无菌检验验证方案

1、无菌查验考证方案种类：编号：部门：页码：无菌查验方法考证版次：新订代替:制定人:年代日审批会签:赞成人：年代日奏效日期：年代日1/6无菌查验考证方案考证目的1.1确认所用的检查方法合用于一次性活检钳的无菌检查。1.2确认检查结果的正确性、靠谱性、重复性和可操作性及检查方法的圆满性。考证范围合用于我企业生产的一次性活检钳无菌查验。查验依照中国药典2010版附录无菌检查法ISO11737-2:2009医疗器材的灭菌微生物学方法第一部分：确认灭菌过程的无菌试验GB/医用输液、输血、注射用具查验方法第2部分：生物学试验方法考证器材查验环境：无菌检查应在环境干净度10000级下的局部100级的单向流空气

2、地区内进行操作。设施：医用净化工作台、生物安全柜、无菌检查膜过滤器、电动吸引器、电热干燥箱、霉菌培育箱、数显生化培育箱、压力蒸汽灭菌器、电子天平、pH计、冰箱、恒温水浴锅、显微镜等。培育基及稀释液：硫乙醇酸盐流体培育基、改进马丁培育基、氯化钠-蛋白胨缓冲液、%蛋白胨水溶液、营养琼脂。其余实验资料：微孔滤膜（孔径，直径约50mm）、无菌过滤杯、无菌剪刀、无菌镊子、无菌钳子、无菌手套、吸管（1ml和10ml）、酒精灯、三角烧瓶、接种环、培育皿。考证方案原理：活检钳的形状为不溶物，为微生物转移更完好，特采用无菌检查法中的薄膜过滤法。设施器材：考证中所用器材、设施已经过国家计量单位判断合格并有判断证书

3、。培育基：考证中所用培育基以经过培育基敏捷度实验检测合格。操作步骤：供试品的取样依照GB/T有关规定进行逐批取样。将所需物件，供试品表面消毒，经过传达窗，紫外线照耀半小时.无菌室紫外线消毒半小时。操作人员用洗手液、自来水冲刷双手，封闭紫外灯，换拖鞋，脱外套放入衣柜，穿干净白大衣，进入缓冲间，再用洗手液、纯化水冲刷双手，用75%乙醇敌手进行消毒，衣着无菌衣、帽、口罩、手套等。进入菌检室，翻开医用干净工作台风机，运转最少15分钟以上。将所需物件由传达窗拿出，两只消毒液桶分别搁置于菌检干净工作台一侧，其余物件搁置于传达窗一侧的方形桌上，剥去牛皮纸外包装。医用干净工作台内点燃酒精灯。翻开3个养琼脂平板

4、，置于医用干净工作台的不一样样地点。2/6无菌查验考证方案取供试品，在医用干净工作台内，翻开包装袋，当心将供试品拿出，将其剪成约10cm的小段，浸入500ml%无菌蛋白胨水溶液中，充分振摇作为供试液。将供试液均匀转入三个薄膜过滤器的滤杯中，开启电动吸引器开关进行过滤，用蛋白胨-氯化钠缓冲液每次100ml冲刷滤膜三次，用平口镊子夹取滤膜（过程保持滤膜的圆满性），一张转移到100ml改进马丁培育基，另两张转入100ml硫乙醇酸盐流体培育基，此中一只做阳性比较，内并用记号笔在各试管上做好标志。用同批的冲刷液和浸提介质各100ml经过两个集菌仪过滤，同法一张加硫乙醇酸盐培育基100ml，另一张加改进马

5、丁培育基100ml分别作阴性比较。用记号笔在试管上注明供试品名称、批次、查验日期。依照上述方法，在同一条件下，重复上述实验步骤，作为平行样品。用%新洁尔灭溶液或75%乙醇溶液对菌检室医用干净工作台、地面进行消毒。操作人员走开菌检室，换掉无菌衣、口罩、手套，衣着白大衣，改换拖鞋，进入菌检准备间。将菌检实验物件由传达窗拿出，将待加阳性比较的供试品转入阳性比较间，置于生物安全柜内并翻开风机。制备金黄色葡萄球菌菌悬液（约含金黄色葡萄球菌50100cfu/ml），取1ml加入作为阳性的硫乙醇酸盐流体培育基中，作为阳性比较。培育条件：凡硫乙醇酸盐流体培育基、营养琼脂培育基培育物，置于3035数显生化培育箱

6、内培育，改进马丁流体培育基培育物置于2328霉菌培育箱内培育，培育时间均为14天。每日察看结果并记录。结果判断阳性比较管中应生长优秀，阴性比较管不得长菌。不然，考证无效。若供试品管均澄清，或虽显污浊但经确证无菌生长，判断供试品符合规定；若供试品管中任何1管显污浊并确证有菌生长，判供试品不符合规定，除非能充分证明试验结果无效即生长的微生物非供试品所含。当符合以下最少一个条件时，方可判断考证结果无效：无菌检查试验所用的设施及环境的微生物监控结果不符合无菌检查的要求。回首无菌试验过程，发现可能有惹起微生物污染的要素。阴性比较管有菌生长。供试品管中生长的微生物经判断后，确证是因无菌试验中所使用的物件和无菌操作技术不妥惹起的。3/6无菌查验考证方案考证若经确认无效，应重试。重试时，从头取同量供试品，依法重试，若无菌生长，判供试品考证方案有效，如有菌生长，判断供试品考证方案无效。4/6无菌查验考证方案有关记录产品名称规格型号生产批号灭菌批号查验依照查验日期查验结果天数1234567891011121314培育基供硫试乙品醇1酸供试盐品流25/6无菌查验考证方案阳体性培养1阳基性2阴性供改试良品马1丁供试培品养基1阴性考证结