PCR实验室质量体系文件的编写

1、PCR实验室质质量体系文件件的编写湖南省临床检验验中心罗识奇一、质量体系文文件的含义： 质量体系系文件是实验验室检验工作作的依据，是是描述实验室室质量保障工工作的一整套套文件，而且且它应满足质质量体系有效效运行的需要要。1、质量体系文文件具有以下下特点：1.1 法规性性：经批准实实施的质量体体系文件具有有法规性，必必须执行；1.2 适应性性：所有文件件规定都以最最实际，最有有效的要求加加以确定，以以达到适用的的目的；1.3 唯一性性：一个机构构只有唯一的的质量体系文文件系统，一一项质量活动动只能规定唯唯一的程序；1.4 见证性性：质量体系系文件是质量量体系运行的的见证。2、质量体系文文件的编写

2、原原则：2.1 系统协协调原则：文文件上下层之之间应相互衔衔接，相互协协调，不应互互相矛盾，要要构成一个有有机整体；2.2 科学合合理原则：文文件不是对质质量体系的简简单描述，而而是要依据卫卫生部关于临临床基因扩增增检验实验室室管理办法（以以下简称办办法）及中中华人民共和和国国家标准准检测和校校准实验室能能力通用要求求（ISOO导的有有关规定，结结合本实验室室工作特点和和管理现状，作作到科学、合合理、有效指指导临床基因因扩增检验工工作；2.3 可操作作实施原则：编写质量体体系文件的目目的在于贯彻彻实施，指导导实验室检验验工作，所有有编写的质量量体系文件始始终要考虑到到

3、可操作性，便便于实施、检检查、记录、追追溯；2.4 文件的的装订应是活活页的：质量量体系是动态态的，以便发发现问题，便便于修改；2.5 文件应应为实验室人人员方便地得得到，并有效效地使用。3、质量体系文文件的内容：3.1 质量手手册：按评审审准则描述的的质量体系；3.2 程序文文件：描述质质量体系所涉涉及到的各个个部门的职能能活动，管理理和各项具体体检测程序；3.3 质量计计划：质量目目标、计划修修订和完成的的规定；3.4 质量记记录：表格、报报告、各类记记录。二、基因诊断实实验室质量手手册书写的基基本格式： 基因诊断实实验室质量体体系文件可按按基因诊断实实验室质量手手册形式命名名。1、封面：

4、实验验室名称和标标志，质量手手册的标题、编编号、发行版版次、密级及及发放登记号号；2、批准页：批批准人签名、生生效日期、持持有人或部门门（分受控和和不受控两类类）。批准页实例质量手册手册版号：A生效日期：年月日总 页 数：（包包括此页）批准人：日 期：年月月日副本控制：(不不)受控类编 号： 持 有 人人：3、修订页：修修订页用修订订表的形式说说明质量手册册各部分修订订状态。修订表基本形式式修订表受控质量手册的的持有者应负负责在收到修修订页后立即即将旧页次换换下。4、手册目录：列出手册文文件序号、文文件编号、文文件标题及页页码。5、前言，即实实验室简介，需需提供实验室室名称地址、通通讯方式、经

5、经历和背景、规规模、性质以以及对社会的的各项承诺，如如公正性声明明，要体现对对卫生部办办法精神的的贯彻落实情情况。6、质量方针和和目标：陈述述质量方针和和目标，并说说明质量方针针和目标如何何为实验室全全体人员所熟熟悉理解和执执行。例：某医院的质质量方针、目目标是：准确及时、严谨谨认真公正求实、持续续改进质量手册；保证体系为为：建立一系列的工工作制度和标标准操作程序序建立室内质控、室室间质评的质质量保证体系系建立质量监督机机制不断纠正、完善善质量体系7、质量管理机机构框图：一般有一定的任任职条件，有有相应的职责责和权力。例图：8、基因诊断实实验室工作制制度9、基因诊断实实验室标准操操作程序10、

6、基因诊断断实验室记录录、报告单及及表格三、基因诊断实实验室应建制制度Pro(Proceedure)的编写：1、程序文件的的管理和维护护制度1.1 目的：基因诊断程程序文件是指指导临床基因因扩增检验活活动的法规性性文件，属内内部受控文件件，不得擅自自修改、涂改改，不得遗失失、外借翻印印。为保持其其现行有效和和持续适应性性，并确立因因条件变化进进行修改的程程序。1.2 编写依依据：1.2.1 IISO/IEEC170225019999检测测和校准实验验室能力的通通用要求因因卫生部临临床基因扩增增检验实验室室技术验收表表（checck lisst）是根根据ISO/IEC177025而设设计1.2.2

7、 卫卫生部临床床基因扩增检检验实验室管管理暂行办法法及临床床基因扩增检检验实验室工工作规范1.3 适应范范围：临床检检验标本；1.4 内容：程序文件应应包含下列内内容：文件名名称、编号、页页号、总页数数 例：页眉眉页底应有：编写写人： 审核人： 批准准人： 生效日期期：年月日及总页页码。1.5 编制及及职责：程序序文件由PCCR实验室负负责人主持编编写、修订、审审核并保持它它的现行有效效性。由科主主任批准和颁颁布实施，并并负责解释。1.6 发放与与持有者责任任：程序文件件由科主任批批准发放，发发放与回收要要登记签字，由由PCR实验验室负责人保保管，并组织织全室工作人人员认真学习习，了解内容容，

8、熟悉其中中各项规定，程程序文件执行行情况纳入实实验室目标管管理，与奖惩惩挂钩。持有有者调任时，要要收回该程序序文件。1.7 修订：科室任何工工作人员均可可提出对程序序文件的修改改建议，文件件修改须经有有关人员讨论论，PCR实实验室负责人人根据条件变变化提出是否否修改的决定定，如作小的的修改则可在在修改页上进进行，修改文文件经科主任任审核批准后后，并填写入入程序文件修修改页。如果果文件须作重重大修改，PPCR实验室室负责人可进进行改版。新新版程序文件件经科主任批批准后生效，收收回旧版，并并予以销毁，登登记签字后发发出新版，保保证工作现场场只有唯一的的，最新的使使用版本。2、基因诊断实实验室工作制

9、制度Pro：2.1 基因诊诊断实验室分分区情况：各各区实物用品品应有明显标标识，严禁混混用；2.2 实验室室工作人员均均持证上岗；2.3 为有效效防止后扩增增区产物的污污染，实验工工作人员应遵遵循单向走动动原则。前PPCR区标标本处理区PCR扩增增区PCRR产物分析区区，严禁人和和物品反向流流动，进入每每个区前必须须更换有该区区特殊标识的的工作服和拖拖鞋，工作服服及拖鞋均有有专门的衣柜柜存放，每个个区均有专用用的一次性手手套并有固定定存放处。2.4 实验室室工作人员必必须严格按照照PCR实验验室操作程序序进行，实验验开始前必须须先做好室内内及工作台的的清洁消毒，离离心管、吸头头等一次性用用品均

10、需高压压灭菌处理。2.5 各实验验区之间的试试剂及样品传传递有条件的的应通过传递递窗进行。2.6 非本室室人员未经允允许不得进入入，工作人员员在工作时也也不能随意进进出，以免造造成不应有的的污染。2.7 实验结结束后应用110次氯酸酸钠溶液消毒毒实验台面，并并用紫外线照照射实验室，试试验中使用过过的吸头、离离心管等应置置于10次次氯酸钠溶液液中浸泡，消消毒后集中焚焚毁（1）。2.8 每天下下班前处理好好废弃物品，关关好水、电、门门窗。2.9 定期校校准和维护好好PCR仪、离离心机、水浴浴箱、冰箱等等仪器设备。万万元以上的仪仪器设备应做做好使用登记记工作。2.10 引用用文件及图表表：（1）基因

11、扩增增诊断实验室室工作制度。PPro: （为为本制度在质质量手册文件件中的编号及及页码。下同同） 3、实实验室人员配配置及培训制制度：3.1 目的：为保证实验验室有足够数数量的称职工工作人员，特特建立本制度度。3.2 适应范范围：基因扩扩增实验室的的人员配置、培培训考核及管管理等。3.3 人员配配制情况；3.4 人员要要求；3.5 人员培培训计划：有有计划及记录录表(1)；3.6 人员管管理：有实验验室人员一览览表(2)，并建建立所有工作作人员档案(3)，包括括人员学历、任任职资格、发发表论文、科科研成果等相相关资料复印印件装订成册册（活页）。3.7 引用文文件及图表。（1）人员培训训记录表；

12、（2）实验室工工作人员一览览表；（3）实验室工工作人员技术术档案。4、实验室内务务管理制度：4.1 目的：为使实验室室内务管理有有序、在控而而建立本制度度。4.2 适应范范围：本制度度适用于基因因扩增实验室室内务管理。4.3 制度细细则：根据各各自医院及科科室相关规定定编写5、实验室材料料的购买和管管理制度5.1 目的：为保证PCCR检测所使使用的试剂及及耗材供货渠渠道和质量的的稳定、可靠靠，而建立本本制度。5.2 适应范范围：适用于于PCR实验验室所购的试试剂盒、实验验耗材。5.3 试剂和和耗材的选购购：5.3.1 检检测试剂应与与扩增仪相配配套，而且需需三证齐全的的商品试剂；5.3.2 T

13、TiP头必须须使用有滤芯芯的PCR专专用TiP头头；5.3.3 其其余耗材由医医院统一进货货、管理等。5.4 试剂及及耗材的验收收：5.4.1 内内外包装检查查按照试剂质质检标准操作作程序执行(1)；5.4.2 上上述检查在到到货时完成，同同时进行记录录(2)；5.4.3 试试剂的性能检检查可见试剂剂质检标准操操作程序(11)；5.4.4 耗耗材的实验检检测：如：离离心管的检测测可用加温和和高速离心的的办法检测其其有无爆开或或漏液情况。带带滤心吸头可可用适配加样样器配合吸取取适量液体看看其有无堵孔孔及漏现象发发生，经上述述检查，合格格即可启用，不不合格则退货货。5.5 试剂及及耗材的储存存：一

14、般验收收后的PCRR试剂应存放放于20冰箱内，无无菌处理前的的耗材存放于于试剂准备及及贮存室，根根据日常工作作量，定期定定量处理后放放置于样品制制备室和扩增增室，实验室室负责人应定定期检查库存存、定期购置置试剂，并作作好记录(33)。5.6 本制度度引用的文件件及登记本：（1）试剂质检检标准操作程程序（2）试剂及耗耗材验收登记记本（3）试剂及耗耗材订购登记记本。6、仪器设备的的管理制度：6.1 目的：为保证PCCR实验室仪仪器设备得到到妥善管理，使使用的仪器设设备保持在良良好的工作状状态，特建立立本制度。6.2 适应范范围：基因扩扩增实验室所所有的仪器设设备。6.3 制度细细则：6.3.1 基

15、基因扩增实验验室涉及的主主要仪器设备备：扩增仪、恒恒温金属浴箱箱、高速离心心机、高速冷冷冻离心机、可可调移液器、混混匀器、冰箱箱、超净工作作台、移动式式紫外灯等。6.3.2 建建立设备档案案管理制度: 仪器设备备的一般情况况：序号、名名称、制造商商、接收日期期、接收状态态、启用日期期、目前放置置地点、接收收人员签字等等，应有仪器器设备一览表表(1)，设备备的一般情况况及使用人应应用卡片形式式贴在仪器表表面；仪器设设备的相关文文件应有：仪仪器设备的说说明书、操作作手册、保修修卡、 相关关仪器的管理理负责人； 仪器设备的的损坏、故障障、修理须在在登记本上记记录如下内容容：日期、设设备名称、损损坏或

16、故障原原因、修理单单位、人员及及修理结果，记记录人员签名名(2)。6.3.3 仪仪器应有工作作状态标识，正正常使用者贴贴绿色标签，有有故障维修暂暂停使用的贴贴黄色标签，不不能使用者贴贴红色标签（禁禁用）。6.3.4 仪仪器需按要求求定期作校准准或检定，应应有校准标识识、注明校准准检定日期及及下次校准或或检定日期，并并应作记录，具具体仪器校准准见仪器设备备校准SOPP。6.3.5 基基因扩增实验验室仪器实行行严格分区使使用，并用不不同颜色标识识。6.3.6 仪仪器设备的报报废由室负责责人提出申请请后由院有关关人员统一处处理。6.3.7 为为保持仪器设设备工作状态态的稳定，应应对其进行定定期的维护

17、和和保养，具体体见仪器维护护保养文件。6.3.8 为为使扩增仪处处于稳定工作作状态，在该该电脑上不得得使用非本室室的外来软盘盘，不能在电电脑上加载其其它程序和软软件，在使用用本室软盘进进行资料备份份时，需预先先杀毒方可使使用。6.4 引用文文件及表格：（1） 基因扩扩增诊断实验验室仪器设备备一览表（2） 基因扩扩增诊断实验验室仪器设备备维修登记本本。7、仪器设备的的使用制度7.1 目的：为保证仪嚣嚣设备得到正正确的操作使使用以满足检检测质量要求求及保证仪器器的使用寿命命。7.2 适用范范围：基因扩扩增诊断实验验室所有仪器器设备。7.3 制度细细则：7.3.1 仅仅为本实验室室工作人员有有权使用

18、实验验室的仪器设设备7.3.2 本本室工作人员员在使用仪器器前必须熟悉悉仪器的性能能和操作程序序，必须严格格按照仪器标标准操作程序序SOP（sstandaard opperatiion prroceduure）操作作（见各仪器器操作SOPP）。7.3.3 因因科研活动的的需要，使用用本实验室仪仪器的非本室室人员必须首首先熟悉本程程序的各项规规定，并由实实验室负责人人对其使用仪仪器考核认可可后，方可使使用。7.3.4 仪仪器使用严格格遵守分区使使用的原则，并并遵守标准操操作程序。7.3.5 主主要仪器使用用后应做好使使用记录和日日常维护（见见仪器设备的的管理制度）。8、仪器设备的的维护保养制制度

19、8.1 目的：为保持仪器器设备稳定良良好的功能状状态而建立。8.2 适应范范围：基因扩扩增诊断实验验室所有设备备。8.3 制度细细则：8.3.1 仪仪器设备的维维护保养操作作见相关SOOP，并做好好每天仪器的的保养、周保保养、月保养养。 8.33.2 建立立仪器设备维维护保养登记记本（见各仪仪器设备保养养登记本），效效果及记录由由实验室主任任负责检查、监监督。8.4 引用登登记本：各仪仪器设备保养养登记本。9、仪器设备的的校准制度。9.1 目的：为保证检验验仪器设备的的有效性和准准确性而建立立。9.2 适用范范围：本制度度适用于满足足基因扩增实实验室检测需需要有可能对对检测结果造造成误差的仪仪

20、器设备。主主要有：扩增仪、温温度计、恒温温水浴箱，可可调移液器等等。9.3 制度细细则：9.3.1 上上述设备在投投入使用时要要有校准计划划，并按照仪仪器校准程序序校准。(11)9.3.2 如如在检测中发发现存在结果果有漂移或偏偏差及其它可可疑情况时，通通过分析对可可疑设备进行行校准。9.3.3 仪仪器设备维修修后需进行校校准，方可重重新使用。9.3.4 校校准的有效标标识：经校准准的设备在仪仪器标签上注注明本次校准准的日期和结结果及下次校校准的预定日日期。9.3.5 可可调式移液器器的校准顺序序：按单一流流向规定，首首先校准试剂剂准备区及贮贮存区，然后后依次校准样样本处理区及及PCR扩增增及

21、产物分析析区，每校准准完一个区的的移液器，将将其放回原处处后，再取下下一个区的移移液器，进行行校准。9.3.6 建建立校准登记记本（见各仪仪器设备校准准登记本：记记录每次校准准的情况并将将校准的结果果送交科质量量负责人审阅阅核准。10、实验检测测操作管理制制度：10.1 目的的：PCR检检测是整个临临床扩增检验验最主要的过过程，为使其其有序，在控控，特建立。10.2 适应应范围：PCCR检测：样样本处理，核核酸提取纯化化，扩增产物物分析整个过过程。10.3 制度度细则：10.3.1 核酸提取、纯纯化、扩增产产物分析整个个过程的具体体操作见项目目SOP文件件及仪器使用用SOP文件件。(1-22)

22、10.3.2 试剂的分装装在试剂准备备区及贮存区区内进行，最最好由传递舱舱送至样本制制备区；样本本处理和核酸酸提取在样本本制备区内进进行，加入模模板后的反应应混合液由传传递舱送至扩扩增区；PCCR扩增及产产物分析在扩扩增区进行。10.3.3 样本的管理理依据样本管管理制度及相相应的SOPP(3)。10.3.4 检测时标本本的唯一性标标识中的“序序号”作为检检测过程中的的“检测号”进进行传递。 10.3.5 试管或或其它盖体分分离的容器，检检测号标识于于管身1/33处。10.3.6 移取所需体体积的标本后后，立即盖紧紧原始标本管管盖，将标本本继续保存于于20冰冰箱。 100.3.7 实验结果的的

23、记录依据实实验记录的管管理制度。(4)10.3.8 每次检测过过程必须有相相应的室内质质控，室内质质控的进行依依据相关SOOP文件并作作好记录。(5-6)10.3.9 检测完毕的的血清原始标标本保存一月月。10.4 引用用的文件和表表格：1、22、3、4、55、6（本文文略，写作时时要明确标出出）。11、实验室检检测结果报告告的管理制度度。11.1 目的的：检测结果果的报告是检检验过程的最最终输出，为为使报告生成成、发放、管管理受控，特特建立。11.2 适应应范围：适应应于基因扩增增实验室所有有的临床检测测项目的结果果报告。11.3 程序序细则：11.3.1 检测结果报报告应准确、清清晰、明确

24、和和客观；11.3.2 实时荧光PPCR测定结结果数据要经经分析，避免免因非特异性性荧光而造成成假阳性结果果，根据质控控品及室内质质控判断PCCR扩增的有有效性，只有有当质控品的的扩增结果符符合项目SOOP有关条件件时，才可发发出报告，否否则应重新测测定。11.3.3 定量测定的的拷贝数/mmI报告，并并有相关检测测的参考范围围。如果高于于测定方法线线性范围上限限则对样本稀稀释再测，结结果乘以稀释释倍数；如结结果低于测定定方法线性范范围下限，则则报告小于测测定范围下限限，而不能报报告为“O”、阴阴性或其它各各种形式的结结果。11.3.4 每份报告均均应包含以下下信息：标题；报告的唯一性标标识；

25、病人基本情况：姓名、性别别、年龄、科科别等；检测标本的特性性和状态；检测标本接收的的日期和进行行检测的日期期；采用的检测方法法、检测的设设备；检测标本的参考考值或参考范范围；实验操作及校核核人员的签字字及签发日期期。11.3.5 报告单的发发放应遵守科科室的有关规规定：报告单分为二部部分，如门诊诊和住院部应应写清楚如何何与分别发放放和接收报告告单？报告单遗失时怎怎么办？怎么补发？需邮寄的报告单单如何发？检测报告的保密密性，应制定定为病人的保保密措施，如如查询人员在在无任何有效效证据（件）时时不能提供其其任何人的检检测结果信息息。12、实验室记记录的管理制制度12.1 目的的：实验室记记录是质量

26、证证明资料及质质量体系运作作的主要组成成部分，为使使资料的记录录、保存状态态在控，特建建立。12.2 适应应范围：适应应于实验过程程中产生的数数据，文本资资料的记录和和保存，主要要有：病人标标本信息、实实际操作记录录、实验检测测结果、原始始申请报告单单，仪器使用用记录、环境境温度、湿度度记录等。12.3 制度度细则：分为为书面记录和和电子记录。12.3.1 书面记录：在样本接收室接接收标本，接接、收者均需需在可接收登登记本上签字字；(1)登记本上记录病病人信息包括括：姓名、性性别、检测项项目、标本类类别、编号等等，将标本带带入样本处理理室（血标本本闭盖离心后后）处理，登登记本留在样样本接收室，

27、对对不符合要求求的标本在“拒拒收标本登记记本”上记录录。(2)并作相相应处理；登记本上的记录录不能涂改，需需修改时可用用红笔在修改改内容上加双双杠并在备注注栏说明；检测过程中的记记录：专用实实验的记录本本，不同区记记录本不能混混用，试剂准准备及贮存室室记录每天检检测所用的试试剂情况，如如：名称、批批号、数量等等；样本制备室记录录检测样本数数及本室内进进行的操作过过程。在扩增增和产物分析析室记录质控控结果和分析析数据；(33)环境温度、湿度度(4)及冰箱箱温度记录(5)；实验记录保存于于各自实验操操作区内，至至少保存两年年以上，两年年后交科室建建档封存。 12.3.2电子记录录：结果的电子保存存

28、；保存的文件标识识；电子保存的软件件备份及总汇汇打印均应有有相应的规定定与说明。12.3.3 注意事项不论是书面记录录、每日总汇汇打印还是电电子记录均须须注意保密性性：要写具体体措施；从PCR扩增室室带出的实验验记录具有潜潜在的污染可可能，操作人人员应严格遵遵守分区管理理制度和防污污染措施。12.4 引用用的文件及表表格：1、22、3、4、55（本文略，写写作时要明确确标出）。13、室内质控控管理制度13.1 目的的：为严格控控制基因扩增增实验室中各各步骤的操作作程序，保证证测定结果的的准确性，以以达到预期的质量。13.2 适应应范围：本制制度适用于基基因扩增实验验室临床检验验项目的全过过程。

29、13.3 制度度细则：13.3.1 由于核酸扩扩增的高敏感感性，为避免免假阳性和假假阴性，必须须对RNA和和DNA分析析的各步骤进进行质量控制，以以保证测定结结果的准确性性和可重复性性；13.3.2 临床标本的的质量控制：按各项目SSOP进行；13.3.3 试剂的质量量控制：按各各项目SOPP进行；13.3.4 质量控制操操作步骤：血清质量控制品品：外购卫生生部或厂家质质控品，自制制质控品要溯溯源，或比对对试验；质控品要有处理理分析判断；每次检测质控结结果须有记录录；失控原因及纠正正措施须有记记录。13.3.5 室内质控图图的使用方法法：制订最适合本室室的质控计划划；通过观察图形的的规律性变化

30、化进行误差分分析，消除误误差途径，如如:曲线漂移移、趋势性变变化、连续多多点分布在靶靶值一侧、其其它规律性变变化(周期性性)等。通过图形的资料料对比进行误误差分析，解解除误差途径径，如每个月月的月底将项项目的全部质质检血清检测测结果X和ss与该批测定定的X和s进进行比较，如如果X发生了了变化，说明明准确度发生生变化提示有有非随机误差差存在。如果果当月s不同同则表明检测测的精密度发发生了变化。14、生物防护护与安全制度度14.1 目的的：为预防实实验室工作人人员在工作中中被感染和防防止交叉污染染。14.2 适应应范围：基因因扩增实验室室工作人员。14.3 制度度细则：14.3.1 污染途径： 空

31、气传播播:临床标本本中的污染源源在空气中传传播； 直接接传播：工作作中偶然针刺刺，碎玻璃划划伤直接传染染； 皮肤粘粘膜接触：临临床标本中的的感染源通过过破损皮肤粘粘膜接触造成成的感染；14.3.2 预防措施：A、B、CC、D等,要要有针对性地地写出措施。15、实验室废废弃物的处理理制度：15.1 目的的：为保证检检验质量，防防止交叉污染染，并保护工工作人员身体体健康。15.2 适应应范围：实验验室所有废弃弃标本、使用用过的耗材等等。15.3 制度度细则：15.3.1 实验室放置置装有垃圾袋袋的有盖污物物桶，并贴有有明显的颜色色标识；15.3.2 有潜在传染染性的样品（如如血、分泌物物等），应将

32、将此类样品置置污物袋内交交由保洁员负负责，焚烧或或按医院规定定统一处理；15.3.3 试验过程中中使用过的离离心管、吸头头须置于100次氯酸钠钠中浸泡后置置污物袋中，交交由保洁员负负责，按医院院规定统一处处理；15.3.4 实验使用过过的一次性手手套、帽子、口口罩等置污物物袋中交保洁洁员负责，按按医院规定统统一处理；15.3.5 检测使用过过的扩增管装装入一次性塑塑料袋密封后后置污物桶，交交由保洁员，经经高压消毒后后按医院规定定统一处理。16、实验室清清洁消毒处理理制度：16.1 目的的：为保证实实验室工作环环境清洁卫生生，防止交叉叉污染；16.2 适应应范围：适应应于实验室工工作环境、实实验

33、台面、工工作间、移液液器等的清洁洁消毒工作；16.3 制度度细则：16.3.1每每个实验室均均应有各自的的清洁用具，不不可混用；16.3.2 实验室清洁洁应按试剂准准备区及贮存存室、样本处处理室、扩增增及产物分析析室的方向进进行；16.3.3严严格遵守实验验室清洁消毒毒及污染应急急处理标准操操作程序(11)、及紫外外线消毒标准准操作程序(2)、并做做好记录(33-4)；16.3.4在在实验过程中中如发生标本本或试剂外溅溅或扩增仪内内毛细管断裂裂，应立即按按实验室清洁洁消毒及污染染应急处理标标准操作程序序处理。16.4 引用用的文件和表表格：1、22、3、4(本文略，各各自手册要标标出)。17、

34、化学试剂剂管理制度：17.1 目的的：保证化学学试剂的安全全保存和充足足备用；17.2 适应应范围：适应应于基因扩增增实验室使用用的各种化学学试剂。17.3 制度度细则：17.3.1 实验室所购购化学试剂验验收登记后，分分类编号，放放于干燥冷暗暗处；17.3.2 易燃、易爆爆、易挥发、易易风化、易潮潮解试剂，均均应密封，单单独分别保存存于干燥、冷冷暗、安全处处；17.3.3 强酸、强碱碱要分开存放放；17.3.4 药品标签，应应有药品名称称、分子式、分分子量、级别别、杂质含量量、批号、厂厂名等，无标标签者禁用；17.3.5 应有计划地地申请购买试试剂，以补充充消耗和扩充充需要的新品品种。18、

35、抱怨处理理制度：18.1 目的的：重视被检检查单位或个个人的抱怨和和申诉，正确确处理“抱怨怨”更加有效效地改进实验验室质量体系系。18.2 适用用范围：适用用于患者、临临床医护人员员针对检测结结果质量、服服务质量的投投诉和/或抱抱怨。18.3 制度度细则：18.3.1抱抱怨的接受 工作人员在在接受抱怨时时首先要做到到语言文明，热热情接待； 工作人员对对抱怨申诉应应记录，包括括抱怨者姓名名、地址、联联系方式、抱抱怨内容；18.3.2 抱怨的处理理如能当时处理的的抱怨应给予予及时解决，并并记录处理结结果；(1)不能当面答复的的抱怨应约定定反馈时间，根根据情况尽快快召集相关人人员商讨处理理方案，尽可

36、可能给予满意意答复，并记记录答复内容容；(1)抱怨的处理以抱抱怨者的满意意为目的，但但必须遵重科科学为原则，在在不违背科学学原则，医疗疗行为规范的的基础上，争争取抱怨者最最大程度的理理解；科室不能妥善解解决的抱怨，应应移交医院医医务处（科）遵遵循院医务处处（科）处理理程序和办法法。18.3.3 抱怨的善后后：对抱怨中反映出出的影响到实实验室质量及及质量体系有有效性的问题题，实验室负负责人应会同同科质量负责责人及其他相相关人员及时时分析存在问问题，提出纠纠正措施，并并由实验室负负责人监督执执行；如涉及到服务方方式及质量问问题，应参照照科内有关制制度对违反科科室管理制度度的人员给予予相应处罚；投诉

37、处理记录存存档保存两年年。18.4 引用用的文件及表表格：略，写写作时应明确确标出。四、基因诊断实实验室标准化化操作程序SSOP(sttandarrd opeeratinng proocedurre)的编写写：1、实验室清洁洁消毒及污染染应急处理程程序：1.1 目的：实验室用具具的清洁消毒毒及污染的应应急处理，防防止和减少实实验污染，保保证实验室工工作正常运行行。1.2 范围：整个与基因因扩增相关工工作场所：1.3 工作程程序：1.3.1 各各实验区清洁洁消毒工具只只可专用，不不可混用，要要有该实验区区明显标识；1.3.2 实实验完毕后，离离心管、吸头头须置于100次氯酸钠钠溶液中浸泡泡后与患

38、者样样品一起高压压灭菌后处理理；1.3.3 试试验中使用的的离心管、吸吸头在使用前前必须经高压压灭菌消毒在在消毒有效期期内使用；1.3.4 每每天对使用过过的移液器用用10次氯氯酸钠溶液进进行擦拭。每每2周1次对对移液器进行行高压消毒；1.3.5 实实验完毕及时时消除扩增仪仪内的毛细管管，装入密封封塑料袋中，与与其它生物污污染品一同交交医院焚烧处处理；1.3.6 用用10次氯氯酸钠（或775酒精）清清洁实验台面面和传递舱，并并用可移动紫紫外灯照射处处理半小时； 1.3.7 每周次次工作服交院院洗衣房洗涤涤消毒，不同同实验的工作作服隔天洗涤涤；1.3.8 实实验过程中如如发生标本或或试剂外溅，立

39、立即用浸有110次氯酸酸钠液的卫生生纸掩盖300分钟后，再再用75酒酒精擦拭，并并用清水擦洗洗，并做相应应记录；(11)1.33.9 扩增增仪内的毛细细管在扩增中中若有断裂或或外溅，对所所有可能污染染物均要按上上述方法严格格消毒处理，并并做相应记录录；(1)1.4 引用表表格:本文略略。2、紫外消毒标标准操作程序序：2.1 目的：对实验台面面和实验室内内环境进行消消毒，防止和和减少实验污污染；2.2 适应范范围：本实验验室的工作区区和实验台面面及相关的设设备；2.3 操作程程序：2.3.1 实实验开始前开开启各工作区区的紫外灯，定定时照射1小小时，由实验验室工作人员员进行；2.3.2 实实验结

40、束后对对工作台面用用可移紫外消消毒灯调至实实验台上方66090ccm处照射330分钟，由由实验室工作作人员进行；2.3.3 每每天工作结束束后开启各工工作区的紫外外灯，试剂准准备室定时照照射2小时，样样本处理室和和核酸扩增及及产物分析室室应照射过夜夜，由实验室室工作人员进进行。3、试剂的质检检操作程序：3.1 目的：为保证实验验室对试剂盒盒的验收质量量而建立。3.2 适用范范围：适应于于基因扩增实实验室所购的的临床诊断试试剂。3.3 程序细细则：3.3.1 试试剂盒内外包包装的质检： 外包装的的检查：包装装应完整无污污无损，标识识清楚，厂家家名称、品名名、批准文号号、生产及有有效日期； 内包装

41、检查查：内包装是是否有破损，泄泄漏，内装物物是否齐全、是否有相相应的使用说说明书等；3.3.2 试试剂盒性能质质检：收到试剂后，目目测试剂是否否处于冻存状状态；核对试剂品种和和数量，检查查试剂批号；及时将试剂转入入20冰冰箱保存，并并将上述检测测核对情况记记录在册；启用新批号试剂剂前一周对新新批号试剂进进行效验实验验。效验实验验要求设置空空白对照，阴阴性对照、阳阳性对照各一一。阳性标准准品梯度为1102、1003、1044、105、1106；如出现以下情况况中任何一种种的判断为试试剂不合格，不不能用于临床床检测： 空白对照出出现扩增。如如扩增曲线CCT值大于225，需重复复实验确证试试剂污染；

42、阳性对照和阴阴性标准品均均未检出而阳阳性标准品检检出率大幅下下降，表示试试剂失效或检检测灵敏度大大幅下降；阳性对照未检出出，阳性标准准品检测正常常，提示样品品提取液可能能存在问题。重复新旧提出液液阳性对照实实验，确定提提取液失效问问题。更换提提取液后该批批试剂方可使使用；空白对照无扩增增，阴性对照照有扩增，排排除其它污染染可能性后，提提取液存在污污染可能，单单独用提取液点样上机机，出现扩增增，需更换提提取液后方可可使用该批试试剂；阳性对照检出，阳阳性标准品未未检出或扩增增曲线明显系系统性CT值值偏大5个循循环以上，提提示阳性标准品存在问题题，更换阳性性标准品后该该批试剂方可可投入使用；空白对照

43、、阴性性对照无扩增增，阳性对照照正常检出，阳阳性标准品导导致的标准曲曲线之斜率（2.63.44）、截距（22634）、相相关性（0.98)均在使用范范围内，表明明该批试剂良良好，可以投入临床使用，将将实验结果写写入记录(11)。3.3.3 使使用记录本：1.试剂质质检记录本。4、温度计校准准操作程序：4.1 目的：保证温度计计的精确性。4.2 适应范范围：适用于于本实验室所所使用的温度度计。4.3 程序细细则：4.3.1 温温度计校准每每年进行一次次；4.3.2 由由院设备科人人员送计量局局对温度计进进行校准；4.3.3 经经校准过的温温度计可作为为恒温金属浴浴温度校准的的参照。4.4 引用表

44、表格：（1）仪器设备备校准登记表表。Tab5、恒温金属浴浴校准标准操操作程序：5.1 目的：确保恒温金金属浴温度的的准确性。5.2 适用范范围：适用于于本室现用的的恒温金属浴浴。5.3 程序细细则：5.3.1金属属浴的设定温温度与实际温温度可能存在在差异，应定定期对其进行行校准（每月月一次）。5.3.2 采采用比对校准准方法，即用用经计量局校校准的温度计计插入金属浴浴的加热孔中中，调节恒控控至一定的温温度（实验常常用温度：1100），待待恒温灯亮并并持续10分分钟以上，观观察温度计显显示温度与设设定温度是否否一致。5.3.3 做做好校准记录录。5.4 引用表表格：（1）仪器设备备校准登记本本。

45、 Tabb5.5 支持性性文件： 恒恒温金属浴箱箱使用说明书书。6、可调移液器器校准标准操操作程序:6.1 目的：确保可调移移液器的准确确性。6.2 适应范范围：适应于于各种品牌、可可调和多通道道移液器。6.3 程序细细则：6.3.1 校校准环境和用用具要求：室温：2025，测测定中波动范范围不大于0.5；电子天平：放置置于无尘和无无震动影响的的台面上，房房间尽可能有有空调，称量量时，为保证证天平内的湿湿度（相对湿湿度60990），天天平内应放置置一装有100ml蒸馏水水的小烧杯，小小烧杯10mml体积。测定液体：温度度为20225的去气气双蒸水。6.3.2 选选定标准体积积。拟校准体积；可调

46、式移液器标标定体积的中中间体积；最小可调体积（不不小于拟校准准体积的100），如为为固定体积可可调式移液器器，则只有一一种校准体积积。6.3.3 校校准步骤：将移液器调至拟拟校准体积，选选择合适的吸吸头；调节好天平；来回吸吹蒸馏水水3次，以使使吸头湿润，用用纱布拭干吸吸头；垂直握住移液器器，将吸头浸浸入液面23mm处，缓缓慢(133秒)一致的的吸取蒸馏水；将移液器以300度角放入称称量烧杯中，缓缓慢一致地将将移液器压至至第一档，等等待13秒秒，再压至第第二档，使吸吸头里的液体体完全排出；记录称量值；擦干吸头外面；按上述步骤称110次；每次测定值的均均值作为最后后加样器吸取取的蒸馏水重重量，按表

47、11所列蒸馏水水Z因子计算算体积；按校准结果调节节移液器。 无以上校准准条件者也可可写送院设备备科或计量局局校准。 附附表：蒸馏水水Z因子7、扩增仪仪校准标准操操作程序7.1 目的：保证循环仪仪正常运行的的准确性和精精密度，以获获得准确可靠靠的检验结果果。7.2 适应范范围：适应于于扩增增仪。7.3 程序细细则：7.3.1 新新安装的仪器器以生产厂商商的合格证明明为校准依据据；7.3.2 循循环仪每年由由厂商对其温温控系统进行行1次校准，（购购买设备时应应写进合同）。7.3.3 仪仪器使用过程程中如发现温温度有漂移或或怀疑实验结结果不理想的的可能原因是是循环仪时，应应及时与厂商商联系对仪器器进

48、行校准；7.3.4 仪仪器故障维修修后应对仪器器进行校准，合合格后方可使使用；7.3.5 做做好仪器的校校准记录(11)；7.4 引用的的表格：（1）仪器设备备校准登记表表 Tab7.5 支持性性文件： 扩增仪仪使用说明书书。8、扩增增仪维护保养养标准操作程程序：8.1 目的：对扩扩增仪进行维维护，以保证证仪器正常运运行。8.2 适应范范围：本SOOP适用于扩增仪仪。8.3 程序细细则：8.3.1 扩增仪仪在不使用时时，闭盖以减减少灰尘进入入到加热腔;8.3.2 如如果发现棱镜镜上有灰尘，立立即用干净的的棉棒和酒精精擦拭；8.3.3 每每个月用干净净的棉棒和酒酒精擦拭加热热腔内壁及棱棱镜；8.

49、3.4 如如发生毛细管管断裂，立即即用沾有100次氯酸钠钠的抹布擦拭拭，再用无水水乙醇擦拭，并并用紫外灯照照射过夜；8.3.5 透透镜的清洁：在反应舱底底部有一个透透镜，仪器使使用过程中，透透镜可能会沾沾上灰尘、水水份，影响实实验结果，可可用专用擦镜镜纸直接擦去去，也可蘸取取酒精擦拭透透镜。8.4 引用表表格：（1）仪仪器设备维护护保养登记表表 Tab8.5 支持性性文件：扩增仪操操作手册。9、恒温金属浴浴箱维护保养养标准操作程程序。9.1 目的：对恒温金属属浴进行维护护保养，以保保证仪器正常常运行。9.2 适应范范围：适应于于恒温金属浴浴；9.3 程序细则：9.3.1如果果发现仪器表表面有污

50、迹，则则用10次次氯酸钠清洁洁表面或用775酒精擦擦拭；9.3.2 每每月用棉签沾沾水清洗模块块上的锥孔，以以保证Epeendofff管与锥孔壁壁接触充分，导导热良好；9.3.3 如如果实验过程程中出现液体体不慎泄漏，立立即用软布蘸蘸10次氯氯酸钠反复清清洗，然后再再用75酒酒精擦拭；9.3.4 定定期用经校准准的温度计测测量其实际温温度并进行校校准（每月一一次）。9.4 引用表表格：（1）仪仪器设备维护护保养登记表表：Tab 9.5 支持性性文件：恒温温金属浴箱使使用说明书。10、式式离心机维护护保养标准操操作程序。10.1 目的的：对离心机机进行维护，保保证仪器正常常运行。10.2 适应应

51、范围：适应应离心机机。10.3 程序序细则：10.3.1离离心机不用时时，拔下电源源扦头；10.3.2 定期查看电电机碳刷，当当其长度小于于6毫米时，必必须及时更换换；10.3.3 每月用湿布布和酒精擦离离心机腔；10.3.4 如果操作过过程中出现液液体不慎泄漏漏，立即用软软布蘸10次氯酸钠反反复清洗，然然后再用755酒精擦拭拭。10.4 引用用表格：（11）仪器设备备维护保养登登记表。Taab10.5 支持持性文件：离心机使使用说明书。11、临床标本本采集及处理理标准操作程程序：11.1 目的的：规范临床床待检标本的的正确采集和和处理。11.2 适用用范围：基因因扩增检验实实验室的所有有临床

52、检测标标本。11.3 操作作程序：11.3.1 本实验室检检验标本：血血清或血浆、痰痰、11.3.2 血液标本：用真空采集集管采集血液液标本，病区区标本由护士士采集，门诊诊标本由检验验科门诊抽血血处专人采集集，血标本采采集后2小时时内送达实验验室（HCVV采用EDTTA抗凝血浆浆，所有抗凝凝剂严禁使用用肝素，因肝肝素是Taqq酶的强抑制制剂。）如标标本采血量不不足，严重溶溶血、采样时时间过长（特特别是进行RRNA检测时时）或出现其其它不合要求求的问题，应应拒收标本，并并在拒收标本本登记表上登登记(1)。并告告知相关科室室。血液标本本离心后用一一次性吸管吸吸取血清或血血浆加入已消消毒的1.55m

53、l的离心心管中，用记记号笔编号。化化验单，原始始标本及离心心管上的编号号均应一致；11.3.3 痰标本：用用带盖的无菌菌一次性塑料料瓶收集清晨晨第一口痰标标本送检，对对于无痰或少少痰患者，可可用45加加温的1000g/L NNaCL水溶溶液雾化吸入入或改变体位位使痰易于咳咳出。小儿可可以轻压胸骨骨柄上方以诱诱导咳痰，用用消毒棉拭子子刺激喉部引引起咳嗽反应应等方法，用用棉拭子采集集痰标本。标标本在室温下下保存不能超超过24小时时。样本处理理时，在样本本中加入23倍体积的的4NaOOH溶液，旋旋转一小时使使其充分液化化，取液化后后的标本1mml于无菌离离心管中，113000rrpm离心110min

54、弃弃上清液，沉沉淀用生理盐盐水洗涤2次次，弃上清，保保留存淀。编编号方式同上上，置200保存待检检。11.3.4 尿道或生殖殖道拭子：尿尿道或阴道分分泌物由医生生用专用取样样拭子（灭菌菌，一次性）采采集标本，及及时送检。采采集生殖道标标本要求病人人在采样前22小时内不能能排尿，采样样时将棉拭子子伸入男性尿尿道或女性宫宫颈口2-33cm，旋转转一周以获取取上皮细胞，将将取样后的棉棉拭子放入含含1ml无菌菌生理盐水离离心管中漂洗洗片刻在管壁壁上挤干后丢丢弃拭子，113000rrpm离心110min，弃弃上清，保留留沉淀。编号号方式同上，置置20保保存待检。11.3.5 尿液：由病病人自留尿液液于无

55、菌封闭闭的杯中送检检。取1mll于无菌离心心管中，133000rppm离心100min，弃弃上清，保留留沉淀。编号号方式同上，置置20保保存待检；11.3.6 脑脊液和胸胸腹水：由临临床医生采集集后放入消毒毒的试管中及及时送检。取取1ml于无无菌离心管中中，130000rpm离离心10miin，弃上清清，保留沉淀淀。编号方式式同上，置20保存存待检。11.4 引用用登记本：（11）标本拒收收登记本：RReg12、临床标本本的接收标准准操作程序。12.1 目的的：使临床检检测标本符合合要求，保证证检测结果的的准确性。12.2 适应应范围：基因因扩增检验实实验室的所有有临床检测标标本。12.3 程

56、序序细则：12.3.1由由PCR实验验室派出专人人负责标本的的接收，并实实行双签制度度：送检者与与接收者在标标本可接收登登记本上签名名。(1)12.3.2标标本的接收应应独立于三个个实验区之外外的接收区进进行，以避免免因标本的接接收而频繁出出入样本制备备区而造成的的污染。12.3.3对对于检验申请请单填写不完完整，检验单单姓名与标本本姓名不符，标标本标识不清清的应及时与与临床联系退退回并作记录录。(2)12.3.4 标本在下述述情况下被视视为不合格，工工作人员有权权拒收：使用不适当的容容器；容器有破损；标本外泄污染；标本溶血；标本量不足；室温下放置时间间过长等。12.3.5 对于验收合合格的标

57、本，应应立即分装并并标记，如不不能及时检测测应将其分类类保存至220冰箱。12.4 使用用登记本：（1）标本可接接收登记本：Reg（2）标本拒收收登记本：RReg13、标本的唯唯一性识别编编制程序：13.1 目的的：规范临床床标本唯一性性标识的编码码规则，保证证在任何时候候对标本的识识别不发生混混淆。13.2 适应应范围：基因因扩增检验实实验室的所有有临床检测标标本的编码。13.3 程序序细则：13.3.1 按检测类型型分类标记：根据检测项项目不同，每每种检测项目目标记唯一的的代号。如乙乙型肝炎病毒毒标记为GBB、丙型肝炎炎对应病毒标标记为GC、结结核杆菌标记记为GTB。前前加年、月、日日。例

58、：20003年元月月15日的丙丙型肝炎病毒毒标记为0330115GGC。13.3.2 按化验单接接收顺序编号号：在同种检检测类型的化化验单中，按按化验单顺序序编号。如第第一个检测乙乙型肝炎病毒毒的化验单编编号为GB0001。第二二个检测乙型型肝炎病毒的的化验单编号号为GB0002，以此类类推。13.3.3 实际编号为为两项原则合合并，组成标标本的唯一性性标识。标识识共分三部分分：标本采集集日期、检测测项目、该检检测批次的标标本序号，三三部分间连接接无间隔符号号，例如：整个标识为10012位，序序号为0011009（序序号可视单位位标本接收量量定）。13.3.4 标本的唯一一性标识须字字迹清晰明

59、了了，不得随意意作任何涂改改，必要时，在在旧标识上划划双线更改，更更改后应保持持旧标识可辨辨识。14、临床标本本的保存和安安全处置标准准操作程序：14.1 目的的：规范临床床标本的保存存和安全处置置。14.2 适用用范围：基因因扩增检验实实验室的所有有临床检测标标本。14.3 程序序细则：14.3.1 标本的保存存：血清或血浆标本本在4可保保存48小时时，20可保存一个个月；TB标标本不宜保存存，应在244小时内处理理完毕；提取取的核酸标本本在48小时时内检测可置置4保存，如如48小时不不检测应置20保存存，报告发出出后按规定处处理；原始血血清/血浆样样本在报告发发出前均置20冰箱箱保存，不得

60、得丢弃。报告告发出后，置置20冰冰箱保存一个个月（1）以以备查。14.3.2 标本的安全全处置：所有的标本均可可能具有传染染性，须严格格遵守医院内内有关院内感感染及日用垃垃圾的管理和和处理规定。工工作人员须注注意保持并随随时检查容器器的完整和有有无标本外泄泄发生；废弃标本经确认认后，保持容容器完整，置置于废弃标本本处，由卫生生处理人员统统一收集焚烧烧处理。14.4 使用用登记本：（11）标本超低低温保存登记记本：Regg15、扩增增仪标准操作作程序：15.1 目的的：正确使用用PCCR检测仪。15.2 适应应范围：适应应于扩扩增仪。15.3 程序序细则： 根根据各自PCCR检测仪操操作手册描述