药物分析第七章芳香胺类药物的分析

1、第七章 芳香胺类药物的分析1常见的芳胺类药物 对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构第一节 芳胺类药物的分析2苯佐卡因3盐酸氯普鲁卡因4盐酸丁卡因盐酸普鲁卡因胺5酰胺类药物的基本结构6对乙酰氨基酚（扑热息痛）7醋氨苯砜8盐酸利多卡因9盐酸布比卡因10盐酸罗哌卡因 11盐酸妥卡尼 12一、结构与性质 （一） 具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量。 （二） 酯键或酰胺键易水解 13 （三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。 14（四）游离碱多为碱性油状液体或低熔点固体，难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐酸盐具有一定的熔点，

2、易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。 15（六） UV （七） IR （五） 某些特征取代基（如酚羟基）的反应 16二、鉴别试验 （一）重氮化偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应 17 直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠 、盐酸氯普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺18盐酸普鲁卡因 Ch.P（2005）【鉴别】 （4）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录） 取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。 19 间接：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜、贝诺酯 20对乙酰氨基酚 Ch.P（2005）【鉴别】

3、 （2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。 2122（二）三氯化铁反应 对乙酰氨基酚 23（三）与重金属离子反应 1. 盐酸利多卡因的鉴别方法 （1）与铜离子的反应24（2）与钴离子的反应（3）与汞离子的反应 252盐酸普鲁卡因胺的鉴别方法羟肟酸铁盐反应 26（四）水解产物反应 1. 盐酸普鲁卡因 Ch.P（2005）【鉴别】 （1）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊

4、试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。 27282. 苯佐卡因 Ch.P（2005）【鉴别】 （1）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。 29（五）氯化物的反应 药典附录“一般鉴别试验”。 1. 沉淀反应 302. 氧化还原反应 31 （六）制备衍生物测定熔点1三硝基苯酚衍生物 盐酸利多卡因 Ch.P（2005）【鉴别】 取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录C），熔点为228232，熔融时同时分

5、解。盐酸布比卡因 Ch.P（2005）322. 硫氰酸盐衍生物 盐酸丁卡因 Ch.P（2005）【鉴别】 （1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80干燥，依法测定（附录C），熔点约为131。33 盐酸布比卡因 Ch.P（2005）【鉴别】（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录A）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸光度分别为0.530.58与0.430.48。（七）UV 34（八）IR 盐酸布比卡因 C

6、h.P（2005）【鉴别】（3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集324图）一致。35三、特殊杂质检查（一）对乙酰氨基酚 1. 有关物质 杂质来源 中间体、副产物及分解产物 对氯苯乙酰胺 杂质对照品法 检查方法 TLC 其他杂质 参比杂质对照品法 36 取本品的细粉1.0g，置具塞离心管或试管中，加乙醚5ml，立即密塞，振摇30分钟，离心或放置至澄清，取上清液作为供试品溶液；另取每1ml中含对氯苯乙酰胺1.0mg的乙醇溶液适量，用乙醚稀释成每1ml中含50g的溶液，作为对照溶液。吸取供试品溶液200l与对照溶液40l，分别点于同一硅胶GF254薄层板上。以三氯甲烷丙酮甲苯（1352）为展

7、开剂，展开，晾干，置紫外光（254nm）灯下检视，供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。372. 对氨基酚 杂质来源 中间体、水解产物 反应原理 38检查方法 对照法 取本品1.0g，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50g用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005）。 39 对乙酰氨基酚咀嚼片、泡腾片、颗粒及滴剂等均需检查对氨基酚。方法为反相高效液相色谱法，以ODS为固定相；0.05molL醋酸铵溶液甲醇（8515）为流动相。限度为0.1。 40（二）盐酸普鲁卡因注射

8、液中对氨基苯甲酸的检查 检查方法 TLC 杂质对照品法 杂质来源 水解产生 41 精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录B）试验，吸取上述两种溶液各10 l，分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（141 1 4）为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸5ml制成）喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液的主斑点比较，不得更深。

9、4243（三）盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查 USP（30）采用HPLC法（四）盐酸罗哌卡因的对映体纯度检查 USP（30）采用CE法44（一）亚硝酸钠滴定法 1. 原理 具芳伯氨基的药物四、含量测定 45 具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。 46472. 主要测定条件（1）加入适量KBr加速反应 KBr为催化剂NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O 在盐酸存在下，重氮化反应的机理为： 4849（1）K1（2）K2 K1 300

10、 K2 加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度50（2）加过量盐酸加速反应在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHCl H2SO4 HNO351盐酸 1:2.56； 加入盐酸： 重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果5253（3）反应温度 室温条件下滴定 1030（4）滴定速度 滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定 543. 指示终点的方法（1）永停滴定法 Ch.P（2005）、BP（2005）55永停滴定法（附录A） 用作重氮化法的终点指示时，调节R1使加于电极上的电压约为50mV

11、。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（12）15ml，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。56（2）电位法 USP（30）（3）外指示剂法 KI淀粉糊剂或试纸2NaNO2+2KI+4HCl 2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O （4）内指示剂法 中性红 不可逆指示剂574. 测定

12、方法 盐酸普鲁卡因 Ch.P（2005） 取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录A），在1525，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2HCl58（二）非水溶液滴定法 脂烃胺侧链，具弱碱性 59盐酸利多卡因的含量测定 Ch.P（2005） 取供试品约0.2g，精密称定，加冰醋酸10ml溶解后，加醋酸汞试液5ml与结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1 mol/L）相当于27.08mg的盐酸利多卡因（C14H22

13、N2OHCl）。60（三）紫外-可见分光光度法 对乙酰氨基酚在0.4氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。 61 对乙酰氨基酚原料、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊剂。 62对乙酰氨基酚 Ch.P（2005） 取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数 为715 计算，即得。63例 精密称取对乙酰氨基酚42mg，置250ml量瓶中，加0.

14、4氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度为0.594，按C8H9NO2的吸收系数 为715 计算百分含量。64W=42mgV=250ml5ml100ml D=100/565例 取标示量为0.3g/片的对乙酰氨基酚片10片，总重为3.3660g，称出44.9mg，置250ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液50ml及水50ml，振摇15min，加水至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过。弃去初滤液，精密量取续滤液5m1，置100ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在

15、257nm的波长处测的吸收度为0.583，按C8H9NO2的吸收系数 为715 计算本片剂的标示量%。66片剂，吸收系数法67（四）荧光法荧光探针技术 使荧光衍生化试剂与本身无荧光或荧光效率低的化合物反应，其产物具有强荧光，从而使检测灵敏度大大提高。68激发波长：ex400nm发射波长：em485nm 测定荧光强度，标准曲线法定量。69（五）HPLC 对乙酰氨基酚泡腾片、滴剂及凝胶剂采用高效液相色谱法测定含量。 离子抑制色谱法，外标法或内标法定量7098：133盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（AB）A. 重氮化偶合反应B. 羟肟酸铁盐反应C. 氧化反应D. 磺化反应E. 碘化反应 7197：1

16、37采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（CD）A. 苯巴比妥B. 盐酸丁卡因C苯佐卡因D. 醋氨苯砜E. 盐酸去氧肾上腺素 7295：85下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（A）A. 乙酰水杨酸B. 对氨基水杨酸钠C. 对乙酰氨基酚D. 普鲁卡因E. 苯佐卡因 7396：81（99：72）. 亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（B）A. 添加BrB. 生成NO+Br C生成HBrD. 生成Br2 E. 抑制反应进行 7495：75中国药典（1990年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（B）A. 电位法 B. 永停法C. 外指示剂法 D. 内指示剂法E. 自身指示剂法 7596：12

17、7亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（BCDE）A. 自身指示剂法B. 内指示剂法C. 永停法D. 外指示剂法E. 电位法 76例1. Ch.P（2005）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（C）A. 自身指示终点法B. 电位法指示终点C. 永停滴定法D. 氧化还原指示剂法E. 酸碱指示剂法 77例2. 以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸（E）A. 盐酸普鲁卡因B. 盐酸普鲁卡因胺C. 注射用盐酸普鲁卡因D. 盐酸普鲁卡因胺片E. 盐酸普鲁卡因注射液 78例3. 盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（ABCDE）A. 强酸B. 加入适量溴化钾C.

18、 室温（1030）下滴定D. 滴定管尖端深入液面E. 永停法指示终点 79第二节 苯乙胺类药物的分析 苯乙胺类药物的基本结构*80常见的苯乙胺类药物81828384盐酸苯乙双胍85盐酸克仑特罗86盐酸麻黄碱87硫酸沙丁胺醇88一、结构与性质 1. 脂烃胺基侧链，显弱碱性 2. 酚羟基，易氧化变色，可发生三氯化铁反应 3. 具手性碳原子，具旋光性89 4. 溶解性 游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水 5. UV 6. IR 7. 取代基：具芳伯氨基的药物，可用重氮化偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。 90二、鉴别试验1. 三氯化铁反应2. 氧化反应3. 与甲醛硫酸反应4. UV与I

19、R 915. 与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应） 脂肪族伯胺的专属反应926. 双缩脲反应 侧链具有氨基醇结构的盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、盐酸去氧肾上腺素可用此反应鉴别 93三、特殊杂质检查 杂质来源 原料残存 检查方法 UV （一）酮体的检查94 检查原理 利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。 95例 中国药典（2005年版）规定肾上腺素中检查酮体的方法为：取本品，加盐酸溶液（92000）制成每1ml中含2.0mg的溶液，于310nm波长处测定，吸光度不得过0.05，已知酮体在310nm波长处的

20、百分吸收系数为453，肾上腺素在该波长处无吸收。计算肾上腺素中酮体的限量。9697（二）有关物质检查 1. 盐酸氨溴索 HPLC 982. 盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 检查方法：纸色谱法（PC）分离后，甲醇萃取，紫外-可见分光光度法于232nm波长处测定吸光度，控制吸光度以控制有关双胍的量 993. 硫酸特布他林 TLC中高低浓度对比法100四、含量测定 （一）非水溶液滴定法 原料药 脂烃胺基侧链，显弱碱性 101（二）溴量法 盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺 反应摩尔比为13 102（三）紫外分光光度法与比色法 盐酸克仑特罗栓 具芳伯氨基，可发生重氮化偶合反应103对照法定量104 偶合剂N-（1-萘基）-乙二胺遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合