HPLC法测定小儿酚氨咖敏颗粒中对乙酰氨基酚含量

HPLC法测定小儿酚氨咖敏颗粒中对乙酰氨基酚含量〔〕:

摘要：目的建立高效液相色谱法测定小儿酚氨咖敏颗粒中对乙酰氨基酚的含量。方法采用高效液相色谱法。色谱柱：DiamonsilC18〔250x4.6mm,5m〕；流动相：1%醋酸溶液〔用二乙胺调pH至3.7〕甲醇〔60：40〕；流速：1.0mL-min-1；检测波长：257nm。结果对乙酰氨基酚在8~120g-mL-1浓度范围内线性关系良好，相关系数r=0.9998。结论该方法简便、准确、重现性好，适于小儿酚氨咖敏颗粒中对乙酰氨基酚含量测定。

关键词：高效液相色谱法；含量；小儿酚氨咖敏颗粒；对乙酰氨基酚

本文引用格式：高翔,王涛,贾首前,等.HPLC法测定小儿酚氨咖敏颗粒中对乙酰氨基酚含量[J].世界最新医学信息文摘,2022,19(78):266,276.

0引言

小儿酚氨咖敏颗粒是如今市场上常见的用于儿童的药物，每袋含对乙酰氨基酚63mg,咖啡因15mg,马来酸氯苯那敏1mg，氨基比林50mg。国家药品标准【1】WS-10001-(HD-1107)-2022给出了氨基比林、咖啡因、马来酸氯苯那敏含量测定的测定标准，但对其另一主要成分，对乙酰氨基酚的含量、限度和测定方法没有规定。为了更好的控制其质量，本文以高效液相色谱法测定小儿酚氨咖敏颗粒中对乙酰氨基酚含量，结合中国药典以及参考相关文献[2-3],建立了小儿酚氨咖敏颗粒中对乙酰氨基酚含量的高效液相色谱法，方法学结果说明：本方法简便易行，精细度高，重现性好，具有很好的可行性。

1仪器与试药

1.1仪器

美国Waters公司高效液相色谱仪〔AllianceE2695色谱系统，2489紫外检测器，Empower工作站〕瑞士梅特勒公司ME204型，XPE105型全自动电子分析天平，昆山超声仪器KQ-500DE型，超声波清洗器。

1.2试药

试药：对乙酰氨基酚对照品〔中国药品生物制品检定研究院〕批号100018-202208，小儿酚氨咖敏颗粒〔金花企业〔集团〕股份西安金花制药厂〕〔批号171213〕。

试剂：冰醋酸〔国药集团化学试剂，批号：20220425〕分析纯，二乙胺〔国药集团化学试剂，批号：20221031〕分析纯，甲醇〔默克公司，批号：1837107.623〕色谱纯，水为18.3Mu;Omega;-CM的超纯水。

2方法与结

2.1色谱条件

色谱柱：DiamonsilC18〔250x4.6mm,5m〕；流动相：1%醋酸溶液〔用二乙胺调pH至3.7〕甲醇〔60：40〕；柱温：30℃;流速：1.0mL-min-1；检测波长：257nm；进样量：20l。

2.2溶液的配制

对照品溶液：精细称取对乙酰氨基酚对照品40.02mg，置于到100mL容量瓶中，加适量的流动相，彻底摇匀使对乙酰氨基酚完全溶解，用流动相稀释至刻度，制成约400g/mL〔400.2g/mL〕的溶液，制成对照品储藏液；精细量取5mL上述对照品储藏液，置50mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。

供试品溶液：取本品10袋，研细，精细称取细粉0.8028g〔约相当于对乙酰氨基酚10mg〕，置50mL容量瓶中，参加适量的流动相，超声15min，使样品完全溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精细移取5mL续滤液,置25mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.3专属性试验

精细量取阴性对照溶液、对照品溶液和供试品溶液按上述2.1色谱条件分别进展测定，结果见图1.结果说明：供试品溶液在与对乙酰氨基酚对照品溶液保存时间一致处有相应的色谱峰；阴性对照溶液在与对乙酰氨基酚对照品溶液保存时间一致处无相应的色谱峰。本方法的专属性良好。

2.4线性关系试验

准确量取上述2.2中对照品储藏液1.0mL、3.0mL、5.0mL、10.0mL和15.0mL，分别置50mL容量瓶中，参加流动相稀释至刻度，摇匀即得浓度分别为8.004g/mL、24.012g/mL、40.02g/mL、80.04g/mL和120.06g/mL的系列对照品溶液。分别在2.1色谱条件下测定，记录色谱图，以浓度X〔g/mL〕为横坐标，以峰面积积分值Y为纵坐标，进展线性回归，得回归方程为Y=63602X-22557,r=0.9998。结果说明对乙酰氨基酚在8.004~120.06g-mL-1范围内线性关系良好。

2.5检测限和定量限试验

取线性关系试验项下对乙酰基酚浓度为40.02g/mL的对照品溶液，用流动相逐步稀释，以上述2.1色谱条件进展进样，记录色谱图，按信噪比为3:1时的对照品浓度为检测限,结果得对乙酰氨基酚检测线浓度为0.002g/mL；以信噪比为10:1时的对照品浓度为定量限，结果得对乙酰氨基酚定量限浓度为0.010g/mL。

2.6重复性试验

取批号为171213的样品按2.2.2项下供试品溶液制备方法平行制备6份样品溶液。按上述2.1色谱条件测定，结果6份样品中对乙酰氨基酚含量平均值为63.33mg/袋，RSD为0.77%。

2.7精细度实验

精细汲取上述2.2中对照品储藏液5mL,置50mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，，按照上述2.1色谱条件重复测定6次，测定其峰面积积分值的RSD值为0.1%。结果说明，本方法精细度良好。

2.8含量测定

取批号为171213的样品，按2.2.2项下供试品溶液制备方法制备样品，按"2.1";项下色谱条件进展测定，结果测定的平均含量为100.3%。

3讨论

3.1溶剂的选择

在挑选含量测定的流动相以及溶剂时有从以下几个方面考虑，首先本品为多组分药品，成分较多需要考虑该方法中其他成分对对乙酰基酚的峰面积有无影响；其次需要考虑选择的溶剂是否能使对乙酰氨基酚完全溶解；最后还需要考虑对乙酰基酚与其他几种成分的别离度是否良好，综上考虑故挑选用：1%醋酸溶液〔用二乙胺调节PH值为3.7〕甲醇〔60：40〕为流动相及溶剂。

3.2方法学评价

本文是以高效液相法测定小儿酚氨咖敏颗粒中对乙酰氨基酚的含量，经过试验方法学的考察，在本文选定的色谱条件下，小儿酚氨咖敏颗粒中对乙酰氨基酚与其它成分别离度良好，对乙酰氨基酚在8~120g-mL-1浓度范围内线性关系良好，相关系数r=0.9998。本方法可以方便准确的测出对乙酰氨基酚的含量，且本方法简便易行，精细度高，重现性好，可以很好的控制产品质量，具有很好的可行性。

参考文献

【1】国家药品监视管理局国家药品标准(化学药品地方标准上升