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文档简介

Glucoamylase

1淀粉酶酶作用键产物α-淀粉酶α-1,4-糖苷键(内切)糊精和还原糖(α构型)β-淀粉酶α-1,4-糖苷键(外切)麦芽糖(β构型)葡萄糖淀粉酶α-1,4-糖苷键α-1,6-糖苷键α-1,3-糖苷键葡萄糖(β构型)普鲁兰酶α-1,6-糖苷键直链淀粉异淀粉酶α-1,6-糖苷键直链淀粉2葡萄糖淀粉酶——GA系统命名及别名α-1,4-葡萄糖苷酶糖化酶γ-淀粉酶淀粉葡糖糖苷酶主要来源黑曲霉(A.niger)泡盛曲霉(A.awamori)米根酶(Rhizopusoryzae)臭曲霉(A.foetidus)作用机制快速水解α-1,4-糖苷键缓慢水解α-1,6-糖苷键和α-1,3-糖苷键将淀粉水解成β-葡萄糖应用领域轻工、食品、医药、发酵等行业3催化域连接域结合域基本结构三个功能区O-GlycosylatedLinker4基本结构黑曲霉糖化酶GAⅡGAⅠ催化域CDO-糖基化域淀粉结合域SBD限制性水解不含淀粉结合域SBD,少数甚至不含O-糖基化域5催化域CD结构含13股α-螺旋,折叠成桶状(α/α)6结构,桶的核心为一个口袋状,催化中心位于其中6催化机制酸碱催化7连接域结构起连接CD和SBD的作用,一般被O-糖基化修饰不同真菌来源的糖化酶该区域的氨基酸序列可变性较大在生物活性条件下,甘露糖比半乳糖更容易以O-方式连接到连接域的Ser和Thr残基上8连接域结构与功能的关系GAGpI:增加了一段重复的O-糖基化连接域2个重组蛋白酶GAΔ470-493:缺少O-糖基化连接域中Ala470-Thr493氨基酸序列结果:GAGpI的热稳定性及PH稳定性都有所提高,这主要是由于它含有额外的O-糖基化连接域,增加了糖基化位点,因此碳水化合物的含量也增加9淀粉结合域结构具有八条β折叠股,形成两个主要的β片层:第一个包括五个反平行的β链,第二个包括一个平行和一对反平行的链10淀粉结合域功能使得不溶性底物与溶液中的酶相互作用使底物结合到催化区域的活性位点上破坏淀粉颗粒的表面,提高淀粉水解率11水解过程先为吸附,然后形成一种复合体,破坏维系淀粉分子螺旋结构的氢键,然后不断水解淀粉的糖苷键,水解使得淀粉颗粒的表面形成一系列的空穴,最后达到破坏淀粉结构的效果。12水解速率13实际应用中存在的问题及拟解决途径水解α-1,6糖苷键的性能差热稳定性不够PH稳定性低1.添加普鲁兰酶2.改变CD

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