出生后早期接触速灭威对小鼠空间学习记忆能力的影响

1、出生后早期接触速灭威对小鼠空间学习记忆才能的影响【摘要】目的观察出生后早期有限次数速灭威染毒对ir小鼠青春期和成年早期神经行为和空间学习记忆才能的影响以及自主活动才能、感觉运动才能和焦虑情绪是否影响空间学习记忆才能，并探明其影响的发生时间。方法小鼠出生后随机分为5组，即速灭威高、中、低剂量组(5g/kg、0.5g/kg、0.05g/kg,)，溶剂对照组(ds)和生理盐水对照组(ns)，于出生后第3、5、7、9、11、13天进展腹腔注射染毒。观察一般生理发育情况，并选用成组的神经行为学实验在青春期(pnd60)和成年早期(pnd90)进展测试。结果青春期小鼠平衡木得分与染毒剂量呈负相关关系(rs

2、=-0.418，p0.05);青春期和成年早期的洞板实验和旷场实验中各指标在同期各组间均无统计学意义;青春期rris水迷宫空间探究实验中，定位航行完毕后和次日的两次穿越平台位置次数与染毒剂量之间均呈负相关关系(rs分别为-0.361和-0.277，p0.05);成年早期rris水迷宫空间探究实验中，第四象限时间百分比与染毒剂量之间呈负相关关系(rs=-0.390，p0.05);主成分分析发现，反映空间学习记忆才能与自主活动才能、感觉运动才能及焦虑情绪的指标出如今不同的主成分中。结论出生后早期有限次数接触速灭威可能在青春期时已经开场影响到小鼠的空间记忆才能，这可能是成年后空间学习记忆才能损害的重

3、要线索。【关键词】小鼠;神经行为学表现;rris水迷宫;主成分分析【keyrds】ie;neurbehaviralanifestatins;rrisateraze;prinipalpnentsanalysis1材料与方法1.1试剂和仪器速灭威(纯度99.8%)、二甲基亚砜(ds)、硫代乙酰胆碱(ash)、5,5-二硫二硝基苯甲酸(dtnb)均购自siga公司，洞板实验装置和rris水迷宫装置及程序均购自中国药物研究所。1.2实验动物及处理清洁级ir小鼠(810周，3032g，2628g)购自安徽省动物中心。实验前适应性喂养1周，按24()于p9:00合笼，次日a7:00检查阴栓。仔鼠出生后(p

4、stnatalday，pnd)，每窝仔鼠调整为10只，同时将每窝小鼠随机分为5组：速灭威高、中、低剂量组(5g/kg、0.5g/kg、0.05g/kg)，溶剂对照组(ds)和生理盐水对照组(ns)。每个剂量组内尽量保持雌雄各半。小鼠出生当天定为出生后第0天(pnd0)，然后于pnd3、5、7、9、11、13定时进展腹腔注射染毒，染毒体积为每克体重2l，要求注射部位无炎症表现。待仔鼠断乳(pnd21)后，雌雄分笼饲养，每笼45只，自由饮水饮食。专人定时监测仔鼠体重，观察其生长发育情况，并进展神经行为学实验。实验期限为pnd0pnd98。1.3行为学实验包括青春期(pnd60)和成年早期(pnd9

5、0)两次行为学测试。1.4统计方法文中结果均以s表示。对于rris定位航行实验的登台埋伏期，采用两因素(性别与剂量组)重复测量方差分析8，其余资料均采用两因素方差分析。由于染毒剂量资料不符合正态分布，故两变量间的相关分析采用spearan秩相关。为了分析各实验指标之间的关系，采用主成分分析。由于定位航行实验中登台埋伏期在前3d下降很快，故分别用前3d和后3d的平均埋伏期作为变量进入主成分分析。检验水准设为0.05，所有统计分析均在spss13.0软件中进展。2结果2.1t对小鼠体重的影响小鼠出生后各时点体重在各剂量组之间和性别之间无统计学差异(p0.05)。2.2t对小鼠神经行为的影响2.3t

6、对小鼠空间学习记忆才能的影响3讨论本研究从小鼠出生后到断乳，直至青春期(pnd60)和成年早期(pnd90)，动态观察了出生后早期接触t对小鼠神经行为，特别是空间学习记忆才能的影响。t染毒对出生后小鼠体重没有影响。在青春期的平衡木实验中，虽然各染毒组与对照组比较，在得分上未显示有统计学差异，但染毒剂量与得分之间有呈现出负相关，提示染毒对小鼠的感觉运动才能有一定影响。在旷场实验中，尽管在青春期和成年早期各指标在性别和剂量组之间均未发现有统计学差异，但是反映自主活动才能的跨越格子数在pnd60时明显高于pnd90时，提示年龄因素可能对染毒小鼠的神经行为有一定影响。rris水迷宫定位航行实验是评估啮

7、齿类动物空间学习才能的经典程序。在青春期，随着训练天数的增加，各组小鼠的登台埋伏期逐渐缩短，说明各组小鼠都具有通过学习找到平台的才能;但各剂量组之间直至成年早期(pnd90)时均无统计学差异。结合以前的研究4，到pnd120时各时点登台埋伏期在组间仍无统计学差异。这说明出生后早期接触t对小鼠至少到成年期(pnd120)的空间学习才能尚未造成影响。rris水迷宫空间探究实验可以评价啮齿类动物空间记忆才能，其中定位航行完毕后(d6)的空间探究主要反映其工作记忆或试验依赖性记忆，而完毕后次日(d7)的空间探究主要反映其参考记忆7。在青春期空间探究实验中，随着剂量的升高，小鼠在d6和d7时的穿越平台位

8、置次数均有减少的趋势。到成年早期时，d7时的目的象限(象限)时间百分比随染毒剂量升高也呈下降趋势。直到成年期(pnd120)时，在目的象限游泳时间百分比和穿越平台位置次数显现出统计学差异4。这提示出生后早期接触t导致的小鼠成年后空间记忆才能损害的进展过程较为隐匿，但在青春期(pnd60)已经开场出现线索，即表现出了其工作记忆和/或参考记忆才能的下降趋势。主成分分析(因子分析)以往被应用于区分老年鼠不同学习记忆实验测量因子的研究9。近来，hen等10又将其应用到区分不同学习记忆实验和基于感觉运动及焦虑实验的测量因子研究中。本研究中显示，rris定位航行实验中登台埋伏期与空间探究实验中各指标以相反的因子负荷同时进入第一主成分，且解释了总变异的27.43%;反映自主活动才能的探洞次数与反映感觉运动才能的平衡木得分分别出如今第三、五主成分中，旷场实验中反映自主活动才能的埋伏期和跨越格子数以相反的因子负荷出如今第二主成分中，这提示洞板实验和旷场实验可能检测了自主活动才能的不同方面。同样，反映焦虑情绪的站立次数、捋毛次数与排便颗粒数分别出如今第二与四主成分中，可能也是焦虑情