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文档简介

第八章细胞核与染色体复习题本章的基本内容:1.核被膜与和孔复合体2.染色质与染色体3.核仁4.核基质学习要求:掌握细胞核各个部分的构造与功能(核膜、和孔复合体、染色质与染色体、核仁和核基质),理解染色质与染色体间的互变和染色质构造与基因转录间的关系,认识与细胞核有关的一些常用实验技术。基本看法:核纤层:是位于细胞核内层核膜下的纤维蛋白片层或纤维蛋白网络。核纤层由一至三种核纤层蛋白多肽构成。在细胞周期过程中,核纤层陪伴着核纤层蛋白的磷酸化和去磷酸化而发生着解体和重建的变化。核孔复合体:是镶嵌在内外核膜交融出形成的和孔上、直径约为120~150nm的一种复杂结构。他是核质之间物质互换的双向选择性通道。判定为信号:指亲和蛋白拥有的、能保证其整个蛋白质分子经过核孔复合体而转运到细胞核内的一段特别氨基酸序列。第一个被确定序列的判定位信号来自猴肾病毒SV40的T抗原。核质蛋白:是一种大分子五聚体、耐热的可溶性蛋白质。最早由Laskey等人于1978年在非洲爪蟾卵母细胞的核中大量存在。核质蛋白经水解可分为两部分,五聚体的核心是抗蛋白酶的,而每条尾巴则为蛋白酶敏感区。假如五聚体的尾巴全部消化掉,则这类蛋白质不可以进入细胞核中;若注射入细胞核中,也不被转运而留在核中;但只需留有一条尾巴。即能积累于核中。核质蛋白对DNA与组蛋白组装成核小体是必不可以少的。若缺少核质蛋白质,DNA与组蛋白在组装过程中会产生积淀而不可以形成正常核小体。核质蛋白的作用在于即能促使组蛋白与DNA的互相作用,又可防范DNA与组蛋白间因强静电吸引而形成非特异性联合的不溶性聚合物。但它自己其实不参加核小体的构成。染色质:建起细胞核中的DNA与蛋白质形成的复合物,其基本单位是以组蛋白八聚体为核心、DNA环绕其外两周所形成的核小体构造。他在有丝分裂时浓缩成染色体。判定位信号:指亲核蛋白拥有德、能保证其整个蛋白质分子经过核孔复合体而转运到细胞核内的一段特别氨基酸序列。第一个被确定序列的NLS来自猴肾病毒(SV40)的T抗原。核糖核蛋白颗粒:在电子显微镜下可以看到基因转录产物一旦出现马上与细胞核内的蛋白质联合,大概每500个核苷酸与蛋白质形成一个直径为20nm左右的复合颗粒。MRNA前体的加帽、接尾、剪切、输出核孔直至mRNA在核糖体中翻译和降解等都是在RNA与蛋白质形成的复合物中进行的。这类RNA与蛋白质形成的复合物统称核糖核蛋白颗粒。ALU家族:是人类和哺乳动物基因组中一组约300bp长、散在的短重复序列,此序列内常含有ALU内切酶的切点。在人类基因组中约有50~70万个ALU拷贝,相当均匀大概每隔4kb就有一个ALU序列.ALU序列拥有种属特异性.小卫星DNA:由几十个核苷酸次序重复构成的一种多态性简单序列,重复3000次之多,也叫可变数量的串联重复次序,常用作个体判断的DNA指纹图谱基础.其余发现小卫星序列的改变可以影响周边基因的表达。微卫星DNA:由前后排列的二、三或四个核苷酸重复单位次序排列构成的简单串联重复序列,串联簇长度多为50~100bp。人类基因组中最罕有30000个不一样样的微卫星位点,呈高度微卫星多态性,不一样样个体间有明显差异,但在遗传上倒是高度保守的,所以,可作为重要的遗传标志,用于建立遗传图谱。高速泳动族蛋白:有些书上又称为高迁移率组蛋白。是一族电泳速度快的非组蛋白。其分子众多拥有三个a螺旋构造构成boomerang-shaped构造模式,拥有曲折DNA的能力,能经过曲折DNA、促使与周边位点相联合的其余转录因子的互相作用而激活转录。所以拥有HMG框构造的转录因子又称为构件因子。亮氨酸拉链:常有于DNA联合蛋白中的二聚体化构造域。在这类蛋白肽链的羧基端约有35个氨基酸残基形成a螺旋,每两圈有一个亮氨酸残基,这样,在a螺旋一侧的亮氨酸残基排列一排,两个蛋白肽链的a螺旋之间的疏水作用力形成一条拉链状构造,但这类蛋白与DNA联合的构造域不是拉链区,而是与拉链区相邻的N端带正电荷的碱性区。锌指模式:是DNA联合蛋白中常有的一类构造模式。在约30个氨基酸残基的一段肽链中由两对半胱氨酸或一对半胱氨酸和一对组氨酸的侧链与Zn2+形成配位键而构成一个锌指。每个锌指单位是一个DNA联合构造域,由其C端形成的a螺旋负责与DNA联合。染色体骨架:是指染色体中由非组蛋白构成的构造支架。骨架周围是DNA放射环;DNA放射环的根部联合在染色体骨架上。染色体非组蛋白骨架在保持中期染色体的基本形状和将DNA组织成染色体方面起重要作用。染色质Loop构造域:在蛋白质形成的染色体轴上,由直径30nm的螺旋管环化形成一系列Loop构造域,每个Loop构造域含有3X104~1X105bpDNA,这类构造域又称为DNA复制环,被认为是染色质高级构造的一般特点.着丝粒:是染色体上的一种重要要点构造,它连结两个染色单体,并将染色体分为两臂,而且与细胞分裂时染色体的分派有亲近关系。着丝粒是一种高度有序的整合构造,最少包括三种不一样样的构造域:着丝粒构造域、中央构造域和配对构造域。端粒:端粒是线性染色体端部的特化构造,由端粒DNA和端粒蛋白构成,端粒DNA含有短的富含G的串联重复序列,端粒蛋白主假如端粒酶,为一种核糖核蛋白,拥有反转录酶的性质,可保证染色体DNA完满复制。端粒的生物学作用在于保持染色体的坚固与其在核内的空间排列。端粒酶:又称端粒蛋白,由RNA和蛋白质构成的一种核糖核蛋白,该酶可以鉴识染色体端粒重复序列的富含G的DNA单链,并以该酶自己富含C的RNA片段为模版,使端粒富含G的DNA链按5‘---3’方向延长,从而解决染色体端粒序列陪伴复制而不断缩短的问题。自主复制DNA序列:是染色体中能保证DNA分子顺利自我复制的特别核苷酸序列,他第一在酵母基因组DNA序列中发现,它能使含有这一序列的重组质粒高校转变酵母细胞,并能在酵母中独立于宿主染色体而存在。依照不一样样根源的ARS的DNA序列分析,发现它们都拥有一段11~14bp左右的同源性很高的富含AT共有序列,而且这段共有序列上、下游各200bp左右的地区是保护ARS功能所必要的。人工渺小染色体:指采用分子生物学技术把真核细胞染色体的复制初步点、三种DNA要点序列互相搭配或改造而构成的渺小染色体。

着丝粒、端粒这B染色体:

B染色体又称超数染色体,是指在有些动植物细胞中数量不等的比

A染色体小,互不一样样源,在减数分裂中也不互相当对的超额染色体,多为以染色质构成,据遗传惰性,对生物的表型一般影响不大。核型模式图:将一个染色体组的全部染色体逐个按其特点绘制下来或用摄影方式记录下来,再按染色体长短、形态等特点排列起来的图示,称作核型模式图,它代表一个物种的核型模式。负超螺旋:指DNA双链的空间歪曲方向与其双螺旋构造中两条DNA链间的折叠方向相反。假如方向相同,则为正朝螺旋。多线染色体:染色体连续复制过程中由于复制产物未互相分别所致。比方,果蝇唾液腺染色体可连续复制10次,以致1024个拷贝平行排列。在光镜下该染色体中表现出深色、致密的染色体带,此间隔为浅色、废弛的间带。由于比一般染色体大得多且长,故又称为巨大染色体。灯刷染色体:是卵母细胞进行减数第一次分裂时逗留在双线期的染色体,他是一个二价体,包括四条染色单体,其染色体轴由染色粒轴丝构成。在每条染色体周围有很多从染色粒伸出的近似对称的侧环,而使整个染色体像一个灯刷。每个环相当于一个环状构造域。在环上正在进行着RNA的转录。随体:指位于染色体尾端的球形染色体节段,经过次缢痕地区染色体主体部分相连。它是识别染色体的重要形态特点之一,有随体的染色体称为SAT染色体。核仁周期:在细胞周期中,核仁是一种高度动向的构造,细胞进入有丝分裂时,核仁变小,在先期结束时跟着染色质凝集,核仁解体,全部RNA合成停止;在有丝分裂末期,rRNA合成从头开始,形成小的分其余前核仁体,到G1达成核仁重建。这一动向过程称为核仁周期。DNA酶I超敏感位点:指用很低浓度DnaseI办理染色质时,切割将第一发生在少量特异性位点,这样的位点即称为DNA酶I超敏感位点.它是活性染色质的特点,实质上,DNA酶I超敏感位点是一段100~200bp的DNA序列特异裸露的染色质地区.活性染色质:指拥有转录活性的染色质,其核小体构型常常变得比较废弛.便于转录调控因子与其顺式调控元件联合和RNA聚合酶在模板上滑动.限制性片段长度多态性(RFLP):指基因组中特定的或相对保守的DNA序列上,由于个体、集体或种属间DNA的差异而在限制性酶酶解时产生不一样样长度酶解片段,平常指其实不惹起表型差其余遗传多态性。在某些疾病状态下,与疾病有关基因或脆性位点上的DNA正巧与某个内切酶切点有关,此时酶切片段长度的改变,有可能用于辅助疾病诊疗或发现突变位点。种属间印迹:用Southern印迹法检测某一种属的DNA探针与来自多个种属基因组DNA杂交的活性。常染色质:是转录活跃的DNA部分,在间期细胞核中为解旋的细纤维丝,折叠盘曲度小,分别度大。常染色质含有单调解重复次序的DNA,在必定条件下可以进行复制和转录,是正常情况下常常处于功能活跃状态的染色质。异染色质:是指间期或分裂先期核内染色很深的块状构造。异染色质的DNA分子与组蛋白等亲近联合,螺旋环绕亲近,很少转录,功能上处于静止状态,是低活性的染色质。在分裂期,异染色质位于着丝粒、端粒或在染色体臂的常染色质之间。动粒:是指在主缢痕处两条染色单体的外侧表层部位的特别构造。是纺锤丝微管的连结处,是微管蛋白的组织中心之一。动粒的超微构造可分外、中、内三层。外层电子密度中等,纺锤丝微管主要与外层相连,少量微观伸入外层以内;中层的电子密度低,是一些无构造的亮区;内层电子密度高,是一些近似于染色质的颗粒状构造。核仁组织者区:是存在于细胞内特定染色体区段,常位于染色体端部的次缢痕处,含有主要rRNA基因,是产生核仁的部位。人类染色体rRNA基因家族位于5对染色体的随体内侧(13,14,15,21,22)。产生的核仁可交融形成一个大的核仁。核小体:其构造从内部向表面达包括:由四种组蛋白,每种各两个形成的组蛋白八聚体,呈圆盘状,共有146bp的DNA在组蛋白八聚体外侧环绕1.75圈,于八聚体一同构成和小体的核心克里,组蛋白H1在核心颗粒外侧与DNA在组蛋白八聚体的出入端个10bp的序列结合。很多核小体经过间隔约60bp的连结DNA构成10nm直径的串珠状纤维,是真核细胞染色质的一级构造单位。染色体与染色质:是真核细胞遗传物质在细胞周期不一样样时相的不一样样表现形态,是真核细胞中的DNA于蛋白质等成分联合形成复合体,在细胞周期大部分时期,他们存在于细胞核内,能被碱性染料着色,成为异染色质,在细胞有丝分裂时染色植被组装成一条能在光景下看到的棒状或点状物质,称为染色体。C-valusparadoxC-值悖论。C-值是指一种生物的单倍体基因组中全部DNA的含量,可以用核苷酸对总数表示。对于多细胞生物,C-值的改动范围极大,从108——1011。但某个物种C-值的大小,即单倍体基因组的大小,与该物种的分类复杂程度或进化次序没有有关性,即C-值悖论。其产生的原因在于多细胞生物各集体的基因总数差异其实不大,但基因组中各种节余的重复序列和非翻译序列的多寡确有明显差异。这些多于序列与功能无直接关系,以被看作是寄生DNA.判定位信号

此可问答题:细胞核的基本构造及主要功能细胞核主假如由核被膜、染色质、核仁及核基质构成,核被膜位于间期核的最外层,是细胞核与细胞之间的界膜。由于它的特别地点决定了他的两方面的功能:第一,核被膜构成了核、质之间的天然选择性屏障,它将细胞分红核与质两大构造与功能地区;DNA复制、RNA转录和加工在核内进行,蛋白质翻译则限制在细胞质中,这样就防范了互相搅乱,使细胞的生命活动更为次序井然,同时核被膜还可以保护核内的DNA分子面受由于细胞骨架运动所产生的机械伤害,第二,核被膜其实不是完满封闭的,核质之间有屡次的物质互换和信息沟通。这主假如经过核被膜的核孔复合体进行的。在核膜的下方连结着核纤层,核纤层为核膜与染色质供应了构造支架。染色质是指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA构成的线性复合构造,是间期细胞核遗传物质存在的形式。染色体是指细胞在有丝分裂活减数分裂过程中由染色质聚缩成的棒状构造,实质上,两者之间的差异主要其实不在于化学构成上的差异,而在于包装程度不一样样,反应了他们出于细胞周期中不一样样的功能阶段,在真核细胞的细胞周期中大部分时间是以染色质形态而存在的,染色质中的DNA分子携带着遗传信息,染色质中的蛋白质负责DNA遗传信息的组织、复制和阅读,其中组蛋白是基本构造蛋白,与DNA非特异性联合;非组蛋白是序列特异性DNA联合蛋白,是重要的基因调控蛋白,它们拥有不一样样的构造模式,形成不一样样的DNA联合蛋白家族。核仁是真核细胞间期核中最明显的构造,广泛存在三种组分:纤维中心、致密纤维组分和颗粒组分。新近比较一致的见解是纤维中心是rRNA基因存在的位点,转录主要发生纤维中心和致密纤维组分的交界处。初始rRNA的转录物第一出此刻致密纤维组分中,在那里加工;某些加工的步骤也发生在颗粒组分的地方,并负责将rRNA和核糖体蛋白装置成核糖体亚单位.所以颗粒组分代表核糖体亚单位成熟和积蓄的位点,核仁的主要功能波及核糖体的生物发生,包括rRNA合成加工和核糖体亚单位的装置.在真核细胞的核内除染色质、核膜和核仁外,还有一个以蛋白质成分为主的网架构造系统,即核基质,这一构造系统与DNA复制、基因表达和染色体包装与建立有亲近关系。综上所述:细胞核是遗传信息积蓄的场所,在核内进行基因复制、转录和转录初产物的加工,从而控制细胞的遗传与代谢或活动。2.核孔复合体的构造及其功能。核孔复合体主要有以下四种构造组分:一是胞质环,位于核孔边缘的报纸面一侧,又称外环,环上有8条短纤维对称分布伸向胞质。二是核质环,位于核孔边缘的核质面一侧,又称内环,内环构造比外环复杂,环上也对称地连有8条修长的纤维,向核内深入,并在尾端形成向来径为60nm的小环,小环由8个颗粒构成,这样整个核质环就像一个打鱼笼养的构造。三是辐,由核孔边缘伸向中心,表现辐射状八重对称。其构造较为复杂。四是拴,或称中央拴,位于核孔的中心,呈现颗粒状或棒状。由于推测它在核质互换中起必定作用,所以还把它叫做transporter。由上述可见,核孔复合体对于垂直于核膜经过核孔中心得轴呈辐射状八重对称构造,而相对于核膜平面则是不对称的,这与其在功能上的不对称性是一致的。从功能上讲,核孔复合体可看作是一种特其余跨膜运输蛋白复合体,而且是一个双功能、双向性的亲水性核质互换通道。双功能表此刻它有两种运输方式:被动运输和主动运输。双向性表此刻既介导蛋白质的入核运转,又介导RNA、核糖核蛋白颗粒的出核转运。(1)核孔复合体作为被动扩散的亲水通道,其有效直径为9~10nm,离子、小分子以及直径在10nm以下物质原则上可以自由经过。(2)核孔复合体主动运输的选择表此刻以下三个方面:a.对运输颗粒大小的限制。其有效直径的大小是可被调理的,b.经过核孔复合体的主动运输是一个信号鉴识与载体介导的过程,需耗费ATP,并表现出胞核动力学特点,c.经过核孔复合体的主动运输拥有双向性,即核输入和核输出。它既能把复制、转录、染色体建立和核糖体蛋白等运输到核内;t同时又能将翻译所需的RNA、装置好和核糖体亚单位从核内送到细胞质。3.蛋白质可以两种方式在核内积累。第一一种是被动扩散到核内并与核内组分联合;另一种是主动运输到核内。为了考证这两种和输入系统,可以设计以下实验:将带有放射性标志的核脂蛋白分别注射到蛙卵母细胞的细胞质和细胞核中,如书上的图所示。问题1.核质蛋白分子那一部分负责其在核内定位?为什么?我们从图中可以看出,负责核质蛋白定位在细胞核内的信号必定在蛋白肽链尾部序列。由于在进行胞质注射时,仅有去掉尾部的核脂蛋白不可以进入核内,而保存有尾部甚至只保存一条尾部肽段的核质蛋白都可以进入到核内。问题2.这些实验如何划分两种核质蛋白的和输入系统?是由判定位信号所指导的主动运输,还是由于被动扩散进入核内并与核内组分联合?实验表示,核质蛋白尾部带有判定位信号,而且核质蛋白在核内的积累不是被动扩散的结果。完满核质蛋白分子和拥有部分尾部的样品所获取的结果在两种注射方式中相同,这说明核质蛋白尾部带有判定位信号序列或带有核内联合位点。否认被动扩散的要点实验是仅有头部的核质蛋白的实验结果,在胞质注射的情况下,他不可以再核内积累,这其实不是由于头部缺少核内组分的联合位点,由于在进行核注射时,仅有头部的核质蛋白也能滞留在核内。4.鉴于与DNA联合的蛋白质地区,DNA联合蛋白最少可分为哪些种类?到当前为止已鉴其余DNA联合蛋白鉴于他与DNA联合地区的不一样样最少可以分为五大种类:(1)DNA联合蛋白中最大的一类是拥有折叠成螺旋-转角-螺旋域Helix-turn-helixdomain,HTHdomain)的氨基酸序列。HTH域称为同源域,而编码HTH域基因的部分称为同源框。带有同源框的基因称为同源基因,由于这些基因中发现的第一个是促使大部分动物中同源体节(昆虫的腹节)分化的。同源基因的产物被称为同源蛋白。这类蛋白质与DNA联合时,形成对成的同型二聚体构造模式。构成同型二聚体的每个单体由20个氨基酸的小肽构成a螺旋-转角-a螺旋构造,两个a螺旋互相连构造成β转角,其中,羧基端的a螺旋为鉴识螺旋,负责鉴识DNA大沟的特异碱基信息,另一个螺旋没有碱基特异性,与DNA磷酸戊糖链骨架接触。在与DNA特异联合时,以二聚体形式发挥作用,联合靠蛋白质的氨基酸侧链与特异碱基对之间形成氢键.(2)第二类DNA联合蛋白拥有一个或多个锌指构造域.每个鋅指构造域单位是在约30个氨基酸残基的一段肽链中有两对半胱氨酸或一对半胱氨酸和一对组氨酸与Zn2+形成配位键构成的.每个锌指单位是一个DNA联合构造域,由其C端形成的a螺旋负责与DNA联合.转录因子TFIIIA和SPI拥有锌指构造域;大部分类固醇激素受体拥有一个或多个锌指构造域;果蝇类固醇激素—蜕皮激素的受体是一个螺旋-鋅指蛋白.(3)第三类DNA联合蛋白拥有亮氨酸拉链,这类蛋白质是作为二聚体来起作用.在每个蛋白肽链的羧基端约有35个氨基酸残基形成a螺旋,每两圈(7个氨基酸残基)有一个亮氨酸残基,这样,在a螺旋一侧的亮氨酸残基排成一排,两个蛋白肽链的a螺旋之间靠亮氨酸残基之间的疏水作用力形成一条拉链状构造.但这类蛋白质与DNA联合的构造域不是拉链区,而是与拉链区相邻的N端带正电荷的碱性区.真核生物中启动DNA复制和激活mRNA合成的转录激活物属于这类DNA联合蛋白如,Myc、Fos和Jun。(4)第四类属于螺旋-环-螺旋构造域(helix-loop-helixmotif,HLH),这一构造模式广泛存在于动植物DNA联合中。HLH由40~50个氨基酸构成两个两性a螺旋,两个a螺旋中间被一个或几个β转角构成的环所分开。每个a螺旋由15~16个氨基酸构成,并含有几个保守的氨基酸残基。拥有疏水面和亲水面的两性a螺旋有助于二聚体的形成。A螺旋周边的肽链N端也有带正电荷的氨基酸碱性区与靶DNA大沟联合。拥有螺旋-环-螺旋构造的蛋白家族成员之间形成同源或异源二聚体是这类蛋白质与DNA联合的必要条件,缺失a螺旋的二聚体不可以坚固联合DNA。拥有这类构造模式的转录因子如哺乳类的MyoD、昆虫的AC—S等。(5)第五类拥有HMG框基序(HMG-boxmotif)。该构造拥有三个a螺旋构成boomerang-shaped框构造模式,拥有曲折DNA的能力。能经过曲折DNA、促使与周边位点相联合的其余转录因子的互相作用而激活转录,所以,拥有HMG框构造的转录因子又称为“构件因子”。SRY属于这类蛋白质。5.比较组蛋白与非组蛋白的特点及其作用。组蛋白与非组蛋白是构成染色质构造的两类中药成分,但他们拥有明显的差异,现概括以下:组蛋白非组蛋白氨基酸构成富含Arg、Lys等碱性氨基酸没有典型的特点性氨基酸构成与DNA不要求特异性核苷酸序列与特异的DNA序列相联合联合性质种类一般为五种,且高度保守拥有多样性和异质性功能主要参加维系染色质构造及较拥有多种功能,包括基因表达的调控和简单的基因调控作用染色质高级构造的形成6.在增殖的真核细胞中,对于DNA片段的增殖、保持和正确分派需要什么特其余DNA序列?任何DNA片段增殖和保持需要一个或多个复制的初步位点和特其余尾端,即端粒。复制地点起点是特其余DNA序列,在此初步DNA的复制。端粒是保护线形染色体尾端,免得被细胞内从尾端降解核酸的外切酶所降解。在细胞周期中,假如他们拥有着丝粒,DNA分子就能均匀分派进入子代细胞。所以上述三种DNA片段被称为染色体DNA的三种功能元件或三种要点序列。经过加上自主复制序列、端粒和着丝粒,任何DNA片段都可被建立成人工染色体。大量的酵母人工染色体以此方式被建立。这些人工染色体最小尺寸忧履约为100000碱基对。7.什么是端粒?在线性真核染色体尾端的RNA引物如何被DNA置换的?真核细胞染色体尾端形成一种特其余构造成为端粒。他们是由短的串联重复的核苷酸序列构成。在某些情况下,每个链的尾端被共价连结,从而保证该尾端免受外切核酸酶的降解。如原生动物四膜虫染色体尾端的重复序列是5‘TTGGGG3’。在其端粒有数百个这样的重复序列。一条链的3‘端被一个特其余酶所延长,这个延长了的尾端能自己形成氢键,所以该尾端拥有发卡构造。为了达成染色体复制,在染色体每个尾端的RNA引物被除掉而且以DNA置换。诚然,RNA引物可被外切核酸酶除掉,可是,没有任何一个正常的DNA聚合酶在没有引物存在的情况下合成DNA。有一种特别种类的DNA聚合酶成为端粒酶,它由蛋白质和一个RNA分子(由此蛋白质部分以该RNA的一段作为模版反转录为端粒的重复DNA片段)DNA聚合酶以此构成。从而延长出端粒的一条链,与此链互补的另一条链是由链为模板合成的。有一模型提出:一条链的5‘端的RNA引物被外切核酸酶消化。端粒酶通过其所含的RNA亚单位模板(3‘AAAACCCCAACUUA5’)与DNA的5‘TTGGGG3’相联合。催化加上其余的重复5‘TTGGGG3’。在某些情况下,这新合成的DNA可形成发卡构造,它可作为新的引物其作用。这个多G片段能形成非Watson-Crick碱基配对。即形成A=T和G=C之外的任何配对。填充缺口的DNA聚合酶β或DNA聚合酶ε利用发卡构造尾端的3‘-OH作为一个引物来填充端粒尾端的另一条链。8.什么是常染色质和异染色质?在DNA复制和基因表达的过程中,他们的作用是什么?异染色质是高度浓缩的染色质,除了在DNA复制过程中他被去凝集,异染色质在整个细胞周期中保持凝缩的形式。因其凝缩状态与有丝分裂染色体相像,所以,在间期可用光学显微镜观察到异染色质。处于异染色质转台的大部分基因不表达,与之相反,常染色质是去凝集染色质,它以螺旋管形式或伸展的核小体形式存在。常染色质是“真”染色质,在光学显微镜下他显现分其余颗粒状。伸展的核小体形式中的常染色质可以复制和表达,而在螺旋管形式中的却不可以。在哺乳动物中,雌性动物的细胞有两个X染色体,而雄性动物中的细胞中有一个X染色体和一个Y染色体,雌性细胞中的其中一条X染色体,一般以异染色质形式存在。高浓缩的X染色体常被称为Barr体,由于像大部分染色体那样高度浓缩,Barr体上的基因几乎不被表达。对于细胞拥有一个高浓缩X染色体,一个可能的解说是,这是为了保持雌性细胞中基因产物与雄性细胞相同的均衡状态。9.试述从DNA到染色体的包装过程。在真核细胞内,DNA与蛋白质等构成染色体的包装过程以下:由直径为2nm的DNA与组蛋白八聚体联合构成核小体,在组蛋白H1的介导下核小体互相连结形成直径约为10nm的核小体串珠构造,这是染色质包装的一级构造。可是在生活细胞中,染色质很少以这类伸展的串珠状形式存在,而以30nm的染色质纤维形式存在,称为螺旋管,螺线管是由直径10nm的核小体串珠构造螺旋环绕,形成的每圈6个核小体,外径30nm,内径10nm,螺距11nm的构造。螺线管是染色体的二级构造。对这两级构造当前已获取一致的见解。但对30nm的螺线管如何进一步包装成染色体还有不一样样建议。多极螺线模型认为:螺线管进一步螺旋化形成直径为0.4微米的圆筒状的超螺旋管,此后再进一步螺旋折叠,形成染色单体。而染色体骨架-放射环构造模型认为,螺线管进一步包装成染色体不时时形成超螺线管,而是形成DNA复制环,每18个复制环呈放射状平面排列,联合在核基质上形成微带。微带是染色体高级构造的单位,大概106个微带沿纵轴购建成子染色体。应当指出,上述两种对于染色体高级构造的组织模型诚然都有一些是语言观察的凭证,但仍处于假说阶段,还需进一步的研究。10.活性染色质的主要特点依照对活性染色质蛋白组分的生化分析发现:(1)活性染色质极罕有组蛋白H1与其联合;(2)活性染色质的4种核心组蛋白诚然以常量存在。可是与非活性染色质比较较,活性染色质上组蛋白乙酰化程度高;;(3)与非活性染色质比较,活性染色质的核小体组蛋白H2B和少被磷酸化;(4)核小体组蛋白H2A在很多物中包括果蝇和人的活性染色质中极罕有变异的形式存在;(5)HMG14和HMG17只存在于活性染色质中,与DNA联合。均匀每10个核小体中有一个核小体是与HMG14和HMG17联合的,其氨基酸序列在进化中高度保守,表示他们有重要功能。其余,活性染色质还拥有DnaseI的超敏感位点,既存在有100~700bp的DNA序列特异裸露的染色质地区,它在启动子周边,并与启动子功能有关。11.染色质构造与基因转录的关系染色质具高度有序、折叠盘曲、包装致密的构造。所以转录作用的进行需要染色质包装的“废弛”,使一套转录装置与基因的初步可以接触,而发生转录作用。所以一般来说,处于高度折叠或凝集状态的异染色质中,基因表达是不活跃的。真核生物可以经过异染色质化封闭某些基因的表达。在间期核中,伸展和废弛的常染色质部分是转录的的部位。DNaseI超敏位点的存在是活性染色质的特点之一。现已知道,超敏位点实际上是一段100~200bp的DNA序列特异裸露的染色质地区,是重要的转录调控和转录因子最可能联合的部位。或染色质的另一个特点是其DNA分子上拥有低水平的甲基化,基因的非活化状态可能是由于染色质上基因的初步位点被甲基化所造成。染色质中组蛋白八聚体的N-端都裸露在核小体之外,某些特其余氨基酸残基会发生乙酰化、甲基化、磷酸化和ADP和糖基化等修饰。这些公司修饰的意义,一是改变染色质的构造,直接影响转录活性;二是核小体表面发生改变,使其余调控蛋白易于和染色质互相接触,间接影响转录活性。一般认为,组蛋白的乙酰化作用,特别是H3和H4的乙酰化,与基因活化亲近有关;三种组蛋白,即H2A、H1和H3的磷酸化与细胞增殖有关。12.什么是着丝粒?他与动力有何差异?他们的功能是什么?着丝粒是有丝分裂或减数分裂中的染色体高度压缩的一个地区,在此纺锤体纤维与其联合,由复杂的DNA序列和特定的蛋白质共同构成了着丝粒。发育的面包酵母的着丝粒长度约为220个碱基对,而且经过多种与其余DNA联合组蛋白有明显区其余蛋白质共同保护其免受限制酶的消化。诚然着丝粒地区经过特其余蛋白质保护其免受限制性内切酶的攻击,但该地区没有核小体而且被去凝集。这忧如说了然在有丝分裂和减数分裂过程中着丝粒地区被高度讨帐原因。着丝粒的对碱基基序两侧是限制性内切核酸酶敏感位点,该位点的功能或许是促使DNA的断裂,有助于染色单体在后期的互相分别。啤酒酵母的着丝粒含有一个约120个碱基对的核心地区,它由三个地区构成:一个是在后期染色单体分别所必要的(8个碱基对长);第二个由超出90%的A=T碱基对构成,它是微管与动粒联合所必要的(约85个碱基对);第三个是微管与动粒联合所必要的。对不一样样有机体的着丝粒构造及其与微管的互相作用的分析,提示着丝粒有明显的多样性。比方裂殖酵母的着丝粒地区特别大,含有碱基对数量在40000——80000之间。这些着丝粒由大量的重复序列构成而且构成多种联合体。在核心序列周围最罕有四种不一样样的序列已经被鉴识;在有人染色体的着丝粒DNA由a卫星DNA构成,重复单位171bp,每一着丝粒串联重复2000~3000次,可达250kb至400kb;最后一个特点是啤酒酵母的着丝粒地区不可以与多细胞真核生物的微管互相作用。与有丝分裂和减数分裂着丝粒地区有关的蛋白质复合物称为动粒。动粒与纺锤体微管制联合;他们只幸好电子显微镜的帮助下才被看到。动粒的变化很大,在很多动物细胞中,动力是约2微米直径的盘状构造,这些动力有明显不一样样的三层构造,一是一个40~60nm内层与着丝粒有关蛋白接触;另一个是25~30nm的中心层,其功能不清楚;再一个是40~60nm的外层,他与微管的尾端相连。微管贯串这三层动粒盘。经过用咖啡因办理间期细胞可使动粒从染色体分别。在大部分较高级的真核生物中,有15~35个微管与一个动粒的外层相连。比方,人类动粒约与15个微管联合,而酵母的动粒置于一个微管联合。较高等植物中的动粒是球形构造,它环绕着每个染色单体的着丝粒而形成。在这些动粒中已发现一些轮廓不清的层。在很多真核生物中,由于蛋白质太罕有或在制备过程中被裂解,所以没有看到动粒。在细胞增殖时,着丝粒及其相连的动粒对于真核染色体的分布和均匀分派是必要的。动粒不不过在先期与微管联合,还在后期促使微管的解聚。该活性牵引染色单体移向两极。13.简述人工染色体的建立及其意义。酵母人工染色体是20世纪80年月后期发展起来,并于1990年关逐渐完满的大片段外源DNA克隆系统。是用拥有完满着丝粒、端粒和自主复制序列功能的DNA片段构成的人造染色体。YAC载体中除含有酵母4号染色体的着丝粒和自主复制序列成分以及来自四膜虫的可用作端粒的TEL序列之外,还有从转变酵母菌群中优选含YAC的酵母菌株时使用的选择标志URA3、TRP1和SUP4。SUP4为TrptRNA基因的一个赭石突变控制基因。在ade-2赭石突变宿主中,没有外源基因插入时,控制基因表达,受体菌为ade+,形成白色菌落;外源基因插入时,控制基因遭损坏,为ade-,形成红色菌落。URA3和TRP1为营养选择标志,分别位于YAC的左右两臂。这样只有含YAC的受体菌才可以在选择培养基上形成赭石色菌落。YAC载体上插入的外源DNA片段平常可达200~1000kb,甚至更多,并能在酵母中坚固复制,在细胞分裂和减数分裂过程中拥有与天然酵母染色体相同的坚固性。所以,YAC技术此刻已成为建立复杂基因组文库的有力手段和最好系统。YAC克隆成为基因组构造分析和基因克隆的主要资料。是非题:1.常染色质指间期核内的拥有转录活性的染色质。(X)2.核纤层蛋白纤维主假如由非组蛋白构成(X)3.常染色质的基因如重组在异染色质区周边,则基因的转录活性被控制。(V)4.染色体中核酸酶超敏感位点常位于两个核小体之间的连结DNA上。(X)在灯刷染色体中,大部分染色质形成侧环,是活跃转录的;有少量染色质在染色粒处高度聚缩,处于转录非活性状态。(X)6.要保证染色体在细胞世代中的坚固性必定拥有ARS、CEN和TEL三种要点序列。(V)四种核小体组蛋白,在进化上十分保守,没有种属及组织特异性。(V)在转录上失活的染色体地区凝集成相抗衡核酸酶的形式,成为异染色质(X)已有凭证证明,核仁FC中的染色质没有组蛋白,也不形成核小体。(V)术语题:在间期不解凝集的DNA(异染色质)在间期不解凝集的X染色体(Barr体)线性真核染色体的尾端。(端粒)在细胞分裂过程中,正确实割所需的真核染色体上的位点。(着丝粒)保持和达成真核染色体尾端所需的酶。(端粒酶)真核染色体复制初步位点(自主复制序列)用于描绘着丝粒在一个尾端的染色体的形容词。(端着丝粒)以螺旋-转角-螺旋域与DNA联合的和决定一个动物节片特点的DNA联合蛋白质(同源染色体)编码某些DNA联合蛋白质螺旋-转角-螺旋域的DNA。(同源框)1[提示]选择题1.真核细胞和原核细胞的最主要差异是A.真核细胞拥有完满的细胞核B.原核细胞无核糖体C.质膜构造不一样样D.细胞形状不一样样E.蛋白质合成速度不一样样2.细胞内的生命控制中心是A.内质网B.高尔基复合体C.溶酶体D.细胞核E.线粒体3.核被膜上由内外核膜局部交融形成的构造称A.核空隙B.核纤层C.核孔D.核基质E.骨架网络4.以下何种构造可介导细胞核内外的物质转运A.核仁B.外核膜C.核孔D.核基质E.核空隙5.核蛋白中的判定位信号平常富含A.赖氨酸、精氨酸B.赖氨酸、甘氨酸C.组氨酸、赖氨酸D.精氨酸、组氨酸E.精氨酸、甘氨酸6.RNA经核孔复合体输出至细胞质是一种A.被动转运B.主动转运C.易化扩散D.简单扩散E.共同运输7.构成内核膜下纤维状蛋白网的成分属于A.胶原蛋白B.弹性蛋白C.角蛋白D.肌动蛋白E.核纤层蛋白8.为染色质供应核周锚定部位的构造是A.核孔复合体B.核仁C.外核膜D.核纤层E.内核膜9.对于组蛋白的错误表达是.是构成染色质的主要蛋白成分.属于碱性蛋白.均拥有种属和组织特异性.是一类进化上保守的蛋白质.是真核细胞特有的蛋白质10.参加30nm染色质纤维形成的组蛋白是.H2AB.H2BC.H3D.H4E.H1不是非组蛋白(染色体蛋白)的功能之一是A.启动DNA的复制B.辅助形成30nm染色质纤维C.作为基因表达的调控因子D.构成核小体E.使染色质浓缩形成染色体12.依照螺旋构造模型,由DNA到染色单体的折叠使DNA长度压缩了A.1000倍B.100倍C.10000倍D.40倍E.5倍13.间期核内转录活跃的DNA称为.常染色质.异染色质.核仁相随染色质.核仁内染色质.兼性异染色质14.位于主缢痕两条姐妹染色单体相连处中心部位的构造是A.动粒B.着丝粒C.端粒D.中心粒E.随体15.染色体中拥有防范染色体尾端粘着作用的特化部位称为A.主缢痕B.次缢痕C.动粒D.端粒E.着丝粒16.核基质的基本形态与以下哪一种细胞构造相像?.染色质.染色体.细胞骨架.核纤层E.核仁17.光镜下细胞中均质、无包膜的球形小体称为.核仁B.染色体.核小体.随体.连结小体18.rRNA的合成发生于.核基质.核仁.核空隙.核仁基质.核纤层19.核仁中的原纤维成分主要含有.rRNAB.组蛋白.mRNAD.核糖体前体E.rDNA20.有丝分裂时,核仁的从头出现发生于A.先期B.前中期C.中期D.后期E.末期间期核的基本构造中不包括以下哪项核被膜核仁C.染色质47.能被RNA聚合酶鉴识并联合的特异性DNA序列内含子外显子停止子48.在基因表达调控中最重要的控制点平常位于转录水平B.RNA加工水平C.翻译水平D.mRNA降解水平蛋白质活性水平49.构造基出处以下哪几部分构成外显子和内含子启动子以上都对50.对于真核细胞来说,迄今为止研究的较为清楚的转录基因是A.TFIIDB.TFIIBC.TFIIED.TFIIS以上都对51.组蛋白的合成是在:A.G1期B.G2期C.S期D.M期E.G0期52.核仁中的核酸部分主假如A.DNA及转录产物B.mRNAC.rDNA及转录产物D.5SrRNAE.45SrRNA53.以下不属于

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