2021-农科院作科所-96个玉米iselect定制芯片数据分析报告kps infinium hd assay super manual

1、)试剂：NaOH,MA1MA2MSM, 样品配置1MNaOH-20冻存待用。每次使用前解冻，10倍稀释为0.1MNaOH取出MA1)试剂：NaOH,MA1MA2MSM, 样品配置1MNaOH-20冻存待用。每次使用前解冻，10倍稀释为0.1MNaOH取出MA1MA2,MSM解冻，融为液体后280 xg DNA(50ng/l，4l200 将新MIDIplate粘贴MSA120lMA1 加入MSA1plate4 l DNA sle加入MSA1platewellslabtrackingform上4l0.1MNaOH加入MSA1platewells，盖上96孔板cap振荡器上1600 rpm，混匀1m

2、in；离心机中280 xg 离心1min室温孵育，静置10 min68 l MA2 加入MSA1 plate MSA1platewellsM 加入MSA1plate 75 重新盖上cap振荡器上1600rpm，混匀1min；离心机中280 xg 离心1杂交炉中孵育，3722(20-24t)试剂：FMS,PM1100% 异丙醇RA1PB2100% 乙醇，HybChambers杂交盒，HybChambergaskets杂交盒衬垫，HybChamber 取出MSA1，50 xg离心150lFMS取出MSA1，50 xg离心150lFMS 加入MSA1platewells，重新盖上cap振荡器上160

3、0rpm，混匀1min；离心机中50 xg 离心137heatblock1(1) (2) MSA1冻存待用，-15 取出PM1置于室温-280 xg 100% 异丙醇若是冻存的MSA1，则取出解冻，50 xg 离心掀开MSA1的capmat，100lPM1 加入MSA1platewells，重新盖上振荡器上1600 rpm，混匀1 min37heatblock中孵育，5离心机中50 xg 离心1300l100%异丙醇加入MSA1platewells，重新盖上新的干燥cap将盖好的MSA1 上下颠倒翻转至少10 4离心机中3,000 xg 离心20 min；然后立即将MSA1取出离心机，弃除ca

4、p mat，立即翻 需要重新离心20 min)(1) (2) MSA1冻存待用，-15 46lRA1 加入MSA1platewells，RA1 用5 秒，然后将MSA1上下顺序改变后再作用5振荡器上1800rpm，混匀1min；离心机中280 xg 离心30封闭的 46lRA1 加入MSA1platewells，RA1 用5 秒，然后将MSA1上下顺序改变后再作用5振荡器上1800rpm，混匀1min；离心机中280 xg 离心30封闭的 - 的MSA1，放入95heat block中变性20 min 变性后的MSA1室温冷却30min，然后离心机中280 xg 离心30将放于HybChamb

5、erinserts：43lDNA (1)4x3 4x18x1杂交炉中孵育，4818(16-24330ml100% 乙醇加入XC4中，剧烈混匀15t)PB1,RA1XC1XC2TEM,XC3,STM,ATM,XC495%甲酰胺/1mMderDetergent, 乙醇eadChipAlignmentFixture，Te-Flow，Flow-ThroughChambers(withframes,spacers,glassbackplates,ands)，WashDish，Wash 200mlPB1 加入1个WashDish共2个150mlPB1 充满BeadChipAlignment准备clearp

6、lasticspacers和glassbackplates，安装好Wash 200mlPB1 加入1个WashDish共2个150mlPB1 充满BeadChipAlignment准备clearplasticspacers和glassbackplates，安装好Wash取出RA1XC1XC2TEM,STM,ATM解冻，3000 xg 离心1min待用配置 95%甲酰胺/1 mM EDTA：1 ml/1张 放置于WashRack的Wash Rack放置于第二个Wash Dish中，同上步上下提拉1 min装配Flow-ThroughChamber：将blackframe放置于BeadChipAl

7、ignmentFixture放置于blackframe中(完全被PB1浸没)，然后正确放置clearplasticspacer s正确放置于两端，和上下边缘相差5 (1150lRA1, 孵育30 秒，重复5(2450lXC1, 孵育10(3450lXC2, 孵育10(4200lTEM, 孵育15(5450l95%甲酰胺/1mMEDTA, 孵育1min,重复1(6) 再孵育5 ) (8450lXC3, 孵育1min,重复1(9) 等待Te-Flow温度稳定在 (1250lSEM, 孵育10(2450lXC3, 孵育1min,重复1次，再孵育5(1250lATM, 孵育10(2450lXC3, 孵

8、育1min,重复1次，再孵育5(1250lSEM, 孵育10(2450lXC3, 孵育1min,重复1次，再孵育5(1250(2450lXC3, 孵育1min,重复1次，再孵育5(1250lSEM, 孵育10(2450lXC3, 孵育1min,重复1次，再孵育5(1250lATM, 孵育10(2450lXC3, 孵育1min,重复1次，再孵育5(1250lSEM, 孵育10(2450lXC3, 孵育1min,重复1次，再孵育5 310mlPB1 加入第1个washdish，将stainingrack 验员，stainingrack的lockingarm面向实验员泡5的stainingrack上下提拉10 剧烈振摇XC4后，310mlXC4 加入第2个washdish，将stainingrack在第1个washdish中取出再置于第2个wash dish的stainingrack上下提拉10 后浸泡5 将在stainingrackbarcode正面