螺旋藻激酶提取物对血栓形成的影响

螺旋藻激酶提与物对血栓构成的影响

陈下斯李小花庞辉贾晓栋秦小茹罗冬覃颖脱李运祸

【关键词】螺旋藻激酶；抗凝血；血栓构成

【Keyrds】Spirulinakinase；Antiagulatin;Thrbusfratin

血栓性徐病是临床的常睹并多病收，由血栓惹起的心脑血管徐病，如慢性心肌梗逝世、脑卒中等宽峻天风险人们的安康，抑制血栓的构成对防治心脑血管徐病具有慌张意义。从炊事成分中根究战开拓抗血栓战溶血栓的物量具有广泛的有效价格。螺旋藻(SP)是一种蓝藻门颤藻科火逝世植物，广泛分布于中国广西、祸建、云北、海北等省区，真止证明它有抗氧化、抗衰老、抗毁伤、抗辐射、降血脂、增进卵黑分解、前进免疫等成效，它如古曾经开拓出具有多种成效的天然绿色保健品〔1〕。而做者初度把SP经过收酵处理后获得一种卵黑激酶，并将其命名为螺旋藻激酶(SPK)。经初步没有俗观察它具有抗凝溶栓做用，为此本研讨主要操纵SPK提与液从体内、体中两个圆里去没有俗观察SPK对血栓构成的影响，现报导以下。

1材料与要收

1.1材料

SPK提与物的制备：SPK粉由北海市康祸保健食物供应，经广西测试中心检测其卵黑激酶露量为6000FU(逝世机单位)/g,按照10g粉剂溶于100l逝世理盐火的比例混匀，于-4℃冰箱摆设过夜后，以3000r/in离心10in，弃去沉淀，上浑液即为SPK溶液。SPK干粉剂混悬液的制备：起尾参考文献〔2〕，制备1%的羧甲基纤维素钠溶液200l，再参与5gSPK粉剂，混匀后备用，浓度为2.5%。

1.2植物

选用成年新西兰年夜黑兔1只，量量2.5kg；老年istar年夜鼠，24月龄，雌雄没有拘，体重400～500g；老年昆明种小黑鼠，11月龄，雌雄没有拘，体重(30±2)g，以上植物由广西医科年夜教真动做物中心供应。植物开格证号桂动许字(2000)第001号。

1.3主要试剂及仪器

1.4要收

与塑料试管60收，分为SPK下浓度(SPK提与物本液组)、低浓度组(SPK本液与逝世理盐火1∶49稀释)及逝世理盐火阳性比力组，每组20收，分别参与0.5l对应溶液。与家兔，20%氨基甲酸乙酯5l/kg耳缘静脉麻醒，颈动脉插管与血，正在上述每一个试管中分别参与偶异血1l，混匀后置于37℃火浴，每隔30s将试管倾正1次，曲至将试管颠倒血液没有举动为止。启动秒表纪录血液凝固工夫〔3〕。

与年夜鼠24只，随机分为3组，每组8只，给药组分红SPK下(本液)、低剂量组(与逝世理盐火按1∶4稀释)及逝世理盐火阳性比力组。年夜鼠以20%氨基甲酸乙酯0.5l/100g背腔麻醒，由舌静脉〔4〕5l/100g推药，先推半量，30in后参照文献〔3〕构成静脉血栓模型，即于正中切开背壁，别离下腔静脉，于左肾静脉下圆以丝线结扎下腔静脉并缝开背壁。结扎后1h再由舌静脉注进此中半量。30in后从头开背，正在结扎线下圆2处夹住下腔静脉，并夹闭其他分收，纵止剪开管腔，吸净该静脉段内残血，悄悄与出血栓并称重。干血栓于枯燥器内枯燥，称重，并策画血栓干重与干重抑制率。

凝血工夫(T)的测定采与毛细管法，出血工夫(BT)测定采与剪尾法〔3〕。T的测定：昆明种小鼠24只，随机分为SPK下剂量、低剂量及逝世理盐火比力组3组，每组8只，下剂量组SPK混悬液60fU/g，0.4l/10g，低剂量组SPK混悬液30fU/g，0.4l/10g，逝世理盐火比力组为0.4l/10g，灌胃给药5d，终了一次灌胃1h后，于终次灌胃给药后30in将毛细管(内径1，少10)插人小鼠眼内眦球后静脉丛，自血液流进初步计时，注谦后与出仄放于桌里上，每隔30s开断毛细管中间约0.5，并痴钝背左右推开，曲至凝血丝呈现为止，所经历的工夫即为凝血工夫。BT测定：植物分组与给药与凝血工夫测定一样，各组小鼠连续灌胃5d后，于终次给药30in后，将小鼠结真，以毫米尺测量间隔鼠尾尖5处并标识表记标帜之，然后分别用利剪于标识表记标帜处横断，待血液自止溢出初步计时，每隔30s用滤纸吸与血滴1次，曲至血液自止防止(滤纸吸时无血)为止，即为出血工夫〔3〕。

2结果

2.1SPK的体中抗凝做用

SPK低剂量组凝血工夫(19.93±3.62)in隐着延少(P＜0.01)，较逝世理盐火组(9.35±2.67)in前进113.2%，SPK下剂量组没有俗观察3h均已凝固。

2.2SPK对年夜鼠下腔静脉血栓构成的影响

SPK可抑制年夜鼠真止性静脉血栓构成，使干重及干重隐着减沉(P＜0.01)，且呈量效依托关连。睹表1。表1SPK对年夜鼠真止性静脉血栓的抑制做用(略)

2.3SPK对小鼠T、BT的影响

下剂量SPK可以延少小鼠的T(P＜0.01)，下、低剂量都可隐着延少小鼠的BT(P＜0.01)，呈剂量依托关连。睹表2。表2SPK溶液对小鼠T、BT的影响(略)3会商

远年去，心脑血管徐病特别是血栓性徐病正在老年人中的病收率逐年上降，曾经成为我国逝世齿逝世亡的尾位去由本由，惹起医教界的广泛重视，而远几年研讨及临床实际说明，抗血栓药物的操纵正在抗御心脑血管徐病的圆里起到了关键的做用〔4，5〕，但其没有良反响也日趋惹起了人们的重视,如出血、过敏反响等，果而，根究战开拓新型溶栓剂及抗凝药物借是心脑血管徐病医治的慌张内容。SP是一种古陆天逝世物，有35亿年的逝世少历史，属于微藻类植物，它以其极下的养分价格、多圆里的医疗保健做用及安好无毒的优点，获得全国列国广泛认可，被全国卫逝世机关认定为“人类21世纪的最好保健品〞〔1〕，对SP及其成分的研讨曾经成为医教及食物界的热点话题，远景非常广年夜。SPK是SP经液态收酵提与的一种卵黑量，其干粉剂已经过广西阐收测试研讨中心用分光光度法检测其活性单位6000fU/g。而一种由Sui便是1987年头度报导,由纳豆(Natt)收酵收逝世的纳豆激酶(Nattkinase，NK)也存正在着类似做用，20多年去，国内中专家教者对纳豆激酶的规划、抗凝战溶栓做用和做用机制做了年夜量的研讨，获得了较着的结果〔6〕。为本研讨对SPK的研讨供应了参考，并且所消费SPK的本钱比NK低很多。真止结果说明：SPK可以延缓血液的凝固，且跟着剂量的删减以致防止血液的凝固；SPK静脉给药可减缓下腔静脉血栓构成；S