计算杀灭对数值的时候

1、计算杀灭对数值的时候，取小数点后两位值，可以进行数字修约。如果消毒试验组消毒 处理后平均生产菌落数小于等于1时，其杀灭对数值，即大于等于试验前对照组平均活菌浓 度的对数值。有机干扰物质：按30g牛血清白蛋白中加入1000ml蒸馏水的比例配制约100ml，溶解 后用的无菌滤膜进行过滤除菌后使用，未用完的可于2-8C冰箱中保存。菌试验组：取无菌大试管加入菌悬液，再加入的有机干扰物质，分别用无菌吸管吸 取%的新洁尔灭消毒液，加入试管中，迅速混匀并立即计时。待试验菌与%的新洁尔灭消毒液 相互作用时，吸取试验菌与消毒剂的混合液，加于经灭菌的硫代硫酸钠-生理盐水溶液中， 混匀。试验菌与消毒剂混合液经硫代硫

2、酸钠-生理盐水溶液作用10min后，吸取样液，按活 菌培养计数测定方法测定存活菌数，每管样液接种2个平皿即可。如果菌液浓度较高时，可 进行10倍系列稀释后，在进行活菌培养计数，作为试验组，其计数结果为CX。阳性对照组：用磷酸盐缓冲液代替的新洁尔灭消毒液与菌悬液、有机干扰物质混合 后，取混合液与硫代硫酸钠-生理盐水溶液反应，作用10min后。计数方法同试验组，计数 结果为C0。阴性对照组：吸取此次试验用的纯化水、有机干扰物质、磷酸盐缓冲液混匀，混匀 后取混合液与硫代硫酸钠-生理盐水溶液作用10min后，吸取混合液，按活菌培养计数测定 方法测定存活菌数，作为阴性对照。培养：所有用细菌试验的样品均放

3、入30-35C培养箱中培养，培养48小时观察结果； 用真菌试验的样品放入23-28C培养箱中培养，培养72小时观察结果。4、讨论由结果可以看出通过中和剂中和效果试验可以确定，每升PBS缓冲液中加入10g组氨 酸、50ml吐温-80、5g卵磷脂可以中和新洁尔灭消毒液的消毒效果，因此，在日常消毒中应该避免以上物质的混入。由消毒剂定量悬浮试验结果可以得出新洁尔灭消毒液能够在10分钟内使所有试验菌 的数量至少下降%，说明该消毒剂的消毒效果能达到要求，能够用于使用环境日常的清洁消 毒。消毒剂对物体表面消毒效果验证消毒剂对物体表面模拟现场鉴定试验车间用于该消毒剂消毒的物体表面主要有不锈钢设备表面、地面、墙

4、面以及呼吸袋，经过小 试，将高浓度菌液(104cfu/ml)涂抹于不锈钢设备表面、地面、墙面及呼吸袋，选择回收 率较高的载体作为物体表面消毒效果试验室部分的试验载体。判断标准：回收菌液浓 度：103cfu/ml。试验所需要用的试剂中和剂：活菌计数用培养基：TSA培养基消毒剂配制用水：纯化水试验所需要用的仪器刻度吸管、移液器、电动混匀器、计时器、培养箱、规格板(用不锈钢材料制备，中央留一X的空格作为采样部位)、无菌棉签、无菌接种环试验所需要用的菌种本次试验主要是验证该消毒剂对物体表面微生物的消毒效果，故选择金黄色葡萄球菌、 大肠埃希菌作为试验菌试验所需要用的消毒液的浓度及作用时间%的新洁尔灭消毒

5、液作用30s（5）试验所需要用到的场所微生物实验室阳性间（6）试验的操作步骤（以浓度为%的消毒剂对金黄色葡萄球菌作用30s为例）菌悬液：浓度为 5X105cfu/ml-5X106cfu/ml试验组：取大小合适的无菌呼吸袋作为试验样本，将无菌规格板按压在样本上，用无菌棉签 沾以菌悬液均匀涂抹被试验表面的6区块（各区块25cm2）。用%的消毒剂对三个区块表面进 行喷雾消毒，喷雾的距离约为10cm，以尽量使喷到样本上的雾粒大小和数量一致，消毒后, 将无菌棉签在5ml的中和剂试管中沾湿，分别对3个消毒区块进行涂抹采样，每区块横竖往 返各8次。采样后以无菌操作方式将棉签剪入原中和剂试管中，电动混匀器上混

6、匀20s,吸 取上述洗液，按活菌培养计数方法测定存活菌数，每管接种2个平皿，作为试验组，必要时 进行稀释。阳性对照组：从6个区块中选取其他3个区块，用磷酸盐缓冲液代替消毒剂对三个区块表面 同法操作，之后将无菌棉签在5ml的中和剂试管中沾湿，分别对3个区块进行涂抹采样，每 区块横竖往返各8次。采样后以无菌操作方式将棉签剪入原中和剂中，电动混匀器上混匀 20s，吸取上述洗液，按活菌培养计数法测定存活菌数，每管接种2个平皿，作为阳性对照 组,必要时进行稀释。阴性对照组：用一只棉签，分别蘸取同批纯化水，以无菌方式将棉签采样端剪入硫代硫酸钠 -生理盐水溶液中，在混匀器上震荡20s，做适当稀释后，按活菌培

7、养计数方法测定存活菌 数，每管接种2个平皿，作为阴性对照。培养：所有试验样本均在30-35C培养箱中培养，培养48h观察最终结果。（7）试验要求及计算试验须重复三次，计算各组的活菌数（cfu/片），并换算为对数值（N）,然后按计算公式杀 灭对数值KL二对照组平均浓度的对数值（N0）-试验组活菌浓度对数值（NX）（8）试验的判断标准 阴性对照组应无菌生长，阳性对照组菌数符合要求，所有样本的杀灭对数值均N,即判定结 果合格。在每升PBS缓冲液中加入10甘组氨酸，50ml吐温80，5g卵磷脂，分装，121C、15min压力 蒸汽灭菌后备用。误差率（%）二（三组均数-第三组回收菌落数+三组均数-第四组

8、回收菌落数+三 组均数-第五组回收菌落数）3】/三组均数*100%6、再验证周期质量保证部根据验证结果确定再验证周期。当环境监控的结果出现偏差时，应重新评估目前使用的消毒剂，必要时更换消毒剂的 品种以及调整消毒剂的使用周期。新消毒剂使用前均需经效果验证后方可使用。4.验证结论验证完成之后，汇总所有检测数据，进行统计分析。由验证部门起草验证报告，总结验证结 论，并交由相关部门审核，批准。当检测数据满足下列规定时，方可认为验证合格：统计数据表明所有的检测数据均在规定的范围内；如果检测数据不符合规定标准，经偏差调查发现是由与验证人员无关的因素造成的，并经审 核批准。5.验证结果评价及建议质量保证部负责收集各项验证、试验结果记录，根据验证、试验结果起草验证报告， 报验证领导小组核对。验证领导小组对验证结果进行综合评审，做出验证结论，发放验证证 书，确认该再验证周期。对验证结果的评审应包括：（1）验证试验是否有遗漏。（2）验证实施过程中对验证方案有无修改，修改原因、依据以及是否经过批准。（3）验证记录是否完整。（4）验证试验结果是否符合标准要求，偏差及对偏差的说明是否合理，是否需要进一步 补充试验。（1）75%乙醇:适用于一般物体消毒以及手和皮肤的消毒。它无法杀灭细菌芽胞和病毒。本次验证方案主要对新洁尔灭、75%乙醇等消毒剂的