南京中医药大学

1、南京中医药大学实验动物中心培训手册关于南京中医药大学实验动物中心培训的说明为规范本中心的管理， 杜绝未经过专业系统培训人员进出本中心进行动物实验、 随意带人进出等现象， 我部门对于在本中心进行动物实验人员的相关培训进行如下调整：一、申请培训条件持有“江苏省实验动物专业技能培训记录卡”并需要在本中心进行动物实验人员均可报名本中心培训。二、培训内容本中心的培训包括理论培训和现场培训两部分。理论培训主要是以集中授课的方式为实验人员讲解本中心的现状、办事流程、 动物实验以及实验动物相关知识等；现场培训主要是以现场参观动物设施为主，并讲解有关设施的使用及注意事项等。按照报名人数和报名的先后顺序进行培训安

2、排并进行公示。三、报名培训时间及渠道每学期开学前三个星期接收培训报名，报名渠道（动物中心网站理论培训报名入口），根据报名情况汇总人数和报名的先后顺序进行培训安排。四、关于培训有关细则1）每期培训班人数：每期培训班人数在 15-20 人；2）理论 培训时间：通常每个月一次，以具体通知时间为准；3）理论培训合格者在动物到达并在本中心实验之前需要进行二次现场培训；4）培训成绩有效期：通过本中心理论培训考试的成绩有效期均为半年，如半年内在本中心持续进行动物实验表现较好者可以进行免培训申请；5）二次现场培训：为了更好的完成动物实验，二次现场培训在首次培训的基础好能更加明确动物设施内的使用等，因此是非常必

3、要的。二次培训除了在首次培训的基础上我们还增加了清洗笼盒等工作安排。（6）最终解释权归南京中医药大学动物中心所有。目录1.实验动物中心简介2.实验动物和动物实验3.动物设施培训3.1 动物实验前办事流程3.2 人员、动物、物品进出标准操作程序3.3 动物设施日常饲养管理4.意外情况处理5.门禁卡办理及使用6.处罚条例一、实验动物中心简介南京中医药大学仙林校区实验动物中心是我校集动物实验、科研、教学、从业人员培训为一体的综合性实验动物机构，是中医药研究的重要公共服务平台。本中心始建于1978 年，前身为南京中医学院实验动物中心。在1988 年国家实验动物管理条例发布后，按照国家的最新要求，学校又

4、兴建了建筑面积达1200 平方米实验动物设施， 并于 2002 年通过江苏省科技厅验收，获得实验动物使用许可证。2012 年建成唐仲英科技楼辅楼，于2014 年获得江苏省实验动物使用许可证。2017 年 9 月完成 D8普通环境设施改造，并于2018 年 4 月获得江苏省实验动物使用许可证。目前 本中心占地4500m2，包括工作人员办公室、储物间、洗刷间、解剖室、配电间等辅助设施以及动物设施等。 其中，屏障系统包括五楼 350m2，四楼 350m2，普通设施包括四楼 350 m2，三楼 400m2，D8 350m2，可同时容纳大小鼠 7000 只、豚鼠600 只、兔 300 只和犬 160 只

5、。本中心隶属于南京中医药大学科学技术与产业处，现有工作人员 17 人，其中高级职称1 人，中级职称 7 人，初级职称 3 人。同时，本中心承担着南京中医药大学本科生的医学实验动物学、动物实验生物安全与防护教学任务和本校实验动物从业人员上岗培训等任务。先后主持和参与国家级、省级和校级课数十项，参与编写医学实验动物学教材2 部。目前中心年使用动物8 万只左右，年开展动物实验500 多项，承担教学量250 多课时，授课 400 多人次，为南京中医药大学教学和科研的顺利进行提供良好的服务和支撑。二、实验动物和动物实验基本知识点2.1 什么是实验动物？常用实验动物有哪些？实验动物指由人工培育， 对其携带

6、的微生物和寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。常用实验动物主要有小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬、小型猪、猴等。目前大鼠和小鼠是用量最大的两类实验动物。2 什么是动物实验动物实验即是采用标准的实验动物进行各项生命科学研究。只有采用符合国家标准的实验动物研究出的实验结果才能被认可。3 实验动物的微生物学分类及其控制要求实验动物按其微生物控制要求不同，由高到低分为无菌动物、无特定病原体动物（即SPF 级动物）、清洁级动物和普通级动物。无菌动物指用现有的检测技术和方法在动物体内外的任何部位无可检出一切生命体的实验动物。已有无菌动物主要有小鼠、

7、大鼠、豚鼠、兔等。SPF 级动物指除清洁级动物应排除的病原体外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学研究干扰大的病原体的实验动物。常用 SPF 级动物有小鼠、大鼠。清洁级动物指除普通级动物应排除的病原体外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体的实验动物。简称清洁动物。常用清洁级动物有小鼠、大鼠、豚鼠和兔。普通级动物指不携带所规定的人兽共患病病原体和动物烈性传染病病原体的实验动物。简称普通动物。 常用普通级动物有豚鼠、地鼠、兔、犬、猪和猴。目前我国已取消普通级大鼠和小鼠。其中无菌动物需饲养在隔离环境中，SPF 级和清洁级动物需饲养在屏障环境中，普通级动物需饲养普通环境中。2.2 环境基本

8、知识实验动物的饲养环境，按微生物控制级别高低分为隔离环境、屏障环境和普通环境。屏障环境指符合动物居住的要求，严格控制人员、 物品和空气的进出，适用于饲育清洁级和SPF 级动物的环境。根据国标 14925-2010 要求，屏障环境需控制的环境参数有：温度、日温差、相对湿度、换气次数、气流速度、压差、空气洁净度、沉降菌浓度、氨浓度、噪音、光照。三、动物设施培训3.1 动物实验必须履行的手续我校动物设施包括普通设施和屏障设施，设施内人员、动物和物品的进出均有严格要求， 动物饲养和动物实验均需规范化操作。因此，在动物设施内饲养动物和动物实验必需遵循规范化程序。在我校动物设施内进行动物实验标准流程如下：

9、培训合格者登录南京中医药大学实验动物中心网站 实验动物管理系统（）填写动物实验相关信息 动物中心审核 订购动物 （由动物中心代购， 特殊情况可申请自行订购） 动物入驻（领取门禁卡、动物合格证、动物发票复印件） 办理动物经费结算 交回已签字报销单 （两周内完成） 结束实验 笼位费结算 退门禁卡附：实验动物管理系统动物实验申请流程登录“实验动物中心网站”）进入“南京中医药大学实验动物管理系统”）点击“进入系统”，输入用户名、密码（用户名为教职工工资号，初始密码为123456。）。初次进入系统，应完善个人信息。选择“伦理审查”，填写伦理审查表并提交 （伦理审查表中已包含实验动物申请的所有信息，无需额

10、外填写实验动物申请表。多种品系同时申请时，需按提示填写增补表） 。登录“实验动物管理系统” 中“计划申报” 栏，查看伦理审查结果及订单状态。动物下单后， 电话通知实验动物到达时间及相关事宜。3.2 人员、动物、物品进出标准操作程序人员进出标准操作程序门厅（脱外衣、放实验无关物品、穿鞋套） 登记 更衣室（穿隔离服、戴口罩、手套、穿洁净鞋） 清洁走廊 实验室 清洁走廊 更衣室 出动物设施附：进出四楼屏障系统（1）登记刷卡：登记信息后刷卡进入设施一更。（2）一更更衣换鞋： 脱去普通工作服和鞋子放入更衣柜内，用 75%酒精溶液消毒双手，刷感应开关进入二更。（3）二更穿戴：打开净化隔离服包裹按顺序穿戴好

11、净化隔离服、口罩和手套（按下列顺序穿戴：净化隔离服 戴口罩 戴手套），穿上拖鞋。用 75%酒精溶液消毒手套，刷感应开关进入风淋室。（4）风淋：举起双手慢慢转动身体，每个方向停留15 秒，风淋 1 分钟，打开另一侧门，进入清洁走廊，进入实验室。5）污物走廊退出：实验结束，经最后工作的房间进入污物走廊（进入后不可返回） ，由污物走廊缓冲间退出。在消洗间脱去手套，脱下隔离服、口罩，将其放入指定收纳箱（桶）内。回到一更用 75%酒精溶液消毒双手， 穿上普通工作服和鞋， 将设施内专用拖鞋放入指定收纳箱内，退出设施。进出五楼屏障系统（1）登记刷卡：登记信息后刷卡进入设施一更。（2）一更更衣换鞋： 脱去普通

12、工作服和鞋子放入更衣柜内，用 75%酒精溶液消毒双手，刷感应开关进入二更。（3）二更穿戴：打开净化隔离服包裹按顺序穿戴好净化隔离服、口罩和手套（按下列顺序穿戴：净化隔离服戴口罩 戴手套），穿上拖鞋。用75%酒精溶液消毒手套，刷感应开关进入风淋室。（4）风淋：举起双手慢慢转动身体，每个方向停留15 秒，风淋 1 分钟，打开另一侧门，进入走廊，进入实验区。（5）原路退出：实验结束，原路返回一更，脱去手套，脱下隔离服、口罩、拖鞋，用75%酒精溶液消毒双手，穿好普通工作服、鞋。退出设施，并将隔离服、口罩、灭菌包裹、拖鞋一并带出，放入指定收纳箱内。进出四楼家兔豚鼠设施（1）登记刷卡：登记信息后刷卡进入设

13、施一更。（2）一更更衣换鞋： 脱去普通工作服和鞋子放入更衣柜内，用 75%酒精溶液消毒双手，刷感应开关进入二更。（3）二更穿戴：打开净化隔离服包裹按顺序穿戴好净化隔离服、口罩和手套（按下列顺序穿戴：净化隔离服 戴口罩 戴手套），穿上拖鞋。用 75%酒精溶液消毒手套，刷感应开关进入缓冲间。（4）进入设施：刷感应开关进入走廊，进入家兔或豚鼠实验室。（5）原路退出：实验结束，原路返回一更，脱去手套，脱下隔离服、口罩、拖鞋，用 75%酒精溶液消毒双手，穿好普通工作服、鞋。退出设施，并将隔离服、口罩、灭菌包裹、拖鞋一并带出，放入指定收纳箱内。进出三楼犬设施（1）登记刷卡：登记信息后刷卡进入设施一更。（2

14、）一更更衣换鞋： 脱去普通工作服和鞋子放入更衣柜内，用 75%酒精溶液消毒双手，刷感应开关进入二更。（3）二更穿戴：打开净化隔离服包裹按顺序穿戴好净化隔离服、口罩和手套（按下列顺序穿戴：净化隔离服戴口罩 戴手套），穿上工作鞋。用75%酒精溶液消毒手套。（4）进入设施：刷感应开关进入走廊，进入犬实验室。（5）原路退出：实验结束，原路返回一更，脱去手套，脱下隔离服、口罩、工作鞋，用 75%酒精溶液消毒双手，穿好普通工作服、鞋。退出设施，并将隔离服、口罩、灭菌包裹、工作鞋一并带出，放入指定收纳箱内。进出 D8 普通设施（1）登记刷卡：登记信息刷卡进入走廊后，进入更衣室。（2）更衣穿戴：脱去外套和鞋子

15、放入更衣柜内，穿上实验衣和工作鞋。（3）进入设施：出更衣室通过走廊进入实验室。（4）退出：实验结束，退回更衣室更衣后退出设施。动物进出标准操作程序屏障环境采购实验动物 动物到达（核对订购信息、合格证等，检查动物运输包装盒完整性，登记） 放入缓冲间或动物传递间（连同包装盒），擦拭或喷雾消毒液 开启紫外灯 20min进入隔离检疫室 打开包装 观察动物状态 分笼适应性饲养 填写动物标签（标签在检疫室，可按需取用，原则上每笼 1 个）悬挂标签 实验结束出动物设施 登记备注：（ 1）动物在进入屏障系统前，运输包装盒应严格保持密封状态。 若动物在进入屏障系统前， 运输包装盒在运输途中破损或被人为打开， 均

16、不能进入屏障系统。（ 2）标签必须包含信息：项目名称、导师姓名、实验者姓名及联系电话、起止时间。普通环境：采购实验动物 验收登记 缓冲间（动物接收间） 检疫室观察动物状态 分笼适应性饲养 填写动物标签（标签在检疫室，可按需取用，原则上每笼 1 个）悬挂标签 实验结束出动物设施 登记物品进出标准操作程序物品 传递窗、缓冲间或高压灭菌器 洁库 清洁走廊 实验室 清洁走廊 缓冲间 出屏障环境。（注：实验器械等再利用物品使用结束后仍通过传递窗传出）进入屏障设施：（1）凡是可以清洗的物品（如饲养盒、饮水瓶、饮水瓶塞、净化隔离服等），在消毒灭菌前必须进行彻底的清洗。（2）能耐受高温高压灭菌的物品，如垫料、

17、隔离服、笼具、饮水瓶、某些工具等，均应先经过包装处理，再经过高压蒸汽灭菌后传入。（3）不宜用高温高压灭菌的物品，如拖鞋、塑料容器、某些工具和经60Co 照射灭菌的饲料包等，均应经过药物表面喷雾消毒或药物浸泡消毒后，由传递窗或缓冲间传入。（4）不宜用高温高压灭菌也不能用药物表面喷雾消毒或药物浸泡消毒的物品，如记录用纸、实验材料等，需经传递窗紫外灯照射消毒处理后传入。注：实验用器材如灌胃器可以进行高温高压灭菌的需要预先处理后经传递窗传入。进入普通设施：凡可能携带动物病原者， 必须经过有效消毒处理后， 再传入普通环境。物品传出：（1）使用废弃的物品、擦拭过笼具的毛巾、地面的消毒液、更换的笼具、饮水瓶

18、等必须从走廊 缓冲间 搬至洗消间。（2）每次更换下来的笼具、饮水瓶等物品通过走道运至缓冲间，再由系统外的工作人员从缓冲间取出至清洗间清洗。 或由实验人员从污物走廊带出至清洗消毒间。（3）传至外环境的固态废弃物（如废弃垫料、一次性口罩、手套、尖锐物品等） ，应及时归类分装，放入专用储存箱或垃圾袋并登记废弃信息。3.3 动物设施日常饲养管理换笼程序在清洁走廊取装有垫料的灭菌笼盒（大鼠取大笼盒， 小鼠取小笼盒） 动物放入干净笼盒污染笼盒（连同垫料）和饮水瓶通过走廊、 缓冲间推出屏障系统，登记缓冲间使用信息 添加饮水和饲料（无菌饮水在洁库取已灭菌饮水瓶接取） 观察笼盒内情况（如有无水瓶漏水、笼盒漏换等

19、）饮水瓶更换时间及注意事项每周 2 次，如因实验需要每天换水瓶的 （如每天换喂不同的药水等）可提前在申请本上写好申请， 得到老师批准后方可进行。每个饲养笼盒放一个水瓶， 不允许多放， 更不允许囤放在实验室，这样不方便其他实验人员正常使用， 也不利于水瓶的良性循环。每次换下来的水瓶要连同换下的饲养笼盒一并送出， 或者用垃圾袋送出， 同时登记缓冲间使用信息。 禁止从洁库取干净的盒子放水瓶 。饲养笼盒更换时间及注意事项同饮水瓶一样，每周两次。干净的笼盒都在走廊，实验人员可按需取用，如果需要用到空的笼盒，请实验人员到洁库取，用完后还放回洁库，禁止将走廊上装有垫料的笼盒腾出垫料使用。换下的笼盒放在推车上

20、， 登记缓冲间使用信息， 推进缓冲间，再把笼盒从推车上搬下，推出。注意事项：禁止在走廊的地面上拖拽笼盒。禁止将水倒进有垫料的饲养笼盒内。换下来的笼盒要及时推送出去，不允许堆放在实验室。隔离服的分类及更换1）隔离服分为男士和女士两种，男士的为蓝色，女士的为粉色，分别由蓝布和白布包裹，分放在男二更和女二更。2）隔离服的带出： 同学们做完实验将隔离服脱正， 用布包裹好，带出更衣室并扔进收纳盒内，禁止将隔离服留在一更，如果当天要继续穿，可放在二更，穿完及时带出。废弃物、动物尸体处理废弃物的处理（1）进动物时，将动物安顿好后，立即将包装纸盒连同饲料袋及其它垃圾一并送出屏障系统，登记缓冲间使用信息；（2）

21、实验残留的废弃物，需用黑色塑料袋装好后送出屏障系统；（3）实验用的注射器或者刀片之类的尖锐性器械需统一收集好，并用黑色塑料袋装好后送出屏障系统，放入医疗废弃物专用储存箱并登记废弃信息。动物尸体的处理（1）处死或自然死亡的动物，统一用黑色塑料袋装好后送出屏障系统，登记缓冲间使用信息；（2）需在黑色塑料袋的外侧贴好标签，标签需注明实验室编号、学生姓名、联系方式；（3）需在指定记录本上按照要求登记信息；（4）务必将丢在缓冲间的黑色塑料袋，送到专门摆放动物尸体的冰柜中，并登记废弃信息，否则按违规处理；动物设施内实验室操作规范（1）我校屏障系统为正压屏障系统，只能进行无感染性、化学毒性和放射性等不需要提

22、供特殊防护的开放性普通实验。 特殊实验需到相应生物安全保护级别的实验室进行。（2）我校屏障实验室内动物单独饲养在饲养间，大小鼠应分开饲养。（3）动物实验时应将动物转移到前室进行，以避免实验操作对周围动物的应激影响。（4）实验期间应保持实验室内的清洁。每次换笼或实验后应彻底将饲养间和前室的墙面、 台面和地面清理干净。 实验室内每周至少应消毒 1 次。与实验无关物品应及时带出实验室， 需要使用的物品应摆放整齐并贴好标签。（5）实验期间应保持实验室内安静，不能大声喧哗，不能播放与实验无关的劲爆音乐等。（6）实验期间不能无故在其它实验室间乱窜。（7）前室为动物实验日常操作间，动物处死前的取血、解剖等需

23、在屏障系统外解剖室进行。（8）患有化脓、创伤、皮肤病、感冒、肠炎、发热、传染病等伤病的人员及过敏者，不得进入动物设施。（9）隔离服和手套必须穿戴整齐，注意不得露出头发和裸手操作，口罩需罩住口鼻，袖口要包住手套口。动物解剖和取样地点（1）动物解剖和取样可选择自行带回教研室处理，或者申请本中心的解剖室。 需要注意的是， 确定在本中心解剖实验的同学，需要提前 3-5 天申请，并与本中心的相关负责人再次确认，以安排相应的解剖室。 如使用本中心仪器设备需按要求进行相应登记。（2）在本中心进行动物解剖的同学务必注意在实验结束后需把房间打扫干净并消毒， 动物尸体及时放入冰柜并登记相关信息。（3）如发现动物尸

24、体未及时清理或者房间没有打扫干净的情况，则记录档案并取消该同学下次申请本中心解剖室的资格。四、意外情况处理实验室工作人员发生意外事故时，如针刺损伤、或被大、小鼠咬伤抓伤时，应立即进行紧急处理。4.1 小型事故任何一种小的损伤，包括皮肤的破损或刺伤等都可能与传染性物质接触， 必须用大量清水冲洗后用肥皂水反复清洗，如果可能尽量挤出损伤处的血液，使用 75%乙醇或其他皮肤消毒剂，立即进行医疗处理。4.2 皮肤污染皮肤污染部位用水和肥皂冲洗，并用适当的消毒剂浸泡，例如， 75%乙醇或皮肤消毒剂 (外科用药 )。4.3 针刺和切割伤怀疑皮肤有损伤或针刺时，建议尽可能挤出伤口血液，然后用大量清水冲洗。4.

25、4 眼睛溅入液体眼睛溅入液体，立即用大量清水冲洗。必须迅速，冲洗时掰开眼皮。避免揉擦眼睛。连续冲洗至少10 分钟。五、门禁卡办理及使用为规范本中心的管理， 杜绝学生之前相互借卡、 卡不及时归还、随意带人进出本中心等现象，我中心对于门禁卡的申请、退还、补办等工作作出如下调整：5.1 门禁卡办理条件对于在本中心订购动物并在本中心 SPF 动物实验室进行实验的研究生，由实验者本人提出申请并登记相关信息后给予办理，本科生原则生不准办卡（单独完成动物实验者除外） 。5.2 办理时限申请办卡时间为每周一、四上午 9:0011:30，其他时间不接受申请。一般情况下，申办受理后的 3 个工作日内，申办者到本中心领取门禁卡。5.3 押金及归还缴纳 100 元押金。在实验结束后及时将自己的实验室打扫干净并将费用结算完成以后，归还门禁卡者退还全部押金。5.4 有关规定（1）妥善保管自己的门禁卡，实验结束后及时归还，并领取全部押金。一旦发现转借现象，门禁卡没收，