藏药翼首草中马钱苷的含量测定#

1、中国科技论文在线中国科技论文在线- FORMTEXT Determination of loganin in Pterocephalus hookeri FORMTEXT TAN De, FORMTEXT GU Rui, FORMTEXT ZHANG Yi, FORMTEXT MENG Xianli, FORMTEXT LAI Xianrong(College of Ethnic Medicine, Chengdu University of TCM, Chengdu 611137)Abstract: FORMTEXT Objective： To establish a method of H

2、PLC for determination the contents of loganin in Pterocephalus hookeri . Method: The separation column was a Welchrom C18 column(4.6 mm250 mm,5 m), the mobile phase was acetonitrile-warter (1288), the flow rate was 1 mLmin-1 and the detection wavelength was 240 nm. Result: The loganin had a good lin

3、er relationship at the range of 0.06g1.2g. The average spotting recovery was 97.03%, and RSD was 1.41%. Conclusion: The method is simple , accurate , better specificity and suitable for its assaying. Key words: FORMTEXT Tibetan material medical；Pterocephalus hookeri；loganin；HPLC引言翼首草又名榜孜毒乌，为川续断科植物匙叶

4、翼首草Pterocephalus hookeri (C. B. Clarke) Heck的干燥全草，系大宗藏药材1，2000年被西藏红十字会列为一级濒危藏药2。翼首草具有解毒除瘟，清热止痢，祛风通痹之功效；主治外感发热，风湿热痹等症，临床用于治疗类风湿性关节炎。目前主要通过测定游离三萜皂苷元齐墩果酸和熊果酸来控制翼首草药材的质量3,4，尚未见翼首草药材或其制剂中对其它化合物含量测定的相关报道。马钱苷是翼首草中重要的化学成分5，具有抗炎、抗氧化等作用6,7。建立马钱苷的含量测定方法，对翼首草药材及其制剂质量标准完善具有重要的意义。本实验在确定了测定方法后，分别对20批不同产地来源翼首草药材中马钱

5、苷的含量进行了测定。一级标题仪器、试剂与药材仪器、试剂与药材岛津 LC -2010A HT（四元泵，自动进样器，紫外检测器），LCsolution化学工作站；UPT- = 1 * ROMAN I-10T型优普PUT系列超纯水器；AS10200超声波清洗器（天津奥特赛斯仪器有限公司）。马钱苷对照品由中国药品生物制品检验所提供（批号111640-200604）；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。药材原植物经成都中医药大学民族医药学院张艺研究员鉴定为川续断科植物匙叶翼首花P. hookeri (C. B. Clarke) Heck。药材分为全草、地上部分（叶、花葶、花）和地下部分（根及根

6、茎）。方法与结果色谱条件与系统适应性试验Welchrom C18柱（ 4.6250mm，5m）；流动相乙腈-水（12：88）；检测波长240 nm；柱温30；流速1 mLmin-1。理论塔板数以马钱苷计不低于8000对照品溶液的制备取马钱苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL 含马钱苷60 g的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入80%甲醇50 ml，超声处理(功率250 W,频率50 kHz)30 min后离心20 min（3000rmin-1），取上清液经微孔滤膜(0.45 m)滤过，即得。线性关系考察分别吸取对照品溶液1 L

7、、2 L、5 L、10 L、20 L进样测定，以马钱苷峰面积积分值为纵坐标，马钱苷对照品的量为横坐标，绘制标准曲线，其回归方程为：y=1250745x，r=0.9999。马钱苷在0.06 g1.2 g范围内与峰面积呈良好的线性关系。精密度试验取马钱苷对照品溶液5 L进样5次，峰面积RSD为0.84 。稳定性试验 取供试品溶液在0h、1 h、2 h、4 h、12 h分别进样5 L，记录峰面积，RSD为0.43%（n=5），表明马钱苷在12 h内稳定。重复性试验 精密称取同一批药材粉末0.5 g，同2.3项下方法制备供试品溶液，进样分析，计算马钱苷含量，其RSD为1.07%。加样回收率试验 精密称

8、取6份已知含量的药材粉末0.25 g，置于100 mL圆底烧瓶中，精密加入马钱苷对照品溶液（1mgmL-1）0.5 mL，同2.3项下方法制备供试品溶液。结果平均加样回收率为97.03%，RSD为1.41%，见表1。表1 马钱苷加样回收率编号取样量/g样品中量/mg加入量/mg测得量/mg回收率/%平均值/%RSD/%10.24880.47770.50000.955195.4897.031.4120.25080.48150.50000.963596.3930.25090.48170.50000.973298.2940.24900.47810.50000.960196.4050.24990.47

9、980.50000.969597.9460.25100.48190.50000.970397.68样品的测定 按上述方法分别对15批翼首草自采药材（样品115）和5批商品药材（样品1620）进行了测定，外标法计算马钱苷的含量。色谱图见图1，结果见表2。图1 对照品和样品的色谱图表2 翼首草中马钱苷的测定结果（n=2）编号药材来源地下部分马钱苷含量（mg/g）地上部分马钱苷含量（mg/g）药材全草马钱苷含量（mg/g）1康定县新都桥镇日阿宗巴0.390.270.312康定县塔公乡山坡草甸0.320.730.493道孚县八美镇草甸灌丛24道孚县八美镇雪瓦村附近0.470.330.405道孚县八美镇

10、少乌农场嘎子桥0.440.560.456道孚县八美镇龙灯草原北口0.060.030.027炉霍县仲仁达乡林边草甸0.440.690.628炉霍县雅德乡林边草甸0.281.000.419甘孜县下雄乡灌丛草甸0.411.670.8810甘孜县绒坝岔乡青稞地边0.840.960.7711德格县错阿乡流石坡地0.350.100.1712石渠县牧场高山草甸713若尔盖县唐克乡11.391.331.2414若尔盖县唐克乡21.571.571.5015若尔盖多玛山牧场0.811.221.0516甘孜州藏医院0.7817青海省药材市场卓玛藏蒙药材所1.341.041.1818西藏样毛加药材收购站1.6419西

11、藏卓玛药材收购站0.991.411.3420西藏俄吾药材收购点0.57讨论测定方法的选择本研究考察了供试品溶液制备方法中提取方法、提取溶媒、溶媒用量和提取时间等因素，结果表明，用80%甲醇50mL超声提取30min即可将马钱苷基本提取完全。本方法操作简便，可以准确测定翼首草药材中马钱苷的含量。本文建立了翼首草中马钱苷的含量测定方法，为全面的控制翼首草原药材质量提供了参考和借鉴中国药典2010年版翼首草项下采用HPLC法测定齐墩果酸和熊果酸的含量，旨在通过测定二者的含量控制翼首草药材中三萜皂苷的含量。参考药典条件研究表明：翼首草地上与地下部位齐墩果酸和熊果酸含量差异较大，药材地下部分游离皂苷元的

12、含量普遍低于药典规定指标。课题组通过市场调查发现，各批次药材中地上部分与地下部分重量比例差异大。由于传统用药经验认为翼首草根及根茎较好，因此含根茎较多的药材价格高。综上分析可知，仅以游离皂苷元评价翼首草药材质量可能不够全面，可考虑选用马钱苷作为指标，与齐墩果酸、熊果酸含量测定互补，客观反映翼首草药材质量。药材中马钱苷成分含量分析 从表2可知，各批次药材因产地不同，全草中马钱苷含量差异较大，即使在较小的区域范围内，其含量也表现出较大的变化（如36号样），其原因值得深入探讨。多数药材地上部分马钱苷含量较地下部分含量高，但其含量比例不具规律性。参考文献 (References) FORMTEXT 1

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