组织病理切片以及HE染色_第1页
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文档简介

1、组织病理切片以及HE染色staining，HE 染色）能较好地显示组织结构和细胞形态，可用于观察、描述正常和病变组织的形态学，而且 HE 切片可较长时间保存，被称为常规染色方法。（二）实验步骤：一、制作切片1、取材、固定：取小鼠肾脏组织适当大小，并且放入盛有固定液的小瓶中保存。2、组织的脱水、透明、浸蜡与包埋组织固定后还需经过脱水、透明、浸蜡等过程才能制成蜡块，进溶剂的媒介作用，使石蜡浸入组织块。在此过程中，因组织块中的水分被溶剂所取代，组织块变得透亮，因此称之为透明。组织染色后也要进行透明。最常用的透明剂为二甲苯，处理时间为30min左右。组织经透明后在溶化的石蜡内浸渍的过程称浸蜡。用其他浸

2、透剂（如火棉胶、碳蜡和明胶等）渗入组织内部的过程称为浸透或透入。为使石蜡充分渗入组织块中，常需经过3小时的浸渍，期间需更换3次石蜡。一般用于浸蜡的石蜡熔点为52-56。组织块经过浸蜡或浸透，用包埋剂（石蜡、火棉胶、碳蜡和树脂等）包起的过程称包埋，包埋后便制成含组织的块。这种包埋块可使工作中最常用的包埋方法。用于包埋的石蜡熔点一般为 60左右。1 / 3文档可编辑但在有些情况下，如某些酶染色时，则需采用低温石蜡包埋，以保存组织内酶的活性。3、切片、制片石蜡切片常用的切片机有轮转式切片机和平推式切片机，以前者为多用。切片厚度一般为 3-5m。切片时先将组织片平摊于一块玻璃上，迅速滴加30的酒精水溶

3、液使组织片完全展开，再移入40恒温热水器中。也可直接将组织切片移入 40的恒温热水器中，待组织片完全展开后将其贴附于载玻片上，经 56-60烤片 30-60min后即可进行染色。二、HE染色1.二甲苯脱蜡210 min；2.无水乙醇洗去二甲苯25min；3. 95、80乙醇各l0 min，自来水洗l min（不要让急水直接冲4.苏木素染色4 min，自来水洗2 5. 1盐酸酒精分化20 2 6.1稀氨水返蓝21min；7.伊红染色8. 80乙醇脱水10s，95酒精10s，无水乙醇9.无水乙醇10min；10.二甲苯210 min；11.中性树胶或加拿大树胶封片。（三）实验结果：细胞核呈蓝色；细胞浆、肌肉、结缔组织、红色或紫

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