血栓与止血检验基础理论

1、血栓与止血检验基础理论1Vessel wallBlood plateletsCoagulation factorsanti-coagulation substancesfibrinolysisHemostasis coagulation2凝血因子概述凝血机制及分子基础3一、凝血因子概述I-XIII（缺VI），FIV为Ca2+激肽释放酶原、高分子激肽原多为糖蛋白，肝内合成，存在于血液中FIII在组织内正常情况下，大部分以酶原形式存在 4凝血因子分类 (一)维生素K依赖因子 F( 凝血酶原) F(稳定因子) F(血浆凝血活酶成分) F(stuart-prower因子) （PC、PS）分子结构中的氨

2、基（N）末端含有- Gla- Gla在肝细胞内的生物合成依赖Vit K 的介导具有结合Ca2+的能力，并借助于Ca2+与磷脂膜结合，Ca2+起“搭桥”作用形成（-羧基谷氨酸Ca2+-磷脂膜）若缺乏Vit K 或上述4个因子N端无- Gla 则无凝血活性，可导致新生儿出血或获得性成人出血性疾病。5凝血因子分类 (二)接触因子 F(接触因子) F(血浆凝血活酶前质) PK(激肽释放酶原) HWWK(高分子量激肽原)6凝血因子分类(三)对凝血酶敏感的凝血因子 F (纤维蛋白原) F(易变因子) F(抗血友病球蛋白) F(纤维蛋白稳定因子)(四)其他 F(组织因子) F(钙离子)7二、凝血机制及分子活

3、化基础HMWK89F激活FX和IX，沟通内源及外源凝血途径。VII缺陷合并严重出血1.外源凝血途径TF释放到TF-FVIIa-Ca2+形成是最重要的凝血途径10Tissue factor (TF)VIIVIIa- TFIXIXaXXaXIaVIIIaExtrinsic Pathway11外源凝血途径 TF释放TF-VIIa-Ca2+ 由组织因子启动的凝血过程，形成III、VII、Ca2+复合物血管受损后，来自损伤部位的因子III和由XIIa、Ixa、激肽酶激活的因子VIIa，与Ca2+形成复合物。12Coagulation Factor XII (contact factor)单链糖蛋白，内源

4、凝血途径的始动因子。FXII的激活不再是体内凝血的一个重要环节，而对纤溶系统的激活作用更大。体外凝血试验仍有沿用各种物质去激活FXII。2.内源凝血途径13FXII的激活：固相激活与带负电荷的物质接触 - 体内：胶原、微纤维、基底膜 长链脂肪酸等 - 体外：玻璃、白陶土、硅藻土等分子构型发生改变活性部位暴露 FXIIa 14 激肽释放酶原 prekallikrein , PKPK与HMWK以复合物的形式存在。PK缺陷与FXII一样，病人无任何出血症状，却常合并血栓栓塞性疾病PKFXIIa精371-异亮372肽键断裂K（酶活性中心位于轻链， 重链区有于HMWK结合 的部位） K的作用是激活FXI

5、I、FXI15 高分子量激肽原high molecular wight kininogen ,HMWK 起辅因子(cofactor)作用参与FXII、FXI的激活生成的激肽有扩张血管、增加血管通透性及降低血压的作用HMWK缺陷与其他接触活化因子缺陷病人一样，无出血症状。16FXI与HMWK结合成复合物的形式存在FXIa激活纤溶的作用大于激活FIX， 甚至大于FXIIa对纤溶的作用 FXI凝血酶 或体外FXIIa精369-异亮370肽键断裂FXIa（活性中心位于2条轻链C端的丝氨酸残基）Coagulation Factor XI 血浆凝血活酶前质 plasma thromboplastin an

6、tecedent ,PTA17 因子IX-血浆凝血活酶成分 plasma thromboplastin component, PTC 可被FXIa或TF-FVIIa-Ca2+复合物激活FIX缺乏为血友病B，是一种性联隐性遗传性疾病FIXFXIa精146-丙147肽键断裂无活性双链-FIXFXIa使重链上的精181-缬182肽键断裂有活性-FIXa18 因子复合物-抗血友病球蛋白 antihemophilic globulin ,AHG由因子促凝活性与vWF形成复合物形式存在（1：99）a的辅因子，被a激活 FaF缺乏为血友病A,是最常见的出血性疾病。19Queen Victoria (1837

7、-1901)SpanishGerman Russian20XIIContact (Eg: with glass)XIIaXIXIaIXIXaXXaVIIIaPLCa+Intrinsic Pathway21概念：内源性凝血途径 FXIIFIXa-VIIIa-Ca2+-PF3 参与这一反应系统的凝血因子，全部来源于血 液，形成IX、VIII、Ca2+、PF3复合物 22因子X-stuart-prower因子处于-内、外源及共同途径的交点可被IXa-VIIIa-Ca2+-磷脂、TF-FVIIa -Ca2+激活有活性的-FXaFX重链上的精51-异亮52肽键断裂，从其N端释出一小肽从其C端释出含17个

8、氨基酸残基的一小肽有酶活性的-FXa3.共同凝血途径23 因子V-易变因子 labile factor 体外最不稳定 的凝血因子是FXa的辅因子，参与II的激活 起始凝血酶、FXaFV FVaFV缺陷有副血友病之称，有轻度出血症状。24凝血酶(thrombin) 生成FIIA和B两条肽链构成的凝血酶（FIIa）凝血酶原酶精274-苏275肽键断裂，释放出F1+2中间产物凝血酶原酶精323-异亮324肽键断裂2526纤维蛋白形成272829纤维蛋白形成过程(Fibrin Formation)FgFM纤维蛋白聚合物交联纤维蛋白凝血酶FXIIIa30FibrinXaCoagulation Pathw

9、ayExtrinsic pathway (Tissue factor)ProthrombinThrombinFibrinogenIntrinsic pathway (Contact)X31共同凝血途径 FXFb形成 经内、外两种途径形成的IX-VIII-Ca2+-PF3复合物及III-VII-Ca2+复合物激活XXa，与V、Ca2+、PF3形成复合物（凝血酶原酶）激活FII凝血酶裂解FI纤维蛋白32深化凝血机制33二、凝血机制及分子活化基础HMWK34几个复合物 FIXa-VIIIa-Ca2+-PF3 （+）FX TF-VIIa-Ca2+ （+）FX，FIX Fxa-Va-Ca2+-PF3 凝

10、血酶原酶35内外凝血途径的凝血因子有交叉作用 VIIa激活IX XIIa、激肽酶,IXa参与因子VII的激活 组织因子（外源性）也可产生于血管内36凝血因子特性 II prothrombin ：共同途径 VII stable factor ：外源途径 IX Christmas factor ：血浆凝血活酶成分，内源途径 X Stuart-Prower factor ：内外源及共同途径 XII Hageman factor ：接触因子，内源始动因子 XI plasma thromboplastin antecedent ： 血浆凝血活酶前质，内源 PK：内源 HMWK：内源，接触反应起辅因子作用

11、37凝血因子特性 I fibrinogen ：凝血酶作用底物 V proaccelerin, labile factor ：易变因子，最不稳定 VIII antihemophilic factor ：抗血友病球蛋白，内源 XIII fibrin-stabilizing factor ：纤维蛋白稳定因子 III Tissue factor ：组织因子，外源途径 IV Calcium ：促凝血因子与磷脂表面成复合物38二、凝血机制及分子活化基础HMWK391.正常血液中通常没有下列哪一种凝血因子：A XIII B组织因子 C D E2.外源性凝血系统的作用起始于A.组织受伤释放组织因子IIIB.凝

12、血酶的形成C.第因子被激活D.血小板第三因子的释放E.第X因子被激活40Vessel wallBlood plateletsCoagulation factorsanti-coagulation substancesfibrinolysisHemostasis coagulation41抗凝血系统抗凝血酶 (AT)蛋白C系统组织因子途径抑制物(TFPI)其他：42431. 抗凝血酶(AT) 由肝脏、血管内皮细胞、巨核细胞合成； 丝氨酸蛋白酶抑制剂，是人体内最重要的血浆抗凝物质，对凝血酶的灭活能力占70%80%。 有肝素结合位点和凝血酶结合位点 肝素作用于AT的赖氨酸残基从而大大增强AT的抗凝酶

13、活性（2000倍以上）。正常血浆中AT含量超过凝血酶三倍，当AT下降至50%时，即有血栓形成可能。当血浆中AT降至30%，肝素就不能起加强灭活凝血酶作用。44抗凝机制抗凝血酶45抗凝血酶 (AT)蛋白C系统组织因子途径抑制物(TFPI)其他：抗凝血系统462.蛋白C系统 蛋白C，蛋白S：肝脏合成，依赖VitK的抗凝蛋白，蛋白S是蛋白C 的辅因子凝血酶调节蛋白(TM)：存在于内皮细胞中内皮细胞蛋白C受体(EPCR)作用：灭活FXa，FVIIIa，FVa。4748抗凝血酶 (AT)蛋白C系统组织因子途径抑制物(TFPI)其他：抗凝血系统494_053.Tissue Factor Pathway I

14、nhibitor (TFPI)50TFPI与Xa结合再与TF/VIIa结合抑制外凝51抗凝血酶 (AT)蛋白C系统组织因子途径抑制物(TFPI)其他：抗凝血系统52 4.蛋白Z(PZ)和蛋白Z依赖的蛋白酶抑制物(ZPI)PZ为VitK依赖的糖蛋白，肝脏合成。ZPI为丝氨酸蛋白酶。 作用：灭活FXa。53Vessel wallBlood plateletsCoagulation factorsanti-coagulation substancesfibrinolysisHemostasis coagulation54纤维蛋白溶解系统纤溶系统组成及特性 组织型纤溶酶原激活物(tPA) 尿激酶型纤溶

15、酶原激活物(uPA)纤溶酶原(PLG)纤溶酶(PL)纤溶酶原激活抑制物(PAI), 2 抗纤溶酶(2-AP)AT-， 2-M， 1-AT5556纤维蛋白溶解机制Fg/Fb被纤溶酶溶解，称纤维蛋白溶解(纤溶) 纤溶酶原 纤溶酶 溶解Fg/Fb、分解多种凝血因子、激活激肽系统和补体系统、抑制血小板粘附和聚集纤溶酶原激活物纤维蛋白溶解系统57纤维蛋白溶解机制 纤溶酶原激活的途径 内激活途径 XIIa和激肽酶将纤溶酶原激活为纤溶酶 外激活途径 t-PA、u-PA等将纤溶酶原激活为纤溶酶 外源激活途径 溶栓药SK和UK将纤溶酶原激活为纤溶酶纤维蛋白溶解系统58纤维蛋白原 凝血酶 非交联纤维蛋白 因子XIII 交联纤维蛋白纤溶酶 FPA1-16 纤溶酶 纤溶酶 FPB1-14 X，Y，D，E X，Y，D，E X，Y，D，EB1-42 B15-42 D-D二聚体A，B，C，H A，B，C，H DD-E复合物纤维蛋白原的降解非交联纤维蛋白的降解：Fb-I -B1-42，A裂解 Fb-II的降解- B15-42， A裂解纤维蛋白的降解：FDP纤维蛋白