拳参正丁醇提取物对大鼠心肌肥厚时钠钾及钙ATP酶活性的影响

1、拳参正丁醇提取物对大鼠心肌肥厚时钠钾及钙ATP酶活性的影响【摘要】目的观察拳参正丁醇提取物对异丙肾上腺素(Is)所致大鼠心肌肥厚的保护作用及其对Na+-K+-ATPase，a2+-ATPase，K，LDH活性的影响。方法采用Is1gkg-1d-1，背部皮下注射，连续10d，建立大鼠心肌肥厚模型。造模第2天开场给予不同浓度的拳参正丁醇提取物或NS，连续14d，末次给药后禁食12h，称重，麻醉后断头取血，测定血清LDH的活性、心肌组织Na+-K+-ATPase，a2+-ATPase，K及LDH的活性。结果模型血清LDH的活性升高，心肌组织Na+-K+-ATPase，a2+-ATPase，K及LDH

2、的活性降低；与模型组相比，拳参正丁醇提取物治疗组血清LDH的活性降低，心肌组织Na+-K+-ATPase，a2+ATPase，K及LDH的活性升高。结论拳参正丁醇提取物可通过进步Na+-K+-ATPase，a2+-ATPase的活性起抗心肌肥厚作用。【关键词】拳参正丁醇提取物；心肌肥厚；钠钾ATP酶；钙ATP酶拳参具有清热、镇惊、理湿等疗效。拳参通过95%的乙醇提取后，再依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，其正丁醇萃取局部即得拳参正丁醇提取物PlygnuBistrlaL.n-ButylAlhlExtrat，PBNA，主要成分为丁香苷、芦盯儿茶素及ururinA1。有实验说明，拳参提取物具有抗心

3、律失常2、镇痛3、中枢抑制4、心肌缺血保护5等作用。心肌肥厚是以心肌细胞体积增大和蛋白含量增多为主要特征的代偿反响，是对各种心血管刺激因子的适应反响，但持续的心肌肥厚会导致心衰而威胁生命。心肌肥厚的发生是许多因素共同参与的结果。本课题组前期研究说明，PBNA可通过增强抗氧化作用及改变血管活性物质合成而起抗心肌肥厚作用6，7。本实验在此根底上进一步讨论PBNA的抗心肌肥厚机制是否与Na+-K+-ATPase、a2+-ATPase活性及细胞代谢有关。1材料与仪器1.1动物1.2药品和试剂拳参正丁醇提取物由沈阳药科大学中医药学院植化教研室提供；盐酸异丙肾上腺素Is注射针剂上海禾丰制药，批号：H310

4、21344，Na+-K+-ATPase、a2+-ATPase、K、LDH检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.3仪器ZS83-1型内切式组织匀浆器浙西机械厂，赛多利斯BS224S型电子天平(北京赛多利斯仪器)。2方法2.1造模与给药方法雄性SD大鼠32只，体质量200250g，随机分成4组，每组8只，分别为：对照组、心肌肥厚模型组、0.5g/kgPBNA组、1g/kgPBNA组。大鼠背部皮下注射Is1g/kg/d，连续10d，制作心肌肥厚模型，对照组给予等体积生理盐水。于造模后第2天开场分别灌胃给以1g/kg，0.5g/kg的PBNA，连续14d，对照组和心肌肥厚模型组大鼠给予一样体积的N

5、S灌胃。2.2Na+-K+-ATPase、a2+-ATPase、K、LDH活性测定末次给药后禁食12h，水合氯醛(0.35g/kg)麻醉，腹腔静脉取血2l，室温静置1h，4，2000r/in，离心10in，别离血清，于-80保存。取出心脏，称取500g左心室心肌组织冰浴下制成10%匀浆，4，3500r/in，离心10in，取上清于-80保存。严格按试剂盒说明，ATPase活性测定采用定磷法，以每克蛋白每小时分解ATP产生的无机磷量表示酶活性，产生1lPi为1个活性单位U，蛋白定量采用考马斯亮蓝法，以牛血清白蛋白为标准。比色法测定血清K及心肌组织K、LDH的活性。2.3统计学分析实验数据采用Gr

6、aphpadpris4.0软件进展单因素方差分析，结果以柱状图表示，P0.05认为有统计学意义。转贴于论文联盟.ll.3结果Is模型组与对照组相比，血清LDH的活性升高P0.001，心肌组织Na+-K+-ATPaseP0.05、a2+-ATPaseP0.01、KP0.001及LDHP0.001的活性降低；与模型组相比，拳参正丁醇提取物治疗组血清LDH的活性降低P0.01，心肌组织Na+-K+-ATPaseP0.05、a2+-ATPaseP0.001、KP0.01及LDHP0.05的活性升高。结果见图15。4讨论心肌肥厚是心脏维持适当收缩功能对各种病理状态的代偿反响。Is作为受体冲动剂，可使心肌

7、收缩力增强，心率加快，胶原纤维增生，产生心肌肥厚8。心肌生长是由于儿茶酚胺的直接刺激和通过肾上腺素能神经兴奋引起代谢变化、血流动力学改变和神经内分泌活动而造成。Brges等9，10报道用异丙肾上腺素慢性刺激大鼠，可引起心肌肌浆网a2+-ATPaseRNA表达下降，心肌细胞转化生长因子TGF-1RNA程度增高，通过改变心肌基因表达而造成心肌肥厚和心脏纤维化。Na+-K+-ATP的主要功能是将细胞内的Na+泵出和将胞外的K+泵入，平衡细胞内外Na+、K+，是生物电产生的根底，也是细胞膜继发性主动转动的能量来源；a2+-ATPase的主要功能是将细胞内a2+泵入肌浆网，它同Na+-a2+交换共同维持

8、细胞内a2+稳态。心肌肥厚时Na+-K+-ATPase及a2+-ATPase活性下降，导致细胞内a2+、Na+增多。胞内Na+增多引起Na+-a2+交换增加，进一步加剧细胞内a2+超载，从而引起心肌细胞凋亡1114。本课题组前期研究说明，PBNA可使左心室重量指数下降，提示了PBNA具有抗心肌肥厚作用，这种保护作用可能与PBNA进步机体的抗氧化才能、促进N及ANP合成、降低ET及Ang含量有关6，7。本实验结果显示，给予PBNA治疗大鼠心肌组织Na+-K+-ATPase及a2+-ATPase活性均有不同程度的升高，提示PBNA可能是通过抑制心肌Na+-K+-ATPase及a2+-ATPase活

9、性下降，改善ATPase活性，抑制心肌胶原增生，从而抑制心肌肥厚和心脏重构。小剂量Is长期注射，可引起心肌细胞坏死，心肌细胞释放LDH及K增加15。本实验证实，Is所致心肌肥厚大鼠释放入血清的LDH增多，组织K及LDH含量降低。PBNA治疗组大鼠组织K及LDH含量升高，释放入血清的LDH量亦降低，提示PBNA可降低心肌肥厚时的心肌细胞损伤。【参考文献】1刘晓秋，李维维，生可心，等拳参正丁醇提取物的化学成分J沈阳药科大学学报，2022，23(1)：162Zengjing，Huangxianhua，LaifEi，etal.AntiarrhythiEffetsfPlygnuBistrtaL.Ague

10、usextratJ.DrugDevelpentResearh，2002，55(4):2643曾靖，单热爱，钟声，等拳参水提取物镇痛作用的实验观察J中国临床康复，2022，9(6)：804曾靖，黄志华,叶和杨，等拳参正丁醇提取物中枢抑制作用的研究J赣南医学院学报，2022，23(4)：3595叶和杨，黄志华，汪秀荣，等拳参正丁醇提取物保护大鼠心肌缺血再灌注损伤的剂量依赖性效应J中国临床康复，2022，9(39)：1186张乡城，薛金雄，杨晓光，等拳参正丁醇提取物对Is致大鼠心肌肥厚的保护作用J时珍国医国药，2022，19(7)：16657李良东，周琴，黄志华，等大鼠心肌肥厚时血管活性物质的变化与

11、拳参正丁醇提取物的关系J时珍国医国药，2022，20(11)：2761.8BsR,ugentN,FindjiL,ediani,etal.Inhibitinfatehlaine-induedardiafibrsisbyanaldsterneantagnistJJardivasPhara1,2022，45(1):89BrgesJ,SilvaJAJr,GesA,eta1.TnininratheartithexperientalhypertrphyJAJPhysilHeartirPhysil,2022，284(6):H226310aranzaP,Diaz-ArayaG,hing，eta1Isprter

12、enlandangitensinI-nvertingenzyeinlung,leftventrile,andplasaduringyardialhypertrphyandfibrsisJJardivasPharal,2002，40(2):24611XuXL,JiH,GuSY,eta1.ardiprtetiveeffetsfAstragaliRadixagainstIsprterenl-induedyardialinjuryinratsanditspssibleehanisJ.JPhyttherRes，2022，22(3):38912Zha,YuanQ,QianJ,eta1.ThepresenefLys27insteadfAsn27inhuanphsphlabanprtessarplasiretiulua2+-ATPasesuperinhibitinandardiaredelingJ.Jirulatin，2022,113(7):99513王培勇，刘健，许蜀闽，等异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚时心肌细胞核a2+转运J中国药理学与毒理学杂志，