尿亚硝酸盐定性测定干法学法作业指导书

1、尿亚硝酸盐定性测定干法学法作业指导书1. 实验原理基于尿液中革兰氏阴性细菌将硝酸盐转化成亚硝酸盐的原理。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。2.2 标本种类：新鲜尿液2.3 标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的容器必须清洁干燥，要求留取中段尿。3. 标本储存：从排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析，应置4下冷藏保存，但冷藏时间不得超过6小时。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：细菌，经血，白带，精液，粪便污染标本不能作测定。6. 试剂6.1 试剂名称 Combur10 TestR M6.2 试剂厂家 德国 Roche 诊断试

2、剂公司6.3 包装规格：100Test/kit6.4 试剂盒组成：试纸条：100条6.5 试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存于2-30条件下，可使用至试剂盒所标示有效期。7. 仪器设备7.1 仪器名称：罗氏尿液分析仪7.2 仪器厂家：Roche7.3 仪器型号：MiditronR Junior II7.4 仪器校准程序：在使用过程中，一般是两周校准一次，如超过此期限，仪器会提示“Please Calibrate”（请校准）。通过测定内部参比块，环境温度和光学系统的改变都可被补偿。当条件改变很大时，比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗，仪器将打印出一个错误信息；校准条是有稳定特征的灰白色试条，这些

3、校准条只能使用一次。校准前，应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为：在“READY”显示时，按键，放上校准条。再按键，校准条被送入机器内，屏幕显示“Calibrating”（正在校准），约一分钟后，标准结果将被打印出。“Calibrating O.K”，表示校准成功。8. 操作步骤：8.1 按键，显示“Prepare Strip”,此时试条筒中拿出试条。8.2 约4秒钟后，显示“Dip Strip 1”，同时绿灯闪烁，将试条浸入尿样中。8.3 当显示“Insert Strip 1”,把试条放在试条托盘上，此时绿灯亮，若要人工输入颜色，按键，再按键，选择相近的颜色，最后按键确认，同样也可人工输入浊度。

4、8.4 约20秒后，显示“Dip Strip 2”，然后重复以上过程。每一个测量完成后将自动打印出结果。9. 结果判断：粉红色斑点或粉红色反应为阳性结果。10. 质量控制：质控尿液的应用：用人工质控尿液进行空内质控，低浓度质控液亚硝酸盐应为（-），高浓度质控液亚硝酸盐应为（+）。11. 参考范围：阴性12. 临床意义：阳性结果提示尿液中存在革兰氏阴性细菌，并提示尿中所存在的细菌数目在10 5个/ml以上。13. 操作性能：快速简便，特异性强，灵敏度高，重复性好。14. 方法局限性14.1 粉红色反应为阳性结果，并提示尿中所存在的细菌数目在10 5个/ml以上，但颜色的强度与所存在的细菌数不成正比例关系。 14.2 阴性结果并不表示尿液中无细菌存在，阴性结果可见于非硝酸盐转化型细菌的尿路感染。当尿液在膀胱内储留时间不足4小时以上以便使硝酸盐被还原，或者饮食中缺乏硝酸盐，尽管尿液中所存在之细菌含有还原酶，其试验结果也可能为阴性。14.3 高比重的尿液可降低亚硝酸盐试验的灵敏度。对于含有少量亚硝酸盐（等于或少于13mol/L）的样本，尿液中的维生素C浓度等于或大于1.42mmol/L时可产生假阴性结果。15. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作