甘草水制广地龙饮片质量标准研究

1、甘草水制广地龙饮片质量标准研究【摘要】目的建立甘草水制广地龙饮片的质量标准。方法按2022年版?中国药典?附录H水分测定法中的第一法、附录K灰分测定法和附录A浸出物测定法测定;采用HPL法测定饮片中的次黄嘌呤和肌苷的含量。结果甘草水制广地龙饮片质量标准为：水分含量5.0%，总灰分含量10.0%，酸不溶性灰分含量5.0%，水溶性浸出物浓度20.0%，乙醇浸提物浓度8.0%;次黄嘌呤含量0.006%，肌苷含量0.40%。结论建立了较完善的甘草水制广地龙饮片的质量标准，改变了过去仅依靠经历和感官判断的鉴定方法。【关键词】甘草水制广地龙;水分测定;灰分测定;浸出物测定;次黄嘌呤;肌苷Abstrat:b

2、jetiveTestablishaqualitystandardfrtheliquriepressedPheretiaaspegillu.ethdsSapleseredeterinedardingtthepreduresrerdedintheAppendixH,KandAfhinesePharapEia(2022),fristure,ashesandextratsdeterinatinrespetively,andthententfhypxanthineandinsineasdeterinedbyHPL.ResultsTepraryqualitystandardsereestablishedt

3、hattheistureinP.aspegillushuldbelessthan5.0%,iththettalashententbel10.0%,aidinslubleashententlerthan5.0%,thententfaterextrathigherthan20.0%,andtheethanlextratshuldbehigherthan8.0%,hypxanthinehigherthan0.006%,andinsinehigherthan0.40%.nlusinThisresearhhangedtraditinalethdsfjudgingqualitybasednexperien

4、esandsenses,andestablishedagdqualitystandardfrtheliquriepressedP.aspegillu.广地龙是钜蚓科动物参环毛蚓Pheretiaaspegillu(E.Pettier)的枯燥体，主产于广东和广西，为广东的道地药材1。其性咸寒，有清热、平肝、正喘、通络之成效，主治高热狂躁、惊风抽搐、风热头痛、目赤、中风半身不遂、喘息等疾病2。历代医家所用的地龙炮制品众多，在广东及香港现广泛应用甘草水制广地龙饮片，其目的是使其质地松脆、增效减毒、矫臭矫味以便于煎制服用。近代研究发现次黄嘌呤是广地龙平喘主要有效成分之一，有扩张支气管作用，并能对抗组胺及

5、毛果芸香碱引起的支气管收缩发挥平喘作用3。肌苷又称为次黄嘌呤核苷，在酸性及高温条件下容易分解为次黄嘌呤等有关物质4。据研究发现：广地龙越粗壮，其饮片中的肌苷含量越高5。2022年版?中国药典?中“地龙的炮制项下只收录了生地龙一种，且地龙的常规检查工程下没有收载醇溶性浸出物检查和有效成分的含量测定。目前尚未制定甘草水制广地龙的质量标准，现有文献多为对广地龙饮片中的琥珀酸6和次黄嘌呤等成分79进展含量测定,甘草水制广地龙饮片的质量控制仍停留在经历或古法的根底上。因此，为了保证甘草水制广地龙这种地方惯用炮制品的质量，本实验采用常规检查结合HPL法测定饮片中的次黄嘌呤和肌苷含量的方法，对甘草水制广地龙

6、饮片进展质量标准研究。1仪器与试药2方法与结果2.1炮制品的制备将广地龙饮片用10%的甘草水闷透，置炒制容器内，用文火炒干，炒至广地龙外表成棕色，取出，放凉。2.2性状鉴别呈薄片状，长34，宽约1，边缘略卷。具环节，背部棕褐色至紫灰色，腹部浅黄棕色;生殖带较光亮。体轻，略呈革质，质韧不易折断。气腥，味微甘、咸。2.3显微鉴别粉末棕黄色。表皮细胞为黄棕色，细胞界限不明显，有暗棕色的色素颗粒散在。肌纤维多，为透明或淡棕色，直径大约628，大多离散，细长，多弯曲，有的部分膨大，明暗相间纹理不明显。刚毛少见，常破碎散在，淡棕色或黄棕色，中部直径大约2833，先端多钝圆，有的外表可见纵裂纹，偶见皮样纹理

7、。2.4薄层鉴别同?中国药典?2022年版“地龙药材项下1方法。2.5常规检查12.5.1水分测定甘草水制广地龙饮片中挥发性成分较少，故采用?中国药典?2022年版一部(附录H第一法)测定。2.5.2总灰分、酸不溶性灰分测定按?中国药典?2022年版一部(附录K)方法测定。2.5.3浸出物测定按?中国药典?2022年版一部(附录A)浸出物测定法测定。包括水溶性浸出物测定和醇溶性浸出物测定。供试品需粉碎，使能通过二号筛，并混合均匀，醇溶性浸出物测定采用冷浸法,乙醇体积分数为95%。以上常规检查工程结果见表1。根据实验结果分析，建议在制定甘草水制广地龙饮片质量标准时，以含水量不超过5.0%，总灰分

8、不超过10.0%，酸不溶性灰分不超过5.0%，水溶性浸出物不得少于20.0%，醇溶性浸出物不得少于8.0%为宜。表1甘草水制广地龙饮片常规检查工程结果2.6含量测定2.6.2对照品储藏溶液的制备分别精细称取次黄嘌呤对照品和肌苷对照品适量，加流动相配制成1gL-1的次黄嘌呤对照品储藏溶液、100gL-1的肌苷对照品储藏溶液。转贴于论文联盟.ll.2.6.3供试品溶液的制备5精细称取样品2.0g，置具塞锥形瓶中，加水50L，密塞，浸泡1h，超声30in，残渣再加水50L提取1次，合并提取液，离心10in(4000rin-1)。精细量取提取液1L，用流动相定容至10L，滤过，即得。2.7方法学考察2

9、.7.1线性关系考察分别精细汲取次黄嘌呤对照品储藏溶液0.2、0.4、1.2、1.6、2L置10L量瓶中，用流动相定容至刻度，摇匀;分别精细汲取肌苷对照品储藏溶液0.4、0.5、0.6、1.0、1.2、1.5L置10L量瓶中，用流动相定容至刻度，摇匀。分别取上述溶液各10L，进样，按“2.6.1项下色谱条件进展分析。以质量浓度()为横坐标,峰面积(A)为纵坐标,绘制标准曲线，得回归方程:次黄嘌呤A=310-6-0.0108，r=0.9992，进样量在0.02080.208gL-1范围内线性关系良好。肌苷A=510-5+0.2665，r=0.9994，进样量在4.00415.015gL-1范围内

10、线性关系良好。2.7.2精细度试验取同一对照品溶液,重复进样6次,每次10L,根据峰面积计算含量，次黄嘌呤和肌苷的RSD分别为1.53%、1.80%,结果说明本方法精细度良好。2.7.3稳定性试验按“2.6.3项下方法制得供试品溶液,按“2.6.1项下方法于0、2、4、6、8、12h分别进样10L,根据峰面积计算含量，次黄嘌呤和肌苷的RSD依次分别为1.70%、1.80%,说明溶液在12h内稳定性良好。2.7.4重复性试验按“2.6.3项下方法分别制得供试品溶液6份,按“2.6.1项下方法进展测定,根据峰面积计算含量,次黄嘌呤和肌苷的RSD分别为1.5%和2.6%，说明本方法重复性良好。2.7

11、.5加样回收率试验取含量的广地龙粉末约1g,精细称定,共9份，分别精细参加次黄嘌呤和肌苷对照品溶液(次黄嘌呤质量浓度为0.1002gL-1，肌苷质量浓度为2.003gL-1)适量,按“2.6.3项下方法制备,依法测定。计算得到次黄嘌呤的平均回收率为96.8%，RSD值为1.78%(n=9);肌苷的平均回收率为103.2%，RSD值为1.43%(n=9)。结果见表2。表2次黄嘌呤和肌苷加样回收率测定结果2.8样品测定取甘草水制广地龙饮片5批，按“2.6.3项下方法制备供试品溶液，按“2.6.1项下条件测定样品中次黄嘌呤和肌苷的含量，结果见表3。5批样品次黄嘌呤的平均含量为0.0069%，肌苷的平

12、均含量为0.4516%。结合不同批次药材质量存在差异进展考虑，暂定按枯燥品计算，甘草水制广地龙中次黄嘌呤含量不得少于0.006%，肌苷含量不得少于0.40%。表3甘草水制广地龙饮片中次黄嘌呤和肌苷的含量3讨论建议甘草水制广地龙饮片的质量标准为：水分含量5.0%，总灰分含量10.0%，酸不溶性灰分含量5.0%，水溶性浸出物浓度20.0%，乙醇浸提物浓度8.0%,次黄嘌呤含量0.006%，肌苷含量0.40%。【参考文献】1国家药典委员会.中华人民共和国药典:2022年版一部.北京:化学工业出版社,2022:80-81;附录H,K,A.2龙艳华.地龙的化学及药理研究概况J.数理医药学杂志,2022,18(4):379-381.3王筠默.中药研究与临床应用.上海:上海中医药大学出版社,2022:245.4黄假设干,宾祖焕,梁峰,等.HPL法测定肌苷口服溶液中的有关物质J.中国药品标准,2022,9(5):369-372.5李钟,黄艳玲,李文姗.炮制对广地龙次黄嘌呤和肌苷含量的影响J.中药材,2022,32(1):31-32.6何琳,龙晓英.高效毛细管电泳法测定广地龙饮