实验2-3、两栖类循环系统浸渍标本制作与骨骼系统制作课件

1、蟾蜍循环系统浸渍标本制作指导教师：许维岸、顾福根二、实验内容1. 注射色剂的配制。2. 蟾蜍心脏的解剖和动脉注射。3. 蟾蜍腹静脉的剥离和静脉注射。一、实验目的 观察蟾蜍的心血管系统，了解两栖类心脏的构造、循环途径及其特点。三、操作步骤 处死： 双毁髓法处死蟾蜍，腹面朝上置于蜡盘中，沿腹中线偏左剪开腹腔直到肩带，再剪断肩带的呜喙骨和锁骨。 穿线：剪开围心膜提起心脏，将线合成双股从动脉圆锥背面穿进去后再剪为两股，靠近心室的一根扎紧以防注入静脉窦，另一根打个结但不扎紧。 动脉注射：抽取35ml红色的注射色剂，将针尖刺入动脉圆锥，快速推入色剂，直到肠系膜或皮肤的小血管充满红色，快速将线扎紧。 静脉注

2、射：将腹静脉剥离出来，也穿上两股线，都打结但不扎紧备用。抽取蓝色色剂78ml，在两股线间刺入注射，前后两部分静脉变蓝后将两线扎紧。 置于冷水下冲洗以加快胶的冷却，然后观察动脉、静脉的走向两栖类循环系统图两栖类循环系统图两栖类骨骼标本制作目的 学会小型脊椎动物骨骼标本制法。学习两栖类骨骼标本的基本制作方法，了解两栖类骨骼的基本组成。一、材料和器具1、蟾蜍一只 2、手术剪刀一把 3、一根大头针 4、镊子 5、电吹风 6、502胶水一瓶 7、旧牙刷一把 8、一个可以加热煮水的器皿。2、处死；在蟾蜍的脑后，头骨与脊椎骨连接处背侧，有个枕骨大孔，用大头针从这儿次劲头骨脑腔里边，搅动数下。二、剥皮；从肛孔

3、到下巴顶部，用剪刀剪开，当心不要剪坏胸骨。从这条开口向四肢各剪一条开口，把皮肤剥下来。然后剪开腹部的肌肉层，用镊子把内脏摘除来。三、加热；把整理好的蟾蜍放入沸水中加热五分钟，期间用镊子翻转几下，至肌肉变得很容易撕下来就可以了。五、脱脂；骨骼上的肌肉都剔干净以后，把整具骨架充分晾干，在密封的容器中用汽油浸泡两天，除去骨各种的油脂，这样骨架做好后不会发霉，可以长久保存。或也可省去脱脂步骤，将骨骼冲洗后浸入0.508过氧化钠13天。六、漂白；脱脂完毕的骨架，从汽油中捞出来，晾晒一天，等汽油完全挥发后，放入3%的双氧水中浸泡一天，这样可以把骨骼漂白，使骨架看起来更美观一些。 七、装架；漂白完毕，把骨架

4、在清水中漂洗一下，就可以装架了。趁着手掌骨和脚掌骨湿润可以活动，把它们整理平整，用电吹风吹干定型，关节之间点入胶水加固。 把头骨和脊椎骨吹干，在关节窝上点上胶水连接起来。两片肩胛骨分别粘在对应的第二、三两块脊椎骨的侧向突起上，调节好前腿骨骼和脊椎骨的角度用胶水连接定型，在将后腿骨骼整理好关节之间的角度后，粘接在对应的关节窝上。透明骨骼标本的制作 实验前的思考 脊椎动物的骨骼是包裹在皮肤和肌肉中的，不能直接观察到。假如设法除去它们的皮肤，用药物使肌肉变得透明，那么，这些小动物的骨骼，就能完整地显示出来，并且保持它的自然状态。如果再用药物使它们的骨骼染上颜色，效果更佳。材料器具 小型脊椎动物如鱼、

5、蛙、小白鼠；解剖器，标本瓶，玻璃片，注射器，绳；95乙醇，氢氧化钾溶液，茜素红，甲醛，过氧化氢溶液，纯甘油，水合氯醛，冰乙酸，阿利新蓝-8GX，胰蛋白酶，硼砂溶液，麝香草酚，清水，重铬酸钾溶液，染色液，褪色液，稀过氧化氢溶液，染色原液，软骨染色液，硬骨染色液，胰蛋白酶混合液。1.取材 新鲜的小型脊椎动物，如鱼、蛙等，长度在1020厘米，以活体为好。2.固定 材料洗干净。如果是鱼，应该先去鳞，再洗净。然后，放入95乙醇中固定12天。如果材料已经用510甲醛液保存过，则要用清水漂洗后再浸在95乙醇中，使它充分固定。3.去皮 用解剖器剥去小动物的外皮。4.脱脂 把去皮后的标本用绳缚在玻璃片上，整理好姿势，浸在3%重铬酸钾溶液中几天，除去材料表面的脏物和脂肪粒块。当溶液变混浊时，更换新液，直到溶液不混浊为止。取出标本，用清水洗干净，再浸入95%乙醇中脱脂一周左右。5.透明 标本转入20%氢氧化钾溶液中。一周左右，见肌肉呈半透明状态，里面骨骼隐约可见，即终止透明。6.染色 把透明后的标本浸入0.01%茜素红染液中23天，到骨骼染上红色为止。7.褪色 先把标本放入2氢氧化钾溶液中浸1天，然