维药雪莲前列栓的质量标准研究

1、维药雪莲前列栓的质量标准研究【摘要】目的建立雪莲前列栓的质量标准。方法采用薄层色谱(TL)鉴别处方中的雪莲，用高效液相色谱(HPL)法测定雪莲前列栓中绿原酸的含量。使用atersRp18(1504.6，5);检测波长：327n;流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液(1090);流速：1.0lin-1;柱温：35。结果在TL图谱中可检出雪莲的特征斑点，HPL法在绿原酸26.68293.48g(r=0.9998，n=6)范围内，有良好的线性关系，平均加样回收率为97.86%(n=9)，RSD为1.89%。结论所采用的方法准确、可靠,可行性及重复性良好，能有效控制该制剂的质量。【关键词】雪莲前列栓;绿原酸

2、;高效液相色谱;薄层色谱维药雪莲前列栓是雪莲、红花、没药等多味维吾尔药材组成，具有消炎、消肿、通淋，用于慢性前列腺炎及前列腺增生等疾玻为了更好地控制其质量,保证临床疗效,本实验采用薄层色谱(TL)法对其进展了定性鉴别研究,建立了制剂雪莲的薄层定性鉴别方法,并采用高效液相色谱(HPL)法测定了制剂中绿原酸的含量,为本品质量标准的制订提供了根据。1仪器与试药aters600型高效液相色谱仪(美国aters公司)，包括aters2487紫外检测器;ETTLERAE200型电子天平，SartriusBP211D型电子天平，KT-1000超声波清洗器。乙腈为色谱级，其它试剂均为分析纯;硅胶G(青岛海洋化

3、工消费);绿原酸对照品(批号0753-200111)，芦丁对照品(批号0753-200111)，雪莲对照药材(121205-0101)(中国药品生物制品检定所提供);雪莲前列栓中试样品由新疆奇康哈博维药消费，批号为040402，040405，040410。2方法与结果2.1雪莲的薄层色谱鉴别取供试品3粒，断碎，称取约2.2g，置索氏提取器中，加氯仿适量，回流脱脂5h以上，弃去氯仿溶液，滤渣连同滤纸挥尽氯仿;参加甲醇适量，回流提取至近无色，水浴蒸至近干，加70%甲醇2l溶解，作为供试品溶液。另取雪莲对照药材1g，加甲醇20l，超声提取30in，水浴浓缩至1l，作为对照药材溶液;取芦盯绿原酸对照品

4、，甲醇溶解，分别制成每毫升含4g的溶液，作为对照品溶液。取不含雪莲的阴性样品3g,按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。照薄层色谱法?中国药典?2022年版，部(附录VIB)试验，汲取供试品溶液10l，对照药材、对照品溶液5l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10612)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%亚硝酸钠的1%的甲醇溶液，加热至斑点明晰。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上显一样颜色的斑点。阴性无干扰。结果见图1。1.阴性对照24.供试品(批号：040402，040405，040410)5.雪莲对照药材6.芦丁

5、对照品7.绿原酸对照品图1雪莲前列栓的TL鉴别2.2含量测定2.2.1色谱条件色谱柱为atersRp18(1504.6，5)，加保护柱;检测波长：327n;流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液(1090);流速：1.0lin-1;柱温：35。理论塔板数按绿原酸峰计算应不低于1000。流速为1.0lin-1时，在此条件下，绿原酸保存时间、别离度、理论板数等色谱参数均符合要求。2.2.2对照品溶液的制备精细称取绿原酸对照品7.6g，置10l量瓶中，加70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品储藏液(0.76gl-1);精细量取对照品储藏液1l置50l量瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每毫升含绿

6、原酸15.2g)。转贴于论文联盟.ll.2.2.3供试品溶液的制备取供试品10粒，碎断，取约2.2g，精细称定，置索氏提取器中，加氯仿适量,回流脱脂5h以上，弃去氯仿溶液，滤渣连同滤纸挥尽氯仿;参加甲醇适量，回流提取至近无色，水浴蒸至近干，加70%甲醇定容至50l量瓶中，摇匀，用微孔滤膜(0.45)滤过，即得。2.2.4阴性对照溶液的制备按处方制备不含雪莲药材的供试品，依供试品溶液制备方法制成阴性供试品溶液。2.2.5线性关系考察精细量取对照品储藏液1l置50l量瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每毫升含绿原酸15.2g)。制得标准品溶液，取2，6，10，14，18，22l进样。以绿原

7、酸进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程为：Y=2646.3X-1722.9，r=0.9998，结果说明在26.68293.48g范围内，绿原酸进样量与峰面积之间有良好的线性关系。2.2.6精细度实验精细吸劝2.2.2项下的对照品溶液各连续进样5次，每次10l，测得绿原酸峰面积的RSD为0.87%，说明仪器精细度良好。同一批供试品(040402)制成供试品溶液，连续进样6次，10l/次,测得绿原酸峰面积的RSD=0.67%，说明样品精细度良好。A-对照品B-样品-阴性样品a-绿原酸图2高效液相色谱图2.2.7稳定性实验取同一供试品(批号：040402)按“2.2.3项下方

8、法制备供试液，分别于0，2，4，6，8，12h进样10l，测定绿原酸的峰面积，结果绿原酸峰面积的RSD为0.86%，结果供试品溶液12h内稳定。2.2.8重复性实验同一批样品(040402)分别制成5个供试品溶液，连续进样6次，10l/次，进样测得绿原酸峰面积并计算含量，RSD为0.40%(n=6)。说明本方法重复性良好。2.2.9回收率实验精细称取供试品(040402)约1.1g，共9份，精细称定，分别置索氏提取器中，分别参加绿原酸对照品溶液(1.002gl-1)267.5，335.7，401.3l，加氯仿180l，回流5h以上，弃去氯仿溶液;滤渣连同滤纸挥尽氯仿，参加甲醇适量，回流提取至近

9、无色，水浴蒸至近干，加甲醇定容至50l量瓶中，摇匀，进样10l，测定，平均回收率为97.86%(n=9),RSD为1.89%。结果见表1。2.2.10样品含量测定取小试7批和中试3批样品(2.2g/粒)，每批重复测定两次，按“2.2.3项下方法制备供试液，分别进样10l，测定，以峰面积计算绿原酸含量。结果见表2。表1绿原酸加样回收率实验结果表210批样品含量测定结果3讨论本实验采用薄层层析法分别对其主要成分雪莲进展了鉴定,并采用高效液相色谱法制定了绿原酸的含量测定方法,到达了有效控制该制剂品种质量的目的。实验中方法具有灵敏准确、重现性好的特点,适宜于该制剂质量控制。根据上述实验结果，考虑到药材

10、的来源，以及制剂消费、储藏等方面的因素，暂定本品每粒含雪莲以绿原酸(16H189)计，不得少于500g。由于购自中国药品生物制品检定所的绿原酸对照品(含量测定用)纯度达不到规定的要求，故采用归一化法对绿原酸对照品含量进展测定。精细汲取绿原酸对照品溶液10l，注入高效液相色谱仪，记录色谱图30in，采用归一化法计算绿原酸对照品(供含量测定用)含量，结果绿原酸对照品含量分别为87.78%，87.73%，平均含量为87.8%。本文对雪莲前列栓按?中国药典?2022年版部附录I项下规定的方法，对厂家提供的3批(040402，040405，040410)供试品进展了检查，结果符合检查要求。为了优化供试品中绿原酸提取方法，选择了甲醇超声，冷藏处理法;石油醚超声处理，甲醇回流法;置索氏提取器氯仿回流脱脂法等。结果法说明脱脂效果差，不能用于高效液相仪的测定，以免污染检测池及液相柱。法说明绿原酸回收率达不到要求。法说明脱脂完全，提取完全，绿原酸回收率到达要求。故采用以法为供试品提取方法16。【参考文献】1中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准(中药材)，第1册S.中华人民共和国卫生部，1992：10.2关家彦，王玮文.天山雪莲浸提液制备工艺的考察J.沈阳医科大学学报，1995，64(12)：209.3李君山，蔡少青.雪莲花类药材的化学和药理研究进展J.中国药学杂志，19