肾阳虚大鼠垂体靶腺轴功能动态变化的研究

1、【摘要】目的研究肾阳虚大鼠垂体-靶腺轴功能的动态变化，讨论肾阳虚证的动态变化规律。方法60只SD大鼠，随机分为正常组和模型组。模型组用氢化可的松注射液后肢肌肉注射，连续29d。分别于第15，23，30天取大鼠血清放射免疫法测定垂体-靶腺轴激素(TSH，T3，T4，FSH，LH，T，ATH，RT)的含量，同时取垂体和靶腺(甲状腺、肾上腺、睾丸)称取重量。结果肾阳虚模型组第15，23，30天垂体-靶腺轴激素程度不断下降，且垂体和靶腺激素下降程度一致;肾阳虚模型组在第1530天出现垂体-靶腺轴激素程度的降低，垂体、靶腺重量减轻;与模型组15天比拟，模型组中期(23天)垂体-肾上腺轴与垂体-性腺轴的波

2、动幅度较垂体-甲状腺轴明显。结论肾阳虚时，存在垂体-靶腺三轴功能的同时低下，相对于垂体-甲状腺轴，垂体-性腺轴和垂体-肾上腺轴激素程度变化更敏感。【关键词】肾阳虚大鼠;垂体-靶腺轴;功能;动态变化Abstrat：bjetiveTbservethedynaihangesffuntinnthepituitary-targetglandaxisesfthekidney-yangdifiientrats,andtexplrethehangelafkidneyyangdifiientsyndre.ethdsTheratseregivenhydrrtisnebyintrausularinjetinfr30

3、daystakedifiientfkidney-yangdels.Hrnentents(TSH,T3,T4,FSH,LH,T,ATH,andrt)inserufthepituitary-targetglandaxiseseredetetedbyradiiunassaynday15,day23andday30.Thenpituitary,thyridgland,adrenalglandandtestisereeasured.ResultsIndelgrup,frday15tday30,thehrnesfpituitary-targetglandaxiseseredereaseduneasingl

4、y,andthedrpdegreefpituitaryandtargetglandsasnsistent.Desendenthrnefthepituitary-targetglandaxis,dereasedtargetglandanddeteriratedpathlgirphlgyindelgrupurredfrday15tday30;paredithday15,nday23,thehnesfpituitary-sexglandaxisandpituitary-adrenalglandaxisflutuatedathigherlevelthanpituitary-thyridglandaxi

5、s.nlusinThestudyindiatesthatthedynaihypfuntinfpituitary-targetglandaxisesarseinthekidneyyangdifiientrats,thehrnehangesfpituitary-sexaxisandpituitary-adrenalglandaxisareresensitivethanthseinpituitary-thyridaxis.Keyrds：Kidney-yangdefiientrats;Pituitary-targetglandaxises;Funtin;Dynaihanges自明清以来，中医一直认为肾

6、为脏腑之本，十二经之根，先天之本在于肾。肾阳主导一身之阳气，火衰其本那么阳虚之证迭出。因此肾阳虚证一直是中医的研究重点。研究证实，肾阳虚与现代医学的神经内分泌系统有关，肾阳虚证在下丘脑-垂体-靶腺(肾上腺皮质、甲状腺、性腺)轴有不同环节、不同程度的功能紊乱1。对于肾阳虚大鼠垂体-靶腺轴的研究，我们具备良好的实验根底25。随着研究的深化，发现中医的“证是一种综合的功能态，既是相对稳定的，又是动态、可开展、可转化的。为了更全面研究肾阳虚时的病理变化，本文应用氢化可的松肌肉注射这一常用方法复制大鼠肾阳虚模型，动态观察模型早期(15天)，中期(23天)，晚期(30天)的垂体-靶腺轴激素以及靶腺形态学变

7、化。1材料1.2试剂与药品0.9%氯化钠注射液，上海长征富民药业华中产品，产品批号：05062115;氢化可的松注射液，天津金耀氨基酸产品，批准文号：国药准字H12022886;促甲状腺激素(thyrid-stiulatinghrne，TSH)、三碘甲腺原氨酸(3,5,3-triidthyrnine，T3)、四碘甲腺原氨酸(thyrxine，T4)、促肾上腺皮质激素(adrenrtitrpihrne，ATH)、皮质醇(rtisl，RT)、促卵泡激素(fllilestiulatinghrne，FSH)、黄体生成素(lutEinizinghrne，LH)、睾酮(teststerne，T)，放射免疫

8、试剂药盒由北京北免东雅生物技术研究所提供。2方法2.1分组与造模2.1.1动物分组取雄性SD大鼠60只，适应环境5d，随机分为正常对照组，肾阳虚模型组，每组30只。2.1.2造模方法6正常对照组：用生理盐水(0.9%的氯化钠溶液)0.3l后肢肌肉注射，每天1次，自由饮水、饮食，连续29d;肾阳虚模型组：氢化可的松注射液充分混匀，按2.5g/100g后肢肌肉注射，1次/d。自由饮水、饮食,连续29d。2.2生物学指标的测试为了获得可靠实验数据，对动物采取平行处理，两组动物分别在第15天(10只)，23天(10只)，30天(10只)处死，取动物血清用放射免疫分析法检测样品中TSH，T3，T4，FS

9、H，LH，T，ATH，RT的含量。2.3统计学方法各组数据均以s表示,组间比拟用t检验,在SPSS10.0软件上完成。3结果不同时期动物出现不同程度的体重下降，活动减少，反响迟钝，喜扎堆，畏寒喜暖，体毛枯萎，肛周污染，采食量饮水量减少等病症。模型组15d表现为轻度，23d加重，30d最严重。生物学指标测定结果见表14。表1大鼠血清TSH，T3，T4的动态变化表2大鼠血清FSH，LH，T的动态变化表3大鼠血清ATH，RT的动态变化表4垂体、睾丸、甲状腺与肾上腺重量的变化与正常组比拟，*P0.01;与模型组15d比拟，P0.01;与模型组23d比拟，P0.01;n=10转贴于论文联盟.ll.4讨论

10、很多文献报道，肾阳虚存在下丘脑-垂体-靶腺轴的功能紊乱。虽然目前的研究已经到达分子基因程度，但是对垂体-靶腺轴的研究主要集中在对一个轴或两个轴的研究，如有研究发现肾阳虚大鼠垂体促甲状腺激素(TSH)细胞、甲状腺滤泡上皮细胞出现内质网、高尔基体扩张，线粒体空化，细胞变形，核的形态改变等超微构造的损伤7;肾阳虚时下丘脑、血淋巴细胞a2+i和血清钙的显著升高，导致a2+信号的异常，使下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱8。本实验通过对垂体-靶腺三轴各激素程度的测定、靶腺重量称重，并用相关统计学方法进展分析，较全面观察肾阳虚时的病理变化。肾阳虚证候形成的病因病机多为先天禀赋缺乏，或久病及肾，有一个慢性的疾病

11、开展过程,因此在动物实验中完全模拟人的肾阳虚证候是一项艰巨而复杂的工作，必须考虑到中医证的开展和变化。本课题前期研究已经提示较理想的肾阳虚动物模型时间应为1530d9。本实验采取造模30d，动态观察第15，23，30天时动物的病理变化，研究发现，垂体分泌的促激素和靶腺激素在15，23，30d同时下降，且下降幅度一致。肾阳虚大鼠垂体重量的变化到30d也和靶腺重量的变化一致。这说明肾阳虚时，垂体和靶腺在功能和形态上同时受损害，且受损程度一样。这和文献报道肾阳虚大鼠血浆糖皮质激素程度降低是由于垂体前叶功能受损所致的结论一致10。研究还发现肾阳虚时，存在垂体-靶腺三轴功能的同时低下，垂体-性腺轴和垂体

12、-肾上腺轴激素程度变化敏感，中期(23d)与早期(15d)比拟，指标明显下降，有极其显著差异，P0.01(见表23)。垂体-甲状腺轴激素程度变化不敏感，中期(23d)和早期(15d)无显著差异，到了晚期(30d)，TSH，T3，T4才与15d、23d有差异，见表1。这说明垂体-性腺轴和垂体-肾上腺轴功能低下是反映肾阳虚证比拟敏感的指标。本课题所做的靶腺重量测定也支持这一结论(见表4)，其机制有待进一步研究。【参考文献】1沈自尹.肾的研究(续集).上海:上海科学技术出版社,1990:313.2李炳如,佘运初.补肾中药对下丘脑-垂体-性腺轴功能的影响J.中医杂志,1984,25(7):63.3Li

13、Bingru,SheYunhu.TheeffetfKindeyinvigratinghinesetraditinaldrugsnthefuntinsfthehypthalaus-pituitary-gnadsaxisJ.J,T,1985,5(2):119.4秦达念,佘白蓉,佘运初.菟丝子黄酮对实验动物及人绒毛组织生殖功能的影响J.中药新药与临床药理,2000,11(6):349.5Da-nianQIN.EffetsfflavnidsfseenusutaenthereprdutivesysteinaleratsJ.AsianJurnalfAndrlgy,2000,2(2):99.6宋春风,尹桂山,侯洁，等.补肾中药对肾阳虚大鼠垂体-肾上腺超微构造的影响J.中医药研究,2001,17(2):41.7宋春风，尹桂山，李恩，等.补肾益气中药对肾阳虚大鼠垂体-甲状腺超微构造的影响J.中国中医根底医学杂志，1999，5(9)：22.8宋春风,