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文档简介
实习四、标本的采集、
制作与保存湖南农业大学彭晓英一、实习目的
1、学会植物标本的采集方法;2、学会各类植物标本的制作方法;3、学会植物标本的保存方法。二、实习内容1、植物标本的采集;2、各类植物标本的制作;3、植物标本的保存。四、实习用品望远镜、照相机、调温电熨斗、干燥箱、真空泵、真空干燥器、海拔仪、指南针;采集袋(箱)、标本夹和尼龙绳、小镐和小掘铲、枝剪和高枝剪、剪刀、放大镜、浮游植物采集网、护腿和蛇药、细砂、透明胶带、白鸡毛、乒乓球、木条;大培养皿、大广口瓶、标本缸、玻璃片、玻璃;吸水纸、记录本和铅笔、标本号牌、台纸、盖纸、玻璃纸、马粪纸、纸浆、白板纸、透明胶纸;树胶;浓盐酸、硼酸、亚硫酸、氢氧化钠、氢氧化钾、氯化汞、食盐、氯化锌、硫酸铜、碳酸钠;甘油、福尔马林、酒精、石蜡、松香、乙醚、丙酮;曙红、龙胆紫、颜料、油漆;硅胶、开水、蒸馏水等。五、方法步骤(一)植物标本的采集(二)植物标本的制作(三)植物标本的保存(一)植物标本的采集
1、采集标本应该携带的工具(1)采集袋(箱):用来装载采集的标本和各种小型采集工具。(2)标本夹和尼龙绳:供采集和压制标本用。(3)吸水纸:用于压制标本,吸收植物体内的水分。(4)小镐和小掘铲:用于挖掘深根、球茎和石缝中的草本植物和小灌木等。(5)枝剪和高枝剪:用来剪断木本或有刺的植物。(6)放大镜:用于观察植物体各部分的形态。(7)浮游植物采集网:用于采集浮游藻类。(8)记录本和铅笔:用于记载标本的种名、土名,采集地点、生态、高度、花色和采集日期等。(9)标本号牌:挂在标本上,写上编号,以防日后忘记和搞错。(10)护腿和蛇药:防止刺伤和蛇咬。(11)望远镜:用于了望远处的植物和地形。(12)照相机:用于拍摄植物的生态环境和它们的生活容貌。(13)海拔仪:用于了解采集地点的海拔高度。(14)指南针:用于指示方向,避免迷路。2、采集的一般方法(1)把握时节,适时采集:(2)采集地点宜先近后远(3)植物标本要力求完整(4)标本大小要长宽适度:“一般采集的植物多制作腊叶标本,而蜡叶标本所用的台纸通常是八开的白板纸,因此采集的植物标本的大小不要超过台纸的尺寸。如果遇到比较高大的草本植物,可以把它叠成“N”字形或“W”字形压制。对于高大的草本植物,可选择同一植株形态上有代表性的上、中、下三段进行压制。(5)编号登记要及时、认真:“每采集到一种植物都要在中部套上个号签。号签用硬纸制成,上面只写编号。如果是雌雄异株植物,应该分别编号,并注明两者的特殊关系。标本编号以后,应该立即在标本记录册上记录。标本记录册的项目见下表。(6)外出采集的注意事项①到果园、苗圃、菜园去采集植物,先要征得其主人同意,以免引起误会。②到山林去采集植物,要注意防火,不能在林中吸烟和点火。同时要爱护自然资源,不可乱折滥采,对珍稀植物一定要“手下留情”,保护其种群。③上山过河,要注意安全,不要乱采食野果,以免误食中毒。③换纸:压制标本的纸最好用吸水纸(如果没有,用旧报纸也可),叠成四开大小后即可使用。将整理好的标本平摊在纸上,盖上几张。将整理好的标本平摊在纸上,盖上几张吸水纸,纸上再平摊植物标本,这样一层层叠起来,夹在标本夹里,标本夹用绳加压捆紧,使吸水纸吸干植株里的水分。开始每天换纸两次,以后逐渐减少次数,共换6-7次即可。换纸越勤,干得越快,越能保持原色。反之,会使标本发霉变黑脱落。换下的纸及时晒干或烘干后,以备下次换用。如果标本的嫩叶嫩茎能折断,就说明植株已干透了。
⑤上台纸:腊叶标本都要上台纸。台纸是一种厚而致密的白板纸,通常将整张白板纸裁成8开(38*27cm)即可。标签大小为8*6cm,上面标明科名、种名、学名、采集地、日期、采集人等几项,文字最好是打印或铅印。标本装帧时要注意将标本合理地安置在台纸上,一是标本形态要自然;二是摆布要科学,有的植株要摆正(如带枝叶花果的标本),有的则要偏斜(如缠绕植物等),若是比较标本,还要使各类根都能下垂;三要突出植物的特点,如蕨类植物,除选择根、茎(根状茎)、叶外,必须翻转1-2片蕨叶,突出完整的孢子囊群的特点;四是布局要美观,不能将台纸摆得满满的,要空实互补,讲究一点空白美,才能产生轻松感的效果。
标本定位后,右下角要空出贴标签的地方。木本植物固定宜用白线缝,先从根茎下部开始,正面针迹要与茎垂直。草本植物固定可选择薄而韧的道林纸,将其切成0.5cm宽、3cm长的小条。将标本在台纸上摆好位置后,用铅笔在需要固定的位置划上线,然后拿下标本,用小尖刀在适当位置切出数对小纵口,将白纸条从切口部位穿入,再用手从背后捏住纸条的两端,轻轻拉紧,然后用胶水粘在台纸的背面。有些植物有纤细的花,易折掉的果、易散落的孢子等,则可用一小块玻璃纸做局部粘封保护。附属的树皮、种子也可用乳胶粘贴或玻璃纸封贴。⑥为了保护标本,还可以在标本正面刷一薄层清漆,使标本色泽新鲜、富有生气,并能起到加固作用。为防止标本磨损,应该在台纸上面贴上盖纸,若是柔软纤细的植物(如藻类等),则可蒙上一层玻璃纸,这样一份腊叶标本就算完成了。(2)电熨制作法
如果遇上阴雨天气,为防止所采回的标本霉变,可采用此法来处理标本。①工具和用品:调温电熨斗一个,剪刀,吸水纸,透明胶纸,台纸,标签等。②制作方法:整形和清洗:首先将标本按需要剪成适当的尺寸,用湿布抹干净脏物。适当剪去一些过密花叶(要留少量的叶柄、花梗,以便显示植物原来的形态),仅留下典型的枝叶。若果实较大,则摘下另做处理。熨烫脱水:将经过整形的标本平放在旧报纸上,上面覆盖一层吸水纸,熨斗通电加热(60-100℃)后,在吸水纸上来回运动,就像平常烫衣服一样。如果叶片有褶皱,可翻过来再熨,待干燥、冷却后叶就平展美观了。烫熨时间要根据植株体内的含水量而定,一般在5-15分钟即可。像洋葱、马铃薯等,宜切成0.5-1cm厚的薄片,烫干脱水后,用胶水粘在台纸上,然后将它们的植株“移居”其旁。这样,一件标本的主要器官(根、茎、叶、花、果实、种子)都俱全了。③电熨制作法的优点:不受气候条件的限制,能及时方便的处理标本;因是高温杀青,所以保色能力比腊叶标本强,更有“真实感”;不需要经常定时换纸和绑压,减少程序,还可避免损坏柔软的植物;操作简单、迅速。(2)各种浸制方法①绿色标本浸渍法各种绿色果实、绿色枝条和幼苗应该用此法。具体做法:将硫酸铜20克、浓盐酸2-3滴溶解在100毫升水中,将植物放入,加热至95℃左右。半小时后,植物由绿变黄褐,又由黄褐变绿。取出后,在清水中洗净,放入5%福尔马林中保存。体积较大的果实不宜用加热处理,可直接将其放入硫酸铜福尔马林混合液(用硫酸铜饱和水溶液700毫升、35:40%浓福尔马林50毫升和水250毫升配成)10-20天,取出标本后,用清水充分洗净,再浸入5%福尔马林水溶液保存。②红色标本浸渍法樱桃、辣椒、番茄等红色果实可用此法。具体做法:将4毫升甲醛原液和3克硼酸溶解在400毫升清水中,配成处理液;再取20毫升10%亚硫酸和10克硼酸溶解在500毫升清水中,配成保存液。将洗净的果实浸入处理液中,直到果实由红色变成深褐色。取出果实,用注射器注入少量保存液于果实内,防止果实内部腐烂。注射后,将果实浸入保存液中,果实即会逐渐恢复红色。③紫色果实浸渍法紫色的葡萄、茄子等采用此法。保存液:将40%福尔马林50毫升、10%食盐水溶液100毫升和870毫升水混合搅拌,沉淀,过滤后制成。先用注射器往标本里注射少量保存液,再把标本直接放入保存液里保存。④黄绿色标本保存法各种黄绿色果实即可采用此法。具体做法:先将洗净的果实浸入5%硫酸铜溶液1-2天后,取出果实,在果实周围用注射器注入少量保存液(在30毫升6%亚硫酸、30毫升甘油和30毫升95%酒精的混合液中加入900毫升水)。将注射过保存液的果实浸入保存液即可。⑤白色标本浸渍法将22.5g氯化锌放入680ml水中,搅动,待全部溶解后,加入80-90%酒精90ml,澄清后保存标本。⑥黑色标本的浸渍法用福尔马林45ml,酒精280ml,蒸馏水2000ml混合,待澄清后保存标本。⑦透明标本的浸制法材料:天竺葵花一盆,95%酒精,KOH,曙红,甘油,甲醛,标本瓶等。方法:取材:剪取数条长10cm左右的天竺葵茎(也可带2个叶片),用清水洗净。处理:将洗净的天竺葵嫩茎浸入95%的酒精内3天。剥皮:用解剖刀轻轻除去浸过的嫩茎表皮。除去叶绿素:将去掉表皮的嫩茎放入装有酒精的烧杯里,隔水加热,使叶绿素溶解在酒精里。腐蚀:将除去叶绿素的嫩茎放入5%的氢氧化钾溶液中10-20天,即成半透明状态。着色:为使茎内维管束更加清楚可见,可对嫩茎进行着色。为此,把嫩茎浸入用酒精配成的0.05%的曙红溶液中3天。脱色:把已着色的嫩茎浸入5%氢氧化钾溶液中2天,然后取出再浸入配制的5%的氢氧化钾、4%甘油和4%甲醛混合液中约10天左右。保存:将脱色的嫩茎取出,用清水冲洗干净,浸入装有纯甘油的标本瓶内密封保存。4、玻片标本(1)采集微小植物
根瘤菌要在开花期的豆科植物根上去采集,硫细菌则到矿泉或散布着硫化氢气味的水中的灰色粘团中寻找,铁细菌常集中在河沼水面上的棕色絮状物或水底棕色丝状物之中。(2)玻片标本制作
①微小植物装片材料先在70%酒精中脱水2小时,再放入85%的酒精中2小时和95%酒精中1小时,取出风干一会即可封片。封片胶最好用加拿大树胶。②微生物涂片将新的载玻片和盖玻片用纱布蘸酒精擦干净,将微生物涂布在载玻片的中央,自然干燥后,在酒精灯火焰上过几次以利于固定。如果制细菌装片,则用1%龙胆紫溶液染色10分钟,清水洗去浮色,立在盒内,待自然干燥后封片。③组织解离装片将植物的导管、筛管、木纤维和叶上的气孔先用酒精(95%)与浓盐酸混合液(1:1)浸泡5-10分钟,水洗、染色、洗去浮色后,制成装片。上述三种玻片标本都要贴上标签,写上标本名和制作人,并将标签贴在玻片右端,使显微镜中物像与文字一致。
(3)石蜡永久装片制作石蜡切片法是用石蜡作为包埋剂的一种显微制片方法,是显微技术中最重要最常用的方法之一。它的优点是能够切成薄而均匀的连续切片,便于进行器官的三维重构。此法多用手摇切片机切片。对于较硬的材料,也可以使用滑走切片机。石蜡切片法的操作程序包括:取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、修块、切片、粘片、染色和封片。5、干装标本(1)哪些植物适宜作干装标本各种植物的种子和干果、植物器官的比较(如直根系、须根系等)和某些植物(如地衣、灵芝等)的全株标本都宜作干装标本。(2)干装标本的选择和加工对种子和果实标本,要精选有典型性状、无病虫、大而饱满的种子和果实;对于果穗及全株标本,除注重特点外,尽量选择小而成熟的个体。若是高茎植物,要折成“N”字形。为防止果穗落粒,可在上面涂少许清漆或乳胶。(3)化石标本的采集采集化石标本一般在砂岩、页岩、石灰岩、砾岩中可能采集到化石标本。其次,在河床、冲沟内,由于流水的作用,剥蚀速度较快,岩石出露好,也常可以采集到大量的化石。(4)标本的封存①木底玻璃盒标本盒的大小和高度依标本而定。里面裱上墨绿色绒纸则用来装浅色标本。将标本和标签一一摆好,用乳胶粘牢,最后在盒内四角置樟脑丸,以防虫蛀。②瓶装干制标本用种子瓶或无色透明的小药瓶装种子或干果,将瓶口封严即可。③试管干制标本用试管装干果、果穗、苔藓等,试管口塞上软木塞或棉花,将标签装入试管内即可。6、立体标本
立体标本有两个优点:(1)标本脱水后便于保存;(2)能保持标本新鲜时的立体形态,便于教学和展览。其制作方法有两种:(1)细砂埋藏法将采集的植株(要选用叶有革质或含水较少的植物)进行修剪,小心地将其根或茎插入盒内固定,放入干燥、洁净的细砂(盒底的小孔堵住),使整个植株都埋在砂中,然后放在阳光下或火炉旁,大而多汁的标本一般需7-8天,小标本只需1-2天。然后将盒底的小孔打开,让砂自然流出,再用软毛笔将材料上的细砂刷去,为防止花瓣脱落,可在花的下部涂上胶水。最后将标本直立并固定在木座上,装入倒立的大广口瓶内或玻璃钟罩内即可。(2)硅胶埋藏法事先准备好干燥箱、真空泵、真空干燥器和硅胶等。制作标本时,将干燥箱温度控制在41-42℃。在真空干燥器的底部铺上3cm厚的硅胶(硅胶事先要粉碎成小米粒大小),将新鲜植物标本立在真空干燥器里,把事先准备好的硅胶慢慢倒入,边倒边用镊子整理植物,尽量保持原形。等到硅胶把整个植株掩埋后,在真空干燥器边缘涂上凡士林,盖好盖子。再把真空干燥器放入事先调好温度的干燥箱内,并将真空干燥器内的空气抽完(约3小时),干燥器保持约4-5小时后,切断电源,待干燥器内温度下降到室温后,把真空干燥器的阀门打开,慢慢将标本取出,并用喷雾器喷洒5%的石蜡甘油溶液。制好的标本放入体积相当的玻璃瓶内保存,并在玻璃瓶内放入少量硅胶。(3)生态景箱①材料:木条、玻璃、马粪纸、纸浆、白板纸、藜、蒿、圆柏枝、白鸡毛、颜料、油漆等。②制作方法:制木框:外框尺寸为70*40cm,边宽3cm,厚10cm。镶玻璃:先在玻璃内面四边用浅灰漆涂上宽6cm的边,再安放到木箱槽口内。从后面把玻璃与木框间的缝隙用纸条糊好,再加小木条将玻璃固定住。设计景观,分解层次:森林生态系统可分为远景(天空和远山)、中景(山冈)、近景1(山坡上的林木)和近景2(树干和枝头)等几个景片。用颜料在马粪纸上绘出天空、白云、远山等辽阔的远景。中景片用白板纸绘画,山头林木虚虚实实,适当镂空,制作中近景山坡是在马粪纸上粘加塑料、纸浆和染色的锯末,树林则用藜、蒿等细枝染色后粘住。注意留点林间空地,使景色显得开阔、深邃。近景中的树干等用圆柏枝代替。组装:先将远景底片平放好。中景片后加2cm厚木条,粘在底片上。中近景片后加4cm厚木条,粘在底片上。近景树木直接用纸浆、胶水等固定在木框上。最后将它们合在一起,用图钉把马粪纸按在木框上,周围间隙用纸条糊好,防止灰尘进入。(三)植物标本的保存1、干制标本
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