中国药典四部色谱法概况医学课件

1、中国药典2015年版四部色谱法概述中国药典2015年版四部色谱法概述BEAConfidential.|2主要内容2015年版药典四部色谱法目录及修订情况色谱法的基本概念色谱法在中国药典中的沿革中国药典2015年版色谱法内容概况BEAConfidential.|2主要内容2015年版药典2015版四部色谱法目录2015版四部色谱法目录BEAConfidential.|4色谱法的基本概念色谱法是利用混合物中各组分的理化性质的差异(吸附力、溶解度、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力等)，使各组分以不同程度分布在两个相中，其中一个相叫固定相，另一相流过此固定相叫作流动相。由于各组分受流动相作用产生的

2、推力和受固定相作用产生的阻力的不同，使各组分产生不同的移动速度，使得结构上只有微小差异的各组分得到分离。再配合相应的光学、电学、电化学和或其他相关检测手段，对各组分进行定性和定量分析的方法。BEAConfidential.|4色谱法的基本概念色谱法中国药典四部色谱法概况医学课件毛细管电色谱法（CEC）色谱法GSC液相色谱法 （LC）柱色谱法平面色谱法毛细管电泳法 （CE）LLCLSCSECIECBPC纸色谱法薄层色谱法（TLC）LLCLLCLSC气相色谱法（GC）柱色谱法GLC超临界流体色谱法 （SFC）色谱法的分类毛细管电色谱法（CEC）色谱法GSC液相色谱法 色谱法的基本概念分离原理吸附色

3、谱法分配色谱法离子交换色谱法排阻色谱法分离方法纸色谱法薄层色谱法柱色谱法高效液相色谱法气相色谱法色谱法的基本概念分离原理分离方法色谱法在中国药典中的沿革纸色谱法(1985)薄层色谱法(1985)柱色谱法(1985)高效液相色谱法(1985)气相色谱法(1985)电泳法(1990)毛细管电泳法(2000)分子排阻色谱法(2000)离子色谱法(2010)超临界流体色谱法（2015）临界点色谱法（2015）色谱法在中国药典中的沿革纸色谱法(1985)0501纸色谱法系以纸为载体，纸上所含水分或其他物质为固定相，用展开剂进行展开的分配色谱鉴别纯度检查含量测定0501纸色谱法系以纸为载体，纸上所含水分或

4、其他物质为固定相0501纸色谱法二部P1000页0501纸色谱法二部P1000页0502薄层色谱法 薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得色谱图与适宜的标准物质按同法所得的色谱图对比，亦可用薄层色谱扫描仪进行扫描，用于鉴别、检査或含量测定将旧版药典“对照物”修订为“对照标准物质”0502薄层色谱法 薄层色谱法系将供试品溶液点于0502薄层色谱法新版药典规范了市售薄层板的要求： 市售薄层板按固定相种类分为硅胶薄层板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等；按固定相粒 径大小分为普通薄层板（1040um）和高效薄层板 （510um）；按硅胶板是否含有荧光剂

5、分为硅胶G 板和硅胶GF254板。操作方法:点样点直径限值由3mm修改为4mm。其他变化：基本整合旧版药典一部和二部。0502薄层色谱法新版药典规范了市售薄层板的要求：0502薄层色谱法仪器与材料薄层板点样器展开容器显色剂显色装置检视装置 薄层扫描仪0502薄层色谱法仪器与材料0502薄层色谱法操作方法薄层板制备点样展开显色与检视记录0502薄层色谱法操作方法0502薄层色谱法操作方法薄层板制备（1）市售薄层板 除聚酰胺薄膜外，110活化30分钟；如被空气杂质污染，可以用溶剂预洗（2）自制薄层板0502薄层色谱法操作方法0502薄层色谱法操作方法点样 在洁净干燥的环境中 用专用毛细管或配合相应

6、的半自动、自动点样器械点样于薄层板上 一般为圆点状或窄细的条带状 点样基线距底边1015mm ，高效板一般基线离底边810mm。 圆点状直径一般不大于4mm，高效板一般不大于2mm；条带状宽度一般为510mm，高效板条带宽度一般为48mm。 点间距离可视斑点扩散情况以相邻斑点互不干扰为宜，一般不少于8mm，高效板供试品间隔不少于5mm0502薄层色谱法操作方法0502薄层色谱法展开示意图高效板上行一般为58cm0502薄层色谱法展开示意图高效板上行一般为58cm0502薄层色谱法操作方法显示与检视 有颜色的物质直接可见光下检视 无色物质可用喷雾和浸渍以适宜的显色剂显色，或者加热显色 紫外荧光下

7、显色（254nm和365nm） 在紫外光下有吸收的成分，可用GF254板（带荧光剂），观察淬灭形成的斑点0502薄层色谱法操作方法0502薄层色谱法操作方法记录 摄像设备拍摄，记录光学照片或电子图像 薄层扫描仪扫描仪扫描或其他方式记录色谱图0502薄层色谱法操作方法0502薄层色谱法系统适用试验要求（1）比移值Rf = 0.20.80502薄层色谱法系统适用试验要求Rf = 0.20.80502薄层色谱法系统适用试验要求 按各品种项下要求对实验条件进 行系统适用性试验，即用供试品和标准物质对实验条件 进行试验和调整 ，应符合规定的要求。0502薄层色谱法系统适用试验要求Rf = 0.20.80

8、502薄层色谱法（1）比移值Rf = 0.20.80502薄层色谱法（1）比移值0502薄层色谱法（2）检出限 指限量检査或杂质检査时，供试品溶液中被 测物质能被检出的最低浓度或量。 一般采用已知浓度的供试品溶液或对照标准溶液 ，与稀释若干倍的自身对照标准溶液在规定 的色谱条件下，在同一薄层板上点样、展开、 检视 ，后者显清晰可辨斑点的浓度或量作为检出限 。0502薄层色谱法（2）检出限 指限量检査或杂质检査时，0502薄层色谱法（3）分离度（分离效能）供试品与对照标准物质色谱中斑点均应清晰分离 薄层扫描法用于限量检查和含量测定时，R1.00502薄层色谱法（3）分离度（分离效能）供试品与对照

9、标准物0502薄层色谱法（4）相对标准偏差（薄层扫描要求）同板同供试液（不显色）：RSD5.0%同板同供试液（显色）：RSD10.0%不同板同供试液（显色和不显色）：RSD10.0%0502薄层色谱法（4）相对标准偏差（薄层扫描要求）0502薄层色谱法测定法鉴别：供试品与对照标准物质斑点颜色和比移值一限量检查与杂质检查：半定量颜色（峰面积）：供试品杂质斑点杂质对照品斑点颜色（峰面积）：供试品杂质斑点流动相)离子交换分子排阻手性分离0512液相色谱法色谱柱反相(非极性:C18、C8、CN、NH2)(组分的出峰检测器0512液相色谱法检测器是液相色谱仪的“眼睛” 其作用是把色谱柱连续流出的样品组分

10、转变成易于测量的电信号，被数据系统接收，得到样品分离的色谱图检测器性能的好坏直接关系到分析结果的可靠性与准确性通用型检测器（例如：示差折光检测器）专用型（选择性）检测器（例如：紫外检测器、荧光检测器）半通用型检测器（例如：蒸发光散射检测器）根据对各类物质响应的差别，检测器可分为三大类：检测器0512液相色谱法检测器是液相色谱仪的“眼睛”根据对各增加了超高效液相色谱柱内径（约2mm或更小），粒径（约2m或更小）（结果产生争议时，应以品种项下规定的色谱条件的测定结果为准）温度会影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。为改善分离效果可适当提高色谱柱的温度，但不宜超过

11、60。品种正文项下规定的条件除填充剂类型、流动相组分、检测器类型不得改变外，其余如色谱柱内径与长度、填充剂粒径、流动相速度、流动相组分比例、柱温、进样量、检测器灵敏度等，均可适当改变，以达到系统适用性试验的要求。0512液相色谱法增加了超高效液相0512液相色谱法流动相的要求0512液相色谱法流动相的要求0512液相色谱法HPLC：系统适用性要求（通则）中国药典要求对仪器进行适用性试验，即用规定的对照品对仪器进行试验和调整，要求达到规定的要求或满足在分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度、重复性和拖尾因子等相关规定。色谱系统的适用性试验通常包括理论板数、分离度、灵敏度、拖尾因子和重复性等五个参

12、数。按各品种正文项下要求对色谱系统进行适用性试验，即用规定的对照品溶液或系统适用性试验溶液在规定的色谱系统进行试验，必要时，可对色谱系统进行适当调整，以符合要求。0512液相色谱法HPLC：系统适用性要求（通则）0512液相色谱法要求：-理论塔板数N：大于规定值（按规定方法计算，具体品种）-拖尾因子T：应在0.95-1.05之间（以峰高定量时）-分离度R：应大于1.5-重复性：连续进样5次，峰面积的相对标准偏差不大于2.0%-灵敏度：（新增）定量：10:1；定性：3:10512液相色谱法要求：0512液相色谱法系统适用性试验（1）色谱柱理论板数（n） 具体品种要求不同用于评价色谱柱的分离效能。

13、由于不同物质在同一色谱柱上的色谱行为不同，采用理论板数作为衡量柱效能的指标时，应指明测定物质，一般为待测组分或内标物质的理论板数。在规定的色谱条件下，注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分峰或内标物质峰的保留时间tR（以分钟或长度计，下同，但应取相同单位）和峰宽（W）或半高峰宽（Wh/2），按n= 16（ tR /W）2或n=5.54（tRWh2）2计算色谱柱的理论板数。0512液相色谱法系统适用性试验0512液相色谱法无论是定性鉴别还是定量分析，均要求待测峰与其他峰、内标峰或特定的杂质对照峰之间有较好的分离度。除另有规定外，待测组分与相邻共存物之间的分离度

14、应大于1.5系统适用性试验（2）分离度（R） 0512液相色谱法无论是定性鉴别还是定量分析，均要求待测峰与其他峰、内标峰或特系统适用性试验（3）灵敏度（S/N）定量测定时，信噪比应不小于10；定性测定时，信噪比应不小于3.系统适用性试验中可以设置灵敏度测试溶液来评价色谱系统的检测能力。0512液相色谱法系统适用性试验0512液相色谱法系统适用性试验（4）拖尾因子（T）以峰高作定量参数时，除另有规定外，T值应在0.951.05之间。0512液相色谱法系统适用性试验0512液相色谱法（5）重复性用于评价色谱系统连续进样时响应值得重复性能。 采用外标法时，通常取各品种项下的对照品溶液，连续进样5次，

15、除另有规定外，其峰面积测量值得相对标准偏差应不大于2.0%； 采用内标法时，通常配置相当于80%、100%、120%的对照品溶液，加入规定量的内标溶液，配成3中不同的浓度，分别进样2次，计算平均校正因子，相对标准偏差应不大于2.0%0512液相色谱法（5）重复性0512液相色谱法测定法(1) 内标法 按各品种项下的规定，精密称（量）取对照品和内标物质，分别配成溶液，精密量取各适量，混合配成校正因子侧定用的对照溶液。取一定量注入仪器，记录色谱图，测量对照品和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算校正因子： 再取各品种项下含有内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图，测量供试品中待测成分和内标物质的

16、峰面积或峰高，按下式计算含量：0512液相色谱法测定法0512液相色谱法测定法(2) 外标法 按各品种项下的规定，精密称（量）取对照品和供试品，配制成溶液，分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品溶液和供试品溶液中待测成分的峰面积（或峰高），按下式计算含量：0512液相色谱法测定法0512液相色谱法测定法(3)加校正因子的主成分自身对照法 测定杂质含量时，可采用加校正因子的主成分自身对照法。在建立方法时，按各品种项下的规定，精密称（量）取杂质对照品和待测成分对照品各适量，配制测定杂质校正因子的溶液，进样，记录色谱图，按上述（1）法计算杂质的校正因子。此校正因子可直接载入各品种项下，用

17、于校正杂质的实测峰面积。这些需作校正计算的杂质，通常以主成分为参照，采用相对保留时间定位，其数值一并载入各品种项下。0512液相色谱法测定法0512液相色谱法测定法 (3)加校正因子的主成分自身对照法 测定杂质含量时，按各品种项下规定的杂质限度，将供试品溶液稀释成与杂质限度相当的溶液，作为对照溶液；进样，记录色谱图，必要时，调节纵坐标范围（以噪声水平可接受为限）使对照溶液的主成分色谱峰的峰高约达满量程的10%25%。除另有规定外，一般进样不少于3针，通常含量低于0.5%的杂质，峰面积的相对标准偏差（RSD）应小于10%；含量在0.5%2%的杂质，峰面积的RSD应小于5%；含量大于2%的杂质，峰

18、面积的RSD应小于2%。然后，取供试品溶液和对照溶液适量，分别进样，除另有规定外，供试品溶液的记录时间，应为主成分色谱峰保留时间的2倍，测量供试品溶液色谱图上各杂质的峰面积，分别乘以相应的校正因子后与对照溶液主成分的峰面积比较，计算各杂质含量。0512液相色谱法测定法0512液相色谱法测定法 (4)不加校正因子的主成分自身对照法 测定杂质含量时，若没有杂质对照品，也可采用不加校正因子的主成分自身对照法。同上述（3）法配制对照溶液并调节检测灵敏度后，取供试品溶液和对照溶液适量，分别进样，前者的记录时间，除另有规定外，应为主成分色谱峰保留时间的2倍，测量供试品溶液色谱图上各杂质的峰面积并与对照溶液

19、主成分的峰面积比较，计算杂质含量。0512液相色谱法测定法0512液相色谱法测定法 (5)面积归一化法 按各品种项下的规定，配制供试品溶液，取一定量注入仪器，记录色谱图。测量各峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积，计算各峰面积占总峰面积的百分率。 用于杂质检查时，由于峰面积归一化法测定误差大，因此，通常只用于粗略考察供试品中的杂质含量。除另有规定外，一般不宜用于微量杂质的检查。0512液相色谱法测定法0512液相色谱法中国药典四部色谱法概况医学课件离子色谱法系采用高压输液泵系统将规定的洗脱液泵入装有填充剂的色谱柱对可解离物质进行分离测定的色谱方法。注入的供试品由洗脱液带入色谱柱内进行分

20、离后，进入检测器（必要时经过抑制器或衍生系统），由积分仪或数据处理系统记录并处理色谱信号。离子色谱法常用于无机阴离子、无机阳离子、有机酸、糖醇类、氨基糖类、氨基酸、蛋白质、糖蛋白等物质的定性和定量分析。它的分离机理主要为离子交换，即基于离子交换色谱固定相上的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子之间进行的可逆交换；离子色谱法的其他分离机理还有形成离子对、离子排阻等。0513 离子色谱法离子色谱法系采用高压输液泵系统将规定的洗脱液泵入装有填充剂的 0514 分子排阻色谱法分子排阻色谱法是根据待测组分的分子大小进行分离的一种液相色谱技术。分子排阻色谱法的分离原理为凝胶色谱柱的分子筛机制。色谱柱多以亲

21、水硅胶、凝胶或经过修饰的凝胶如葡聚糖凝胶（Sephadex)和琼脂糖凝胶（Sepharose) 等为填充剂。 0514 分子排阻色谱法分子排阻色谱法是根 采用气体为流动相(载气)流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用数据处理系统记录色谱信号。0521 气相色谱法与2010年版药典相比无修订 采用气体为流动相(载气)流经装有填充剂的色谱柱进行分0521 气相色谱法1、载气系统2、进样系统3、分离系统 4、温控系统5、检测系统6、数据处理系统气相色谱仪流程图0521 气相色谱法1、载气系统气相色谱仪流程图 0521 气

22、相色谱法 0521 气相色谱法 0521 气相色谱法系统适用性实验照高效液相色谱法（通则0512）项下规定系统适用性实验 0521 气相色谱法系统适用性实验照高效液相色谱法（0521 气相色谱法0521 气相色谱法 各品种项下规定的色谱条件，除检测器种类、固定液品种及特殊指定的色谱柱材料不得改变外，其余如色谱柱内径、长度、载体牌号、粒度、固定液涂布浓度、载气流速、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变，以适应具体品种并符合系统适用性试验的要求。一般色谱图约于30分钟内记录完毕。0521 气相色谱法 各品种项下规定的色谱条件，除检测器种类、固测定法内标法外标法面积归一化法标准溶液加入法精密

23、称（量）取某个杂质或待测成分对照品适量，配制成适当浓度的对照品溶液，取一定量，精密加入到供试品溶液中，根据外标法或内标法测定杂质或主成分含量，再扣除加入的对照品溶液含量，即得供试品溶液中某个杂质和主成分含量。 (当采用顶空进样时，由于供试品和对照品处于不完全相同的基质中，故可采用标准溶液加入法以消除基质效应的影响；当标准溶液加入法与其他定量方法结果不一致时，应以标准加入法结果为准。)0521 气相色谱法前面三种方法要求与液相色谱一致测定法0521 气相色谱法前面三种方法要求与液相色谱一致对于生产过程中引入的有机溶剂，应在后续的生产环节予以有效去除。除正文已明确列有“残留溶剂”检查的品种必须依法

24、进行该项检查外，其他未在“残留溶剂”项下明确列出的有机溶剂与未在正文中列有此项检查的品种，如生产过程中引入或产品中残留有机溶剂，均应按附录“残留溶剂测定法”检查并应符合相应溶剂的限度规定。（凡例十七）VE气相色谱法对于生产过程中引入的有机溶剂，应在后续的生产环节予以有效中国药典四部色谱法概况医学课件0521 气相色谱法0521 气相色谱法0531超临界流体色谱法（新增）流动相为CO2，价格低，更环保。0532临界点色谱法（新增）是根据聚合物的功能基团、嵌段结构的差异进行聚合物分离的一种色谱技术。中国药典四部色谱法概况医学课件2015版药典四部解析2015版中国药典四部主要变化理化部分2关于色谱

25、柱小粒径色谱柱，提速趋势很多方法，都没有规定具体的色谱柱规格，便于企业根据自己的实际情况，选择合适的规格色谱柱。粒径较小的色谱柱，柱效较高，所需柱长较短，从而柱长较短，从而可缩短分析时间。同时，粒径较小的色谱柱，对操作环境与规范性的要求也更高。等度洗脱方法，较容易进行方法转换。梯度洗脱方法，需要注意梯度表与柱长的比例关系，以及系统的梯度延迟体积转换。2015版药典四部解析2015版中国药典四部主要变化2015版药典四部解析2015版中国药典四部主要变化理化部分2关于检测器检测器的种类与作用检测器是液相色谱仪的“眼睛”其作用是把色谱柱连续流出的样品组分转变成易于测量的电信号，被数据系统接收，得到

26、样品分离的色谱图检测器性能的好坏直接关系到分析结果的可靠性与准确性根据对各类物质响应的差别，检测器可分为三大类：通用型检测器（例如：示差折光检测器）专用型（选择性）检测器（例如：紫外检测器、荧光检测器）半通用型检测器（例如：蒸发光散射检测器）2015版药典四部解析2015版中国药典四部主要变化2015版药典四部解析2015版中国药典四部主要变化理化部分2关于检测器衡量检测器的指标灵敏度：S=R/Q-R是检测器响应值的增量-Q是样品量的增量噪音：没有样品时检测器的最大输出信号漂移：检测器在一段时间内响应值的变化线性动态范围：最大线性响应与最小检出限之比最低检测限：样品产生两或三倍于噪音信号时的浓

27、度信噪比：S/N注意：最低检测限和信噪比不是一个单纯的检测器指标。它实际上是评价整个色谱柱系统的指标，包括了色谱系统、分离机理、色谱柱内的综合性指标2015版药典四部解析2015版中国药典四部主要变化VD高效液相色谱法(2)检测器选择性紫外、荧光、电化学通用型蒸发光散射、示差折光VD高效液相色谱法(2)检测器VD高效液相色谱法(3)流动相反相色谱系统的流动相首选甲醇-水系统(采用紫外末端波长检测时，首选乙腈-水系统)，如经使用不合适时，再选用其他溶剂系统。应尽可能少用含有缓冲液的流动相，必须使用时，应尽可能选用含较低浓度缓冲液的流动相。其中，调整流动相组分比例时，以组分比例较低者(小于或等于5

28、0%)相对于自身的改变量不超过30%且相对于总量的改变量不超过10%为限，如30%相对改变量的数值超过总量的10%时，则改变量以总量的10%为限。VD高效液相色谱法(3)流动相VD高效液相色谱法系统适用性试验理论板数分离度重复性拖尾因子VD高效液相色谱法系统适用性试验VD高效液相色谱法测定法内标法外标法加校正因子的主成分自身对照法不加校正因子的主成分自身对照法面积归一化法VD高效液相色谱法测定法司帕沙星P221司帕沙星消旋山莨菪碱P866消旋山莨菪碱硫酸卡那霉素P967氨基糖苷类抗生素蒸发光散射检测法硫酸卡那霉素氨基糖苷类抗生素蒸发光散射检测法阿米卡星P388柱前衍生化法阿米卡星柱前衍生化法V

29、E气相色谱法系采用气体为流动相(载气)流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用数据处理系统记录色谱信号。VE气相色谱法系采用气体为流动相(载气)流经装有填充剂的VE气相色谱法载气源进样部分色谱柱柱温箱检测器数据处理系统VE气相色谱法载气源VE气相色谱法VE气相色谱法VE气相色谱法各品种项下规定的色谱条件，除检测器种类、固定液品种及特殊指定的色谱柱材料不得改变外，其余如色谱柱内径、长度、载体牌号、粒度、固定液涂布浓度、载气流速、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变，以适应具体品种并符合系统适用性试验的要求。一般

30、色谱图约于30分钟内记录完毕。VE气相色谱法各品种项下规定的色谱条件，除检测器种类、固定液VE气相色谱法测定法内标法外标法面积归一化法标准溶液加入法(当采用顶空进样时，由于供试品和对照品处于不完全相同的基质中，故可采用标准溶液加入法以消除基质效应的影响；当标准溶液加入法与其他定量方法结果不一致时，应以标准加入法结果为准。)VE气相色谱法测定法对于生产过程中引入的有机溶剂，应在后续的生产环节予以有效去除。除正文已明确列有“残留溶剂”检查的品种必须依法进行该项检查外，其他未在“残留溶剂”项下明确列出的有机溶剂与未在正文中列有此项检查的品种，如生产过程中引入或产品中残留有机溶剂，均应按附录“残留溶剂

31、测定法”检查并应符合相应溶剂的限度规定。（凡例十七）VE气相色谱法对于生产过程中引入的有机溶剂，应在后续的生产环节予以有效头孢泊肟酯P198残留溶剂头孢泊肟酯VF电泳法是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶)中，在电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱并计算其含量的方法。VF电泳法是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支VG毛细管电泳法是指以弹性石英毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，依据供试品中各组分的淌度(单位电场强度下的迁移速度)和(或)分配行

32、为的差异而实现各组分分离的一种分析方法。VG毛细管电泳法是指以弹性石英毛细管为分离通道，以高压直盐酸头孢吡肟P671盐酸头孢吡肟VH分子排阻色谱法是根据待测组分的分子大小进行分离的一种液相色谱技术。分子排阻色谱法的分离原理为凝胶色谱柱的分子筛机制。VH分子排阻色谱法是根据待测组分的分子大小进行分离的一种头孢拉定P195头孢拉定VJ离子色谱法系采用高压输液泵系统将规定的洗脱液泵入装有填充剂的色谱柱进行分离的色谱分析方法。注入的供试品由洗脱液带入色谱柱内进行分离后，经过抑制器或衍生系统进入检测器，由积分仪或数据处理系统记录色谱信号。VJ离子色谱法系采用高压输液泵系统将规定的洗脱液泵入装有一、离子色

33、谱的基本原理87生命至上技泽天下一、离子色谱的基本原理87生命至上技泽天下88生命至上技泽天下88生命至上技泽天下一、离子色谱技术的基本原理89生命至上技泽天下一、离子色谱技术的基本原理89生命至上技泽天下淋洗液在线发生器不用化学试剂，只用水（RFIC）环保：不直接接触化学试剂使用方便：只用水和鼠标，省时省力重现性好：消除试剂杂质的干扰、配制溶液的误差和操作误差，结果更可靠。增加IC的应用效能，提高灵敏度和分离度，改善重现性，扩展应用，优良的不同时间和不同实验室之间的可比性。普通等浓度泵即可作梯度淋洗，梯度淋洗和等浓度淋洗同样简单方便，延长泵的使用寿命。90生命至上技泽天下淋洗液在线发生器90

34、生命至上技泽天下检测方式电导检测具有电导性化合物的通用型检测器离子色谱最常用的检测器安培法在特定的条件下可对某些化合物直接进行氧化还原反应紫外可见光度法紫外直接吸收或可见光光度法测定选择性强可进行柱后衍生荧光法HPLC质谱91生命至上技泽天下检测方式91生命至上技泽天下一、离子色谱技术的基本原理92生命至上技泽天下一、离子色谱技术的基本原理92生命至上技泽天下一、离子色谱技术的基本原理93生命至上技泽天下一、离子色谱技术的基本原理93生命至上技泽天下一、离子色谱技术的基本原理94生命至上技泽天下一、离子色谱技术的基本原理94生命至上技泽天下样品的前处理0.22，0.45um滤膜去除颗粒状杂质C

35、18预处理小柱、On-GuardRP柱去除有机分子石墨化碳黑柱去除色素On-GuardP柱去除土壤中腐殖酸、苯环类的化合物On-GuardH、Na柱去除溶液中的金属离子On-GuardAg柱去除溶液中的Cl-离子，主要测定高氯（海水）物质中的NO2-，NO3-等离子在线离线除糖氨基酸样品分析时，除去糖对氨基酸检测时的干扰95生命至上技泽天下样品的前处理0.22，0.45um滤膜去除颗粒状杂质95离子色谱法应用96生命至上技泽天下离子色谱法应用96生命至上技泽天下三、离子色谱在药品分析中的应用97生命至上技泽天下三、离子色谱在药品分析中的应用97生命至上技泽天下三、离子色谱在药品分析中的应用98

36、生命至上技泽天下三、离子色谱在药品分析中的应用98生命至上技泽天下三、离子色谱在药品分析中的应用99生命至上技泽天下三、离子色谱在药品分析中的应用99生命至上技泽天下三、离子色谱在药品分析中的应用100生命至上技泽天下三、离子色谱在药品分析中的应用100生命至上技泽天下三、离子色谱在药品分析中的应用101生命至上技泽天下三、离子色谱在药品分析中的应用101生命至上技泽天下102生命至上技泽天下帕米膦酸二钠注射液102生命至上技泽天下帕米膦酸二钠注射液三、离子色谱在药品分析中的应用103生命至上技泽天下三、离子色谱在药品分析中的应用103生命至上技泽天下BEAConfidential.|104C

37、apitalizationTitleandgraphiclabelsareinitialcapstwo-to-threeletterarticlesarenotcapped(e.g.,ThisistheTitle)Bulletedtextissentencecapsinitialcaponfirstwordonlynoperiodatend(e.g.,Thisisthebulletedcopy)PropernamesareinitialcapsandacronymsareallcapsBEAConfidential.|104CapitalizaBEAConfidential.|105Bulle

38、tSlideWithTwoColumnsHeadingis20pt.ArialBoldMulti-columnbulletitemsare20pt.ArialSecondlevelbulletis16pt.ArialSecondlevelbulletFirstlevelbulletSecondlevelbulletSecondlevelbulletSecondlevelbulletHeadingis20pt.ArialBoldMulti-columnbulletitemsare20pt.ArialSecondlevelbulletis16pt.ArialSecondlevelbulletFir

39、stlevelbulletSecondlevelbulletInstructions:Whenusingatwocolumnbulletedslide,youshouldneveruse3rdlevelbullets.BEAConfidential.|105BulletSlidBEAConfidential.|106HighlightingBulletPointsSamplebulletpointUseblue(R:0,G:114,B:234)tohighlightspecificbulletpointswithinyourslidecopySamplebulletpointSamplebul

40、letpointSamplebulletpointUsethisboxtohighlightcallouttextwhichisnotincludedinyourbulletcopyBEAConfidential.|106HighlightiBEAConfidential.|107AgendaSlideTopicOneTopicTwoTopicThreeTopicFourTopicFiveTopicSixTopicSevenBEAConfidential.|107AgendaSlidBEAConfidential.|108AgendaSlideTopicOneTopicTwoTopicThre

41、eTopicFourTopicFiveTopicSixTopicSevenInstructions:Todeemphasizeagendaitemsusegraycolor(178,180,179)BEAConfidential.|108AgendaSlidBEAConfidential.|109NumberedListsListcontentis20pt.Arial1Listcontentis20pt.Arial5Listcontentis20pt.Arial4Listcontentis20pt.Arial3Listcontentis20pt.Arial2Listcontentis20pt.

42、Arial1Listcontentis20pt.Arial2Listcontentis20pt.Arial3Listcontentis20pt.Arial1Listcontentis20pt.Arial2Listcontentis20pt.Arial4Listcontentis20pt.Arial3Listcontentis20pt.Arial1Listcontentis20pt.Arial2Listcontentis20pt.Arial5Listcontentis20pt.Arial4Listcontentis20pt.Arial3Listcontentis20pt.Arial1Listco

43、ntentis20pt.Arial2BEAConfidential.|109NumberedLiBEAConfidential.|110OneBigPointHeader24pt.ArialAddtexttosupportyourmainpointforthisslide.Thetextboxwillscaletofitwithinthegraybox.BEAConfidential.|110OneBigPoinBEAConfidential.|111Subtitlesare28pt.Arial(R:122,G:128,B:131)UsingSubtitlesandAdjustingtheBu

44、lletTextBoxSelectthesubtitletextboxabove,CopythenPasteitontotheslidethatrequiresasubtitleThisensuresthatsubtitlesandbulletedtextwillbeintheexactposition(asshowonthisslide)throughoutthepresentationandwillnotjumpfromslide-to-slideBulletedtextissentencecapsinitialcaponfirstwordonlynoperiodatend(e.g.,Th

45、isisthebulletedcopy)SubtitlesneverhaveaperiodattheendBEAConfidential.|111SubtitlesaBEAConfidential.|112SlideTransitionGuidelinesThedefaultPowerPointslidetransitionsetting(foundundertheSlideShowMenuoptions)is“NoTransition”TheslidetransitionswhileinterestingoftendetractfromcommunicatingyourmessageThe“

46、RandomTransition”shouldneverbeusedinapresentationToadjusttheslidetransitions,goto“SlideShow”“SlideTransition”BEAConfidential.|112SlideTransBEAConfidential.|113SlideAnimationGuidelinesThepurposeofslideanimationandbuildsistoenhancethemessage,notdetractfromitBecauseofthis,itisimportanttouseslideanimati

47、onsparinglyandonlywhennecessaryToadjusttheslideanimations,select“CustomAnimation”undertheTaskPaneUse“Appear”optionfortheanimationBEAConfidential.|113SlideAnimaBEAConfidential.|114SettingBlackandWhitePrintingPreferencesTosettheblackandwhiteprintingpreferences:SelectgrayscaleorpureblackandwhiteviewVie

48、wColor/GrayscaleGrayscaleThiswilldisplaytheslideingrayscalemodeandwillallowyoutoseehowtheslidewillprintClickonaslideobjectandselectGrayscaleSettingfromthemenuYouwillseealistingofoptionstochoosefromAutomaticisthedefaultandisacceptableExperimentwithalternateGrayscalesettingstoensureoptimumprintingSele

49、ctViewColor/GrayscaleColortoreturntothecolorslidemodeContinuedonslide15BEAConfidential.|114SettingBlaBEAConfidential.|115SettingBlackandWhitePrintingPreferences(Cont.)Ifyouareusingtransparency(forhighlights,etc.),youwillneedtoturntheblackandwhiteprintingsettingsto“dontshow”Tosettheblackandwhiteprint

50、ingsettingsto“dontshow”SelectViewColor/GrayscaleGrayscaleRight-clickonthetransparentobjectSelectGrayscaleSettingDontShowThehighlightboxbelowisincludedasanexampleofanobjectwithproperlysetblackandwhiteprintingsettingsThisprocessaccommodatesforaprintingbugwithinPowerPointapplicationBEAConfidential.|115

51、SettingBlaBEAConfidential.|116SavingThisTemplateasYourDefaultDesignTemplateOpentheBEACorporateTemplateGototheFilemenuandselect“Saveas”AtthebottomoftheSaveAsdialogbox,click“Saveastype,”andchoose“DesignTemplate”Inthe“Filename”box,typetheword“Blank”Click“Save”Thefilewillbesavedas“Blank.pot,”whichPowerP

52、ointrecognizesasadefaulttemplatefileBEAConfidential.|116SavingThisBEAConfidential.|117ApplyingtheCorporateTemplateSlideDesigntoanExistingPresentationOpenanexistingpresentation,selectallslidesfromtheslidesorterviewandselectEditCopyOpenacopyofthenewBEAtemplateand“paste”theslidesintotheslidesorterviewA

53、“pasteoptions”clipboardiconwillappearRollyourmouseovertheiconandfollowthedownarrowSelect“Usedesigntemplateformatting”SelecteachslideandapplyadesigntemplateRight-clickonslidesintheslidesorterviewandselect“SlideDesign”IntheSlideDesignpane,rollyourmouseovertheBEAstyleyouwanttoapply,clickthearrowinsidet

54、hethumbnailandselect“applytoselectedslides”Continuedonslide18BEAConfidential.|117ApplyingthBEAConfidential.|118ApplyingtheCorporateTemplateSlideDesigntoanExistingPresentation(Cont.)Next,eachslidewillneedtohavetheappropriateslidelayoutappliedRight-clickonslidesintheslidesorterviewandselect“SlideLayou

55、t”IntheSlideLayoutpane,mouseoverthedesiredlayoutthumbnailandselect“applytoselectedslides”GraphicelementsontheslidesmayneedtobeadjustedtoreflectthenewcolorpaletteSomeslideelementswillneedlayoutadjustmentstoconformtothenewtemplatedesignBEAConfidential.|118ApplyingthBEAConfidential.|119ImportingSlidesf

56、romAnotherPresentationOpenthepresentationyouareconvertingandacopyoftheBEAtemplateinSlideSorterViewSelecttheslide(s)youwouldliketoimport,andchooseEditCopySelecttheBEACorporatetemplateSelecttheslideyouwanttheimportedslide(s)tofollow,andchooseEditPasteTheimportedslidesshouldtakeontheBEAtemplateEnsureea

57、chslidehastheappropriateslidelayoutappliedRight-clickonslidesintheslidesorterviewandselect“SlideLayout”IntheSlideLayoutpane,mouseoverthedesiredlayoutthumbnailandselect“applytoselectedslides”BEAConfidential.|119ImportingSBEAConfidential.|120“Usethisformatforquotes.Textsizeshouldbeaminimumof22pt.andca

58、nbeaslargeas32pt.Textshouldnotbecenteraligned.Pleasedonotresizethegrayboxaroundthequote.”-SourceNameQuoteSlideBEAConfidential.|120“UsethisfColorPaletteandSampleChartsColorPaletteandSampleChartsBEAConfidential.|122ColorPaletteR:0G:114B:234R:101G:174B:255R:0G:60B:12R:32G:195B:30R:138G:202B:136R:36G:12

59、4B:34R:182G:70B:184R:210G:144B:212R:117G:45B:119R:255G:0B:42R:255G:91B:91R:158G:0B:26R:178G:180B:179R:211G:211B:211R:122G:128B:131BEAConfidential.|122ColorPaletBEAConfidential.|123FlowDiagramUsingCorporateColorsStep1Step2Step3SupportingbulletcopyhereSupportingbulletcopyhereSupportingbulletcopyhereSu

60、pportingbulletcopyhereSupportingbulletcopyhereSupportingbulletcopyhereSupportingbulletcopyhereBEAConfidential.|123FlowDiagraBEAConfidential.|124SampleBarChartInstructions:Thecolorpalettehasbeensetinthischart.Tocreateanewchart,copythischartontoyourslide.Toupdatethedata,double-clickonthecharttobringup