内容入步骤
21、:1、取大青叶粉末少量,水合氯醛试液透化装片,镜 检下列特征:。暖 III暖 III上表皮细胞垂周壁近平直,下表皮细胞垂周壁稍弯 曲,略呈连珠状增厚。气孔多存在于下表皮,不等式,副卫细胞34个。2、取金银花粉末,以水合氯醛装片后镜检,可见以 下特征:腺毛多见,有两种:一种头部倒圆锥形,顶部平 坦,约1030个细胞,排成24层,柄25个细胞;另 一种头部类圆形或扁圆形,约620个细胞,柄24个 细胞。(2)非腺毛有两种:一种为厚壁性,多为单细胞,表 面有微细疣状突起,有的具角质螺纹;另一种为薄壁性, 单细胞,甚长,弯曲或皱缩。花粉粒类球形,表面有细密短刺及颗粒状雕纹,具 3孔沟。草酸钙簇晶多见,常存在于萼筒组织中。3、小茴香的鉴别(1)性状鉴定注意其为
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